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更(gēng)新(xīn)時間:2024-01-12
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細胞(bāo)克隆形(xíng)成(chéng)實(shí)驗是用(yòng)來檢(jiǎn)測細(xì)胞增殖(zhí)能力(lì),侵(qīn)襲(xí)性,對殺傷因(yīn)素(sù)敏(mǐn)感性(xìng)等(děng)項(xiàng)目的(dí)重要技術方(fāng)法(fǎ)。那麼(mó)你(nǐ)知(zhī)道(dào)細胞克隆的原(yuán)理與(yǔ)分(fēn)類嗎(má)?讓(ràng)我(wǒ)們(mén)一(yī)起來看看吧(bā)!
一,原(yuán)理
當單個細(xì)胞在(zài)體外(wài)增殖(zhí)6代(dài)以上(shàng),其(qí)後(hòu)代(dài)所(suǒ)組(zǔ)成的細胞(bāo)群體,成為(wéi)集落或克(kè)隆。其(qí)中細胞(bāo)克(kè)隆形(xíng)成(chéng)率即細胞接(jiē)種存(cún)活(huó)率,表(biǎo)示接種細胞後(hòu)貼壁的細胞成活(huó)並形(xíng)成(chéng)克隆的(dí)數量(liáng)。貼(tiē)壁後的細胞(bāo)不(bù)一定(dìng)每(měi)個都能增(zēng)殖和形(xíng)成克(kè)隆,而形(xíng)成(chéng)克(kè)隆的(dí)細胞(bāo)必為貼(tiē)壁(bì)和有(yǒu)增(zēng)殖(zhí)活(huó)力(lì)的細胞(bāo)。克(kè)隆形(xíng)成(chéng)率反(fǎn)映(yìng)細(xì)胞群(qún)體(tǐ)依(yī)賴(lài)性和增殖(zhí)能(néng)力兩(liǎng)個重(zhòng)要(yào)性狀(zhuàng)。
二,克隆(lóng)形(xíng)成(chéng)的(dí)目的
1)檢(jiǎn)測細(xì)胞(bāo)經幹預(yù)處理(lǐ)後(hòu)的(dí)克(kè)隆(lóng)形成能力來(lái)判(pàn)斷(duàn)幹預後是否(fǒu)影響(xiǎng)細胞(bāo)的增殖(zhí)和(hé)存(cún)活(huó)能力;
2)評價不同殺(shā)傷(shāng)因(yīn)素(藥(yào)物,基因等(děng))對腫(zhǒng)瘤細(xì)胞(bāo)增(zēng)殖能力或群(qún)體依賴(lài)性(xìng)的敏(mǐn)感性;
3)評價(jià)細(xì)胞(bāo)在體內成瘤性(xìng):腫瘤細(xì)胞不一(yī)定(dìng)都(dū)可以在(zài)體內(nèi)成瘤,若(ruò)體外克隆能力越(yuè)強,即表(biǎo)明(míng)體(tǐ)內成瘤(liú)性越(yuè)強,算(suàn)是(shì)一(yī)種模擬(nǐ)體(tǐ)內成瘤的體外(wài)實(shí)驗。
三(sān),克(kè)隆形成依(yī)據采用(yòng)的培養介質的不(bù)同,分為(wéi)平板克隆和軟(ruǎn)瓊脂(zhī)克隆(lóng)兩(liǎng)類(lèi)
1. 平(píng)板克(kè)隆(lóng)形成(Colony formation):細胞培養(yǎng)在培養基中(zhōng),應用(yòng)於(yú)貼(tiē)壁的細胞(bāo)。
2. 軟瓊(qióng)脂克隆形成(soft agar colony formation):細胞(bāo)被瓊(qióng)脂糖掛(guà)起(qǐ)來,主要(yào)應(yīng)用於(yú)懸(xuán)浮的腫(zhǒng)瘤細胞和(hé)轉化細(xì)胞係。
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