核酸提(tí)取(qǔ)是分(fēn)子生(shēng)物(wù)學(xué)研究(jiū)的(dí)基礎(chǔ)，而(ér)提(tí)取的(dí)核酸質(zhì)量好壞也(yě)是(shì)決定下(xià)遊實(shí)驗(yàn)成敗(bài)的關鍵因素之一(yī)。因此了(liǎo)解(jiě)核酸(suān)提取的基本原理(lǐ)和(hé)方法至關重(zhòng)要(yào)，一起(qǐ)來(lái)學(xué)習(xí)下吧
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一，什麼是(shì)核酸？

核酸分(fēn)為脫(tuō)氧(yǎng)核糖核酸(DNA)和(hé)核糖核酸(suān)(RNA)兩類，其中DNA主要(yào)集(jí)中(zhōng)在細胞核內(nèi)，葉綠(lǜ)體和綫粒(lì)體(tǐ)中，而RNA則主(zhǔ)要分(fēn)布(bù)在細胞(bāo)質中(zhōng)。核(hé)酸是(shì)分(fēn)子(zǐ)生物學(xué)研(yán)究的主要(yào)對象(xiàng)，那麼無論(lùn)是對核酸(suān)的結構還是(shì)核(hé)酸(suān)的功能進行研究，都需(xū)要對核酸進行提(tí)取和純化。

二(èr)，核(hé)酸(suān)提取(qǔ)的(dí)基(jī)本步驟(zhòu)

1.裂解細胞，釋放核(hé)酸(suān)：使用裂解(jiě)液裂解細胞，使(shǐ)核(hé)酸(suān)遊(yóu)離(lí)在裂解(jiě)體(tǐ)係中；

2.核酸的分(fēn)離與(yǔ)純化：除去和核(hé)酸結合(hé)的(dí)多(duō)糖，脂(zhī)類(lèi)，蛋白質等生物(wù)大(dà)分(fēn)子物質(zhì)以及(jí)其(qí)他(tā)雜(zá)誌分子；

3.核(hé)酸富集(jí)與洗脫：采(cǎi)用洗脫液(yè)處(chǔ)理(lǐ)，富集核(hé)酸(suān)。

三，核酸提取純(chún)化的常(cháng)見(jiàn)方法與選(xuǎn)擇

1.核酸(suān)提取方法(fǎ)——溶液法，柱膜(mó)法，磁(cí)珠法

（1）溶液法

最(zuì)jing典的核酸提(tí)取方(fāng)法(fǎ)是溶液法。細(xì)胞破碎(suì)或者組(zǔ)織(zhī)匀漿後用苯酚(fēn)氯仿(fǎng)處理，在水相中主要(yào)是以DNA為主，有機(jī)相(xiāng)中主要是多(duō)糖(táng)和(hé)脂類物(wù)質，蛋白質(zhì)沉澱於(yú)兩相(xiāng)之間(jiān)。離心分層(céng)後取(qǔ)水層(céng)，經過多次(cì)重復(fù)操作，並合並(bìng)含核酸的(dí)水(shuǐ)相，利(lì)用核(hé)酸(suān)不(bù)溶於醇(chún)的性質，用乙醇/異(yì)丙醇(chún)來沉(chén)澱核酸(suān)，然後(hòu)再(zài)進行分離(lí)和純化(huà)，溶解(jiě)後即可(kě)得(dé)到高純度核酸(suān)。

（2）柱(zhù)膜(mó)法

柱(zhù)膜法原理是基(jī)於(yú)矽膠膜吸附。矽膠(jiāo)膜(mó)表麵存在(zài)的(dí)矽(guī)醇基團(tuán)呈(chéng)弱酸性，水(shuǐ)化後(hòu)帶負(fù)電。如果(guǒ)溶(róng)液中存(cún)在一(yī)定濃(nóng)度(dù)的陽離(lí)子(zǐ)時(shí)，會中(zhōng)和DNA矽(guī)醇基(jī)團之間的(dí)表(biǎo)麵負電(diàn)荷，從(cóng)而使DNA能夠(gòu)牢固地吸附(fù)在矽膠(jiāo)膜表麵。反之(zhī)，如(rú)果處(chǔ)於低鹽(yán)水溶(róng)液(yè)時(shí)，DNA磷(lín)酸基(jī)團和矽膠膜的矽醇基團(tuán)之間(jiān)會存在靜(jìng)電(diàn)排(pái)斥，矽(guī)膠(jiāo)膜(mó)將DNA釋放出來。

（3）磁珠(zhū)法

磁珠法運(yùn)用(yòng)的是納(nà)米技術，對超順磁(cí)性(xìng)納米顆(kē)粒的表(biǎo)麵進行(háng)修(xiū)飾和改良(liáng)後，製備(bèi)成(chéng)超(chāo)順(shùn)磁性(xìng)氧化矽(guī)納(nà)米磁(cí)珠。該(gāi)磁(cí)珠能在微(wēi)觀(guān)界麵(miàn)上與核酸(suān)分(fēn)子特異(yì)性地(dì)識別並高效結合。核(hé)酸(suān)結合到(dào)磁珠上主要(yào)是依(yī)靠氫鍵作(zuò)用，靜電作(zuò)用和(hé)疏水作(zuò)用(yòng)。在異硫(liú)氰酸胍，鹽酸胍和(hé)外(wài)加磁(cí)場(cháng)的作(zuò)用(yòng)下，能從(cóng)樣(yàng)本中將(jiāng)核酸(suān)分(fēn)離出來，並洗(xǐ)去非特異性(xìng)吸(xī)附的雜質，得到純(chún)化(huà)後(hòu)的核酸。

2.磁珠法與柱膜法的比(bǐ)較(jiào)

三，提取(qǔ)方法(fǎ)的(dí)選(xuǎn)擇

如果(guǒ)對(duì)核(hé)酸提取(qǔ)的質(zhì)量要求(qiú)不高，可以(yǐ)選擇經濟實惠(huì)的(dí)溶液法，選擇柱膜法(fǎ)還(huán)是磁(cí)珠法(fǎ)自(zì)動化提取，基(jī)本上(shàng)取(qǔ)決於樣(yàng)本數(shù)量，針對大批量(liáng)的樣本，優(yōu)選磁(cí)珠(zhū)法(fǎ)自(zì)動化(huà)提(tí)取(qǔ)。如果對樣本(běn)數量較少，則可以(yǐ)選(xuǎn)擇柱膜法(fǎ)，既快速(sù)又經濟(jì)實用。

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