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更新(xīn)時間:2023-10-17
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酶(méi)聯免疫吸附試(shì)驗(Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA) 技(jì)術(shù)從1970年(nián)代發展(zhǎn)至(zhì)今(jīn)已近(jìn)半個世紀(jì),是一項實驗(yàn)室最(zuì)基(jī)本(běn)的免(miǎn)疫(yì)檢測技術(shù),被廣泛(fàn)的應用於(yú)基礎研究和(hé)臨(lín)床檢驗(yàn)。那麼麵(miàn)對市麵(miàn)上(shàng)數以千計的(dí)試劑盒,數百家(jiā)供應商,該如何(hé)選擇(zé)適合的(dí)ELISA試劑盒(hé)呢?讓我(wǒ)們一起(qǐ)來看(kàn)看吧!
一,明(míng)確研究種屬
一般(bān)來(lái)說,廠(chǎng)家(jiā)都(dū)會在(zài)產品(pǐn)名(míng)稱上標(biāo)明種屬,且(qiě)為shou個單詞(cí),檢(jiǎn)索種(zhǒng)屬的(dí)常(cháng)用(yòng)語言(yán)為英文。
如果您需(xū)對不同(tóng)物(wù)種的(dí)同(tóng)一因(yīn)子進(jìn)行(háng)定量,建議(yì)優先尋(xún)找(zhǎo)適(shì)用(yòng)於(yú)多個種屬的 ELISA 試劑(jì)盒(hé),產品介紹(shào)中會(huì)注(zhù)明(míng)「Multi-species」。
二,明(míng)確樣(yàng)本類型(xíng)
不(bù)同(tóng)廠家(jiā)驗證樣本類型不同(tóng),即(jí)使同(tóng)一廠家不同(tóng)試(shì)劑(jì)盒(hé),其驗證樣(yàng)本(běn)類型也(yě)不盡相同。特別(bié)是復(fù)雜的(dí)血(xiě)漿(jiāng)樣(yàng)本,根據樣本處(chǔ)理(lǐ)方(fāng)式的(dí)差(chà)異,分為(wéi) EDTA 血漿,肝素(sù)抗(kàng)凝血漿和(hé)檸檬酸(suān)鹽血漿(jiāng),因此購買(mǎi)前(qián)需(xū)仔(zī)細核(hé)對。
三,預測(cè)目標(biāo)因子的濃度(dù)
一般來說,待測(cè)因子可以根據經(jīng)驗或(huò)資(zī)料(liào)獲得參(cān)考的(dí)檢測範圍,且(qiě)正(zhèng)常(cháng)人(rén)與疾病狀(zhuàng)態(tài)存在(zài)差異。如熱(rè)門(mén)炎症因子 IL-6,正(zhèng)常(cháng)人血清中濃(nóng)度(dù)為 3.13 pg/mL,病(bìng)人(rén)會(huì)顯著(zhù)增高,CAR-T 回輸病人血清(qīng)中的 IL-6 濃度甚至為正(zhèng)常(cháng)人的(dí) 200 倍以上(shàng)。
因而,必要(yào)時進(jìn)行樣本(běn)的稀(xī)釋(shì)及選擇(zé)合(hé)適(shì)檢測(cè)範(fàn)圍(wéi)的(dí)試劑盒極(jí)其重要。
若濃(nóng)度(dù)太低(dī),可(kě)選(xuǎn)擇高敏試劑盒(hé);若(ruò)不確定(dìng)待測(cè)濃(nóng)度或樣本間(jiān)濃(nóng)度差(chà)異較大,建(jiàn)議(yì)使(shǐ)用(yòng)檢(jiǎn)測動(dòng)態(tài)範(fàn)圍(wéi)更寬的(dí)化學(xué)發光法ELISA試劑(jì)盒。
四(sì),檢查(chá)試劑盒(hé)進行過哪些質控
質(zhì)控(kòng)數(shù)據(jù)在說明書(shū)中即可找到,在(zài)購買前檢(jiǎn)查試劑盒是(shì)否進(jìn)行過嚴格(gé)的(dí)質控(kòng)實(shí)驗,包括批(pī)次內(nèi)(Intra-Assay)及批次(cì)間(jiān)(Inter-Assay),摻(chān)入(rù)回(huí)收(shōu)實(shí)驗(yàn),綫(xiàn)性稀釋(shì)實(shí)驗及交(jiāo)叉(chā)反應測(cè)試(shì)等(děng),每個數(shù)據(jù)最好都看一下,確保chao強(qiáng)的(dí)結(jié)果(guǒ)重(zhòng)現性及(jí)準確性(xìng)。
五,確定需檢測(cè)的因(yīn)子(zǐ)數量
如(rú)果(guǒ)待(dài)測因子超過 5 個(gè),且樣本量較(jiào)小時(shí),單因子 ELISA 檢(jiǎn)測(cè)方(fāng)法(fǎ)並不是最jia選(xuǎn)擇(zé)。
建議(yì)考(kǎo)慮多因(yīn)子(zǐ)檢測方(fāng)法,如固(gù)相芯(xīn)片(樣(yàng)本數量一般 5 個(gè)以(yǐ)內(nèi),檢測指標(biāo)可達上百個(gè))及 Luminex 液(yè)相(xiāng)芯(xīn)片方(fāng)法 (檢(jiǎn)測樣本多(duō)達 80 個,檢(jiǎn)測(cè)指標(biāo)多(duō)達 50 個(gè))或微流控(kòng) ELISA 檢測(cè)係(xì)統(tǒng) Ella。
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