細胞(bāo)凍存是細胞(bāo)保(bǎo)存的(dí)主(zhǔ)要(yào)方法(fǎ)之(zhī)一。利用凍存(cún)技(jì)術(shù)將(jiāng)細胞置(zhì)於(yú)-196℃液氮(dàn)中低溫保存，可以(yǐ)使細(xì)胞暫時(shí)脫(tuō)離生(shēng)長狀態(tài)而將其細胞(bāo)特(tè)性(xìng)保(bǎo)存起來(lái)，這樣(yàng)在需(xū)要(yào)的(dí)時(shí)候再復(fù)蘇細胞用於(yú)實驗(yàn)。而且適度(dù)地(dì)保存一(yī)定(dìng)量的細(xì)胞(bāo)，可以防(fáng)止因正在(zài)培(péi)養的細(xì)胞被汙(wū)染或其他意(yì)外(wài)事件而(ér)使(shǐ)細(xì)胞(bāo)丟種，起到了細(xì)胞(bāo)保(bǎo)種的(dí)作用。

BAMBANKER是一種含DMSO的無(wú)血(xiě)清(qīng)細胞(bāo)凍存(cún)液，無(wú)不(bù)明(míng)動(dòng)物(wù)源成(chéng)分(fēn)，高質(zhì)量標準(zhǔn)為實驗效果(guǒ)帶來保證。不需要進行(háng)程(chéng)序降溫，可在-80℃長期保(bǎo)存細胞(bāo)（腫瘤(liú)細胞和常(cháng)規細胞(bāo)）。那(nà)麼你知道BAMBANKER® 無(wú)血清細胞凍存(cún)液凍(dòng)存細胞的(dí)方法(fǎ)嗎(má)？讓我(wǒ)們一(yī)來看看吧
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一，凍存操作步(bù)驟(zhòu)

①從(cóng)恒(héng)溫(wēn)箱中取(qǔ)出培(péi)養(yǎng)中(zhōng)處於(yú)對(duì)數增殖(zhí)期的細胞。

凍(dòng)存對(duì)數(shù)增(zēng)殖期的細(xì)胞，是(shì)可以確(què)保(bǎo)細(xì)胞良(liáng)好生存(cún)率(shuài)中最重要的一點。

②使用(yòng)部(bù)分(fēn)細胞(bāo)用台盼藍染(rǎn)色(sè)並計(jì)數細(xì)胞數量。

③將(jiāng)培養(yǎng)液移至(zhì)離心(xīn)管(guǎn)中(zhōng)，在(zài)規定條(tiáo)件下進行離(lí)心(xīn)。

④去除上清液(yè)後(hòu)，將雜質顆粒(lì)通(tōng)過旋渦操作(zuò)進行懸(xuán)浮(fú)。

⑤每個凍存容器(qì)中(zhōng)細(xì)胞數要保(bǎo)持規定濃(nóng)度(dù)，然後(hòu)再添(tiān)加(jiā)凍存液(yè)。（每(měi) 1mL 凍(dòng)存液(yè)可(kě)容(róng)納(nà) 5×10⁵-1×10⁷ 個細胞(bāo)）

之後的操作步驟盡可(kě)能快速完成(chéng)。另(lìng)外，凍(dòng)存(cún)液(yè)從冷藏(cáng)櫃(guì)取出(chū)後(hòu)，盡快進(jìn)行(háng)保存處(chǔ)理

⑥無(wú)需(xū)預冷(lěng)細胞懸浮(fú)液，直(zhí)接置(zhì)於-80℃下(xià)保存。

若儲存在冷(lěng)凍(dòng)處(chǔ)理(lǐ)容器 bicell中，效果更佳(jiā)。

⑦保存液氮(dàn)時(shí)，先在(zài)-80℃保存 12 小時(shí)（超過一晚(wǎn)），待狀態穩定後在移至液(yè)氮中保存(cún)。

轉(zhuǎn)移細(xì)胞時(shí)請盡(jìn)快完成(chéng)操(cāo)作(zuò)。

二(èr)，解凍操作(zuò)步(bù)驟

①在(zài) 37℃恒(héng)溫箱(xiāng)（或者水浴鍋）等設備(bèi)中(zhōng)解(jiě)凍細(xì)胞(bāo)，確(què)認細(xì)胞液wan全(quán)融解。

此(cǐ)操作需(xū)迅(xùn)速進行。因(yīn)為細(xì)胞在解凍(dòng)過(guò)程(chéng)過(guò)極易(yì)受到損壞。

②將細胞液(yè)注入(rù)到 10mL 的(dí)清洗液（培養液）中，混合wan全(quán)後(hòu)在(zài)規定(dìng)條件(jiàn)下進行(háng)離心

（比(bǐ)如：300～400×ｇ；半徑 21cm 轉(zhuǎn)子 1200rpm）

③去除上清液後，將雜質(zhì)顆(kē)粒(lì)通過(guò)旋(xuán)渦操(cāo)作(zuò)進(jìn)行(háng)懸(xuán)浮(fú)。

④加入培(péi)養(yǎng)液(yè)後混(hùn)合wan全後(hòu)，將其中一(yī)部(bù)分細胞用台(tái)盼藍染(rǎn)色並計數細(xì)胞數(shù)量。

⑤將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移(yí)至培養容器(qì)中(zhōng)，恒(héng)溫箱(xiāng)內靜置培養。

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