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更(gēng)新時間:2023-09-11
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在(zài)蛋白表達(dá)係統的(dí)相關(guān)研究中,從頭合(hé)成(chéng)蛋(dàn)白質(zhì)並不是一個可(kě)行的(dí)選(xuǎn)擇(zé)。因(yīn)此(cǐ)需要(yào)借(jiè)助(zhù)活細胞或(huò)細(xì)胞器用作生產和構建蛋白質的(dí)工(gōng)廠(chǎng)。那麼(mó)你知(zhī)道該(gāi)如(rú)何選擇(zé)蛋白(bái)表達係統嗎?讓我(wǒ)們一起(qǐ)來(lái)看看吧(bā)!
目前(qián),較(jiào)為(wéi)主流(liú)的(dí)表(biǎo)達宿(sù)主(zhǔ)有(yǒu)大(dà)腸杆(gān)菌(E.coli),畢赤酵(jiào)母(P.pastoris),昆蟲(chóng)-杆狀病毒(Bac-to-Bac係統)以及(jí)哺乳動物細胞(bāo)係(CHO,HEK293)等。
一(yī),細菌(jūn)
優點:
1. 遺(yí)傳(chuán)背景清楚;
2. 繁殖(zhí)快,成(chéng)本低,抗汙染(rǎn)能力強(qiáng);
3. 表達量高(gāo),表達產(chǎn)物分(fēn)離(lí)純化(huà)相對簡單,穩定(dìng)性好(hǎo);4. 商品化的載(zǎi)體(tǐ)和菌株(zhū)種(zhǒng)類非常齊全,適(shì)用(yòng)範圍廣等。
缺點(diǎn):
1. 沒(méi)有真核轉(zhuǎn)錄後(hòu)加工的功(gōng)能(néng),沒(méi)有翻譯後修(xiū)飾;
2. 表達(dá)的(dí)蛋白質(zhì)經(jīng)常是(shì)不溶的,容(róng)易形成包涵體;
3. 有一(yī)些真核蛋白的(dí)產(chǎn)量(liáng)和(hé)活性(xìng)較低;
4. 難(nán)以表(biǎo)達大分子哺乳(rǔ)動物蛋白(bái)質;
5. 可(kě)能(néng)會(huì)產(chǎn)生一些(xiē)致熱源(yuán)(內毒素(sù))
二(èr),酵母
優點:
1. 結(jié)合(hé)了(liǎo)真(zhēn)核和原(yuán)核(hé)的優(yōu)點(diǎn),可(kě)生產翻(fān)譯(yì)後(hòu)修(xiū)飾的分泌(mì)蛋(dàn)白和胞(bāo)內蛋白;
2. 經濟高效,部(bù)分(fēn)真(zhēn)核(hé)翻(fān)譯(yì)後修飾,如糖基化(huà),磷酸基化。
缺點:
1. 可能形成不(bù)正確的蛋白(bái)糖基化(huà);
2. 培(péi)養上清(qīng)多糖(táng)濃(nóng)度高(gāo)不利於純(chún)化(huà)
三,哺(bǔ)乳(rǔ)動物(wù)穩定(dìng)表(biǎo)達(dá)係統(tǒng)
優(yōu)點:
1. 蛋白(bái)活性:翻(fān)譯(yì)後再(zài)加(jiā)工(gōng)修飾(shì)折疊(dié)的(dí)功能產(chǎn)生(shēng)的外(wài)源(yuán)蛋白質(zhì),更(gēng)接(jiē)近(jìn)於蛋白質(zhì)的天然狀態。
2.正(zhèng)確的高級(jí)結構(gòu)(如糖基(jī)化)。
3.在蛋(dàn)白(bái)的起始(shǐ)信號(hào),加(jiā)工,分泌,糖(táng)基(jī)化方麵具(jù)有優勢(shì),適合表(biǎo)達完整(zhěng)的大分子(zǐ)蛋白(bái)。
缺(quē)點(diǎn):
培(péi)養(yǎng)基成本高,培養(yǎng)周期長,至少一個(gè)月(yuè)以(yǐ)上(shàng),培養較困難(nán),表(biǎo)達(dá)量(liáng)較低(dī)。構成復(fù)雜,操(cāo)作(zuò)技(jì)術(shù)要求高,表(biǎo)達(dá)產量不大(dà),產率低(dī)
四(sì),哺乳動(dòng)物(wù)瞬時表(biǎo)達係統
優(yōu)點:
1. 適度快速(sù)表(biǎo)達
2. 很好表達膜蛋(dàn)白(bái)和分(fēn)泌蛋(dàn)白
3. 所有蛋(dàn)白都能進行折(zhē)疊和(hé)最(zuì)真(zhēn)實(shí)的翻譯(yì)後修飾(shì)
缺點:
1. 比(bǐ)較貴(guì)
2. 胞(bāo)內(nèi)蛋(dàn)白(bái)產量(liáng)低(dī)
總之(zhī),各種表(biǎo)達係(xì)統各有優(yōu)缺點(diǎn),因此(cǐ),選擇(zé)表達係(xì)統(tǒng)時,應充分考慮(lǜ)各(gè)種(zhǒng)因(yīn)素更多有(yǒu)關(guān)蛋(dàn)白(bái)表達(dá)係統的(dí)選擇問(wèn)題,請聯係天津益元利康科技有(yǒu)限(xiàn)公(gōng)司(sī):

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