小蝴蝶昆蟲培養(yǎng)基的(dí)關(guān)鍵是培養(yǎng)基配方的開發(fā),已有(yǒu)多(duō)種培養(yǎng)基用(yòng)於支持(chí)昆(kūn)蟲細胞(bāo)係(xì)的(dí)生長(cháng)。昆(kūn)蟲細胞(bāo)培養所用(yòng)培養基一(yī)般(bān)均補(bǔ)加(jiā)FBS,血(xiě)清提(tí)供了細胞(bāo)生長過(guò)程(chéng)中所需的營養物(wù)質(zhì)和微量(liáng)元(yuán)素,使細胞能健康(kāng)生長和傳代。但(dàn)是FBS的使(shǐ)用(yòng)也存在著缺(quē)點(diǎn):價格高;每(měi)批血(xiě)清(qīng)的(dí)質(zhì)量不同,影響(xiǎng)細胞的生(shēng)長和(hé)病(bìng)毒(dú)復製;血(xiě)清中的(dí)蛋(dàn)白影(yǐng)響從培(péi)養(yǎng)的(dí)上清(qīng)液中分離(lí)和提取重組(zǔ)蛋白,使蛋白的(dí)純(chún)化更加(jiā)困難;血(xiě)清(qīng)易(yì)被(bèi)支原(yuán)體(tǐ)汙染。由(yóu)於部分(fēn)加入胎牛血清或(huò)牛血清(qīng)使典(diǎn)型(xíng)昆蟲培養基變得很(hěn)復雜。因此,無論工(gōng)業上或學(xué)術上,開發無血清培(péi)養基(jī)都是必然(rán)的趨勢。
由(yóu)於(yú)在無血清(qīng)培(péi)養基中含(hán)有從血(xiě)清或動物髒器中(zhōng)純化(huà)的(dí)蛋白(bái)成(chéng)分(fēn),如胰島素,轉(zhuǎn)鐵蛋白,白蛋(dàn)白(bái)和(hé)脂蛋(dàn)白等(děng),增加了(liǎo)分離純化的(dí)難度和(hé)成(chéng)本(běn)。細(xì)胞在無(wú)血清低蛋白(bái)或無(wú)蛋白培養基(jī)環(huán)境中對剪切(qiē)應力更(gēng)為敏(mǐn)感,故(gù)需(xū)適當(dāng)提高保護(hù)劑的濃度(dù)。無血清(qīng)培(péi)養(yǎng)基的應用(yòng)有(yǒu)時(shí)會降(jiàng)低(dī)重組蛋白的產(chǎn)量,在(zài)無血(xiě)清(qīng)培養基內,較高的(dí)細胞生(shēng)長(cháng)密度與相(xiāng)對(duì)較(jiào)低(dī)水(shuǐ)平的(dí)重組(zǔ)蛋(dàn)白(bái)產量這(zhè)一事實表(biǎo)明,促(cù)進細胞分裂的(dí)因(yīn)子(zǐ)與(yǔ)促進(jìn)重組蛋白(bái)生產(chǎn)的杆狀病(bìng)毒(dú)感染晚(wǎn)期起作用的因(yīn)子是(shì)不(bù)盡相同的。
小蝴(hú)蝶昆(kūn)蟲培(péi)養基旨在(zài)用於(yú)大規模(mó)擴增(zēng)草(cǎo)地貪夜蛾(Spodoptera frugiperda)細胞(bāo)係,也(yě)常用於通過(guò)杆(gān)狀病毒表達係統(tǒng)(BEVS)進(jìn)行蛋(dàn)白表(biǎo)達。 IPL-41培(péi)養(yǎng)基是(shì)對原始(shǐ)IPL配方(fāng)的改良(liáng),用於大(dà)規模擴增(zēng)草地(dì)貪夜蛾衍生(shēng)細(xì)胞(bāo)係。Weiss向(xiàng)基礎(chǔ)培養基中(zhōng)加(jiā)入了(liǎo)胎牛血(xiě)清(qīng)和(hé)TPB培養(yǎng)基(Tryptose Phosphate Broth),成功地(dì)實(shí)現(xiàn)了IPL-21 AE (III)細胞(bāo)係的(dí)大(dà)規(guī)模連續培養。該培養(yǎng)基主要用於培養(yǎng)和維護鱗翅類衍生細(xì)胞係和擴(kuò)增(zēng)這(zhè)些(xiē)細(xì)胞係的(dí)病(bìng)毒(dú)。IPL-41培養基(jī)基礎也(yě)以用於無(wú)血(xiě)清(qīng)夜(yè)蛾(é)細(xì)胞(bāo)的杆(gān)狀(zhuàng)病毒重組(zǔ)蛋白表(biǎo)達。