本(běn)產品(pǐn)是質譜分析前(qián)處理(lǐ)時zui常(cháng)用(yòng)的蛋白分(fēn)解(jiě)酶即賴氨(ān)酰肽鏈內切酶(méi)，該酶可以(yǐ)特異性(xìng)切(qiē)除(chú)賴(lài)氨(ān)酸基團(tuán)C末(mò)端(duān)的多肽，可(kě)用於(yú)蛋白(bái)測(cè)序(xù)分(fēn)析和Lys-X化(huà)合物(wù)的酶合(hé)成。若同時使用賴(lài)氨酰肽鏈內切酶和(hé)胰酶，可(kě)更好地切(qiē)斷(duàn)賴(lài)氨酸(suān) 基團的(dí)多肽，增加多(duō)肽(tài)的(dí)數(shù)量。產品已按照使用習(xí)慣做成小包(bāo)裝，是方(fāng)便(biàn)使(shǐ)用(yòng)的冷(lěng)凍(dòng)幹燥(zào)品。下麵(miàn)讓我(wǒ)們一起來看(kàn)看(kàn)Wako質譜(pǔ)級(jí)賴氨酸(suān)肽鏈內切酶(méi)(125-05061)的產(chǎn)品(pǐn)介紹吧！

一(yī)，產品(pǐn)屬性

來(lái)源(yuán)：細(xì)菌

外觀(guān)：凍幹粉(fěn)（包(bāo)含2 mmol/L Tris-HCl緩(huǎn)衝液，pH 8）

活性(xìng)：0.03～0.07 AU/vial

分(fēn)子(zǐ)量：27,000(瓊(qióng)脂糖(táng)過濾)，30,000（SDS-PAGE）

溶解性：溶於(yú)水(shuǐ)或緩(huǎn)衝液

穩定性：溶(róng)解(jiě)於pH值(zhí)5.0-12.0的Tris緩衝液(yè)中，可在(zài)4℃穩定(dìng)保(bǎo)存(cún)2年；在pH值(zhí)6.0-11.0 30℃時(shí)能(néng)穩定(dìng)保存(cún)，但溫度超過50℃時不(bù)穩定。

最適pH值(zhí)：9.0~9.5

等電點：6.9~7.0

底物(wù)特(tè)異性(xìng)：

可水解(jiě)底(dǐ)物——Tos-Lys-OMe，Bz-Lys-NH2，Bz-Lys-pNA，Lys-pNA

不可水解底物——Bz-Arg-NH2，Bz-Arg-pNA，Arg-pNA

抑(yì)製(zhì)劑(jì)：DFP，PMSF，TLCK

二(èr)，特點(diǎn)

（1）高特(tè)異性(xìng)，高(gāo)蛋白質消化率，適用於(yú)蛋白質(zhì)譜(pǔ)分析(xī)

（2）提高(gāo)裂解(jiě)效率，增加(jiā)肽段(duàn)數量(liáng)

（3）根(gēn)據(jù)使(shǐ)用量(liáng)特意製(zhì)備(bèi)小包(bāo)裝(zhuāng)，方便使(shǐ)用

三(sān)，應用

分(fēn)別(bié)采用(yòng)胰(yí)蛋(dàn)白(bái)酶(Tp)，賴(lài)氨酰(xiān)肽(tài)鏈內切(qiē)酶 (Lys-C) 和Tp與Lys-C聯用(yòng)進(jìn)行膠內(nèi)酶(méi)切的(dí)效果比較。牛(niú)血(xiě)清蛋白BSA 的條帶(100 ng) 通(tōng)過SDS-PAGE 獲(huò)得，然後分(fēn)別(bié)用(yòng)Tp，Lys-C和(hé)Lys-C+Tp進(jìn)行酶切(qiē)，再用MALDI-TOFMS法(fǎ)進(jìn)行(háng)分析。這些蛋白酶的(dí)實驗(yàn)效(xiào)果見下表(biǎo)。

胰蛋(dàn)白(bái)酶 (Tp)(圖a) 和賴(lài)氨(ān)酰(xiān)肽鏈內(nèi)切(qiē)酶(méi) (Lys-C)+Tp (圖(tú)b) 酶切後(hòu)的質譜結果(guǒ)對照(zhào)圖。

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