熒光原(yuán)位(wèi)雜(zá)交（Fluorescence in situ hybridization FISH）是一(yī)門新興的分(fēn)子細胞(bāo)遺(yí)傳(chuán)學技術(shù)，是 20 世紀 80 年(nián)代末(mò)期在原有(yǒu)的放射性原位雜交技術的(dí)基礎上發(fā)展起來的(dí)一種非放射(shè)性(xìng)原(yuán)位雜交(jiāo)技術。目(mù)前(qián)這(zhè)項(xiàng)技(jì)術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用(yòng)於動(dòng)植物(wù)基(jī)因組(zǔ)結構(gòu)研究，染色體(tǐ)精(jīng)細(xì)結構變(biàn)異分析(xī)，病毒(dú)感染(rǎn)分(fēn)析，人類(lèi)產(chǎn)前(qián)診斷，腫(zhǒng)瘤遺傳(chuán)學和基因(yīn)組進化研究待許多領(lǐng)域(yù)。FISH的基(jī)本原理(lǐ)是用已知(zhī)的(dí)標記(jì)單(dān)鏈核酸(suān)為(wéi)探針(zhēn)，按照(zhào)鹼(jiǎn)基(jī)互(hù)補(bǔ)的原(yuán)則，與待(dài)檢材料(liào)中未知的(dí)單(dān)鏈核酸(suān)進行異(yì)性結(jié)合，形成(chéng)可被檢測的(dí)雜交(jiāo)雙鏈核(hé)酸。由(yóu)於 DNA 分子在染色體上是(shì)沿著染色體縱軸呈綫性(xìng)排(pái)列，因而(ér)可以(yǐ)探針(zhēn)直(zhí)接與(yǔ)染色體進行雜交從(cóng)而將特(tè)定(dìng)的基因(yīn)在染色(sè)體(tǐ)上定位。與傳(chuán)統(tǒng)的放射性標(biāo)記(jì)原(yuán)位雜交(jiāo)相(xiāng)比，熒(yíng)光原位雜交具(jù)有快速，檢(jiǎn)測(cè)信(xìn)號強，雜交特(tè)異(yì)性高(gāo)和可以多重(zhòng)染(rǎn)色等(děng)特點(diǎn)，因此在(zài)分(fēn)子(zǐ)細胞遺(yí)傳學領(lǐng)域受到普(pǔ)遍關注(zhù)。雜交(jiāo)所(suǒ)用(yòng)的(dí)探針大致可(kě)以分類(lèi)三類(lèi)：1）染(rǎn)色體特異(yì)重(zhòng)復序列探針，例(lì)如(rú) α 衛星(xīng)，衛星 III類的探針，其(qí)雜交(jiāo)靶位常大(dà)於 1Mb，不含(hán)散(sàn)在(zài)重復(fù)序(xù)列，與靶位(wèi)結合緊(jǐn)密(mì)，雜(zá)交信號強，易於檢(jiǎn)測；2）全染色體(tǐ)或染色(sè)體區域(yù)特(tè)異(yì)性探(tàn)針(zhēn)，其(qí)由一(yī)條染(rǎn)色(sè)體或染色體(tǐ)上(shàng)某(mǒu)一(yī)區段上極duan不同(tóng)的(dí)核(hé)苷酸片段所組(zǔ)成，可(kě)由克(kè)隆(lóng)到噬(shì)菌體和(hé)質粒(lì)中的(dí)染色體特異大(dà)片(piàn)段獲得；3）特(tè)異(yì)性位置探針，由一個或(huò)幾個克隆(lóng)序(xù)列組成。探(tàn)針的熒(yíng)光(guāng)素標記(jì)可以采(cǎi)用(yòng)直(zhí)接(jiē)和間接(jiē)標(biāo)記(jì)的(dí)方法(fǎ)。間接(jiē)標記(jì)是采用(yòng)生(shēng)物素標(biāo)記DNA探(tàn)針，雜交(jiāo)之後用藕聯(lián)有(yǒu)熒光素親和(hé)素(sù)或(huò)者鏈(liàn)黴親和素進(jìn)行(háng)檢測，同(tóng)時還可以利用親(qīn)和(hé)素-生(shēng)物(wù)素-熒(yíng)光素復合(hé)物(wù)，將熒(yíng)光(guāng)信號進行(háng)放大，從而(ér)可以(yǐ)檢(jiǎn)測(cè) 500bp 的(dí)片段(duàn)。而直(zhí)接(jiē)標記法是(shì)將(jiāng)熒光素直接(jiē)與探針(zhēn)核苷(gān)酸或(huò)磷(lín)酸戊糖骨架(jià)共價(jià)結合，或(huò)在(zài)缺口(kǒu)平移法標記(jì)探(tàn)針時將熒光(guāng)素(sù)核苷三磷(lín)酸(suān)摻入(rù)。直接標記法在(zài)檢(jiǎn)測時(shí)步驟(zhòu)簡單，但由(yóu)於(yú)不能(néng)進(jìn)行信(xìn)號(hào)放(fàng)大(dà)，因(yīn)此靈(líng)敏(mǐn)度(dù)不如間(jiān)接標記的方法(fǎ)。更多有(yǒu)關(guān)什(shí)麼(mó)是熒光原(yuán)位雜(zá)交(jiāo)的問題，請(qǐng)聯(lián)係天(tiān)津(jīn)益元利康(kāng)生物科技有(yǒu)限公(gōng)司(sī)：
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