Hoechst是(shì)一種可(kě)以穿(chuān)透(tòu)細胞膜的(dí)膜通透(tòu)性熒光染(rǎn)料，在(zài)嵌入(rù)雙鏈(liàn)DNA後(hòu)釋(shì)放藍色(sè)熒光(guāng)，故正(zhèng)常細(xì)胞和(hé)中早期凋亡細胞均可被Hoechst著色(sè)，正(zhèng)常細胞核(hé) Hoechst 染(rǎn)色的形(xíng)態(tài)呈圓形，淡藍色，內有(yǒu)較深的藍色顆(kē)粒(lì)，而(ér)凋亡細胞(bāo)的細胞核由(yóu)於(yú)濃集而呈亮(liàng)藍(lán)色，或核(hé)呈分葉(yè)，碎片(piàn)狀(zhuàng)。

Hoechst 33342活細(xì)胞和死(sǐ)細(xì)胞均可。Hoechst 33342 能透(tòu)過胞膜完(wán)整的細(xì)胞(bāo)嵌(qiàn)入細胞核(hé) DNA 使之發出(chū)明亮的藍色熒光(guāng)。

碧雲(yún)天Hoechst 33342活細(xì)胞染色液100X(C1028)常用於細胞凋亡檢測(cè)，染色(sè)後用熒光顯微鏡觀(guān)察或流式細胞儀檢(jiǎn)測。Hoechst 33342也常用於普通(tōng)的(dí)細(xì)胞(bāo)核(hé)染(rǎn)色(sè)，或(huò)常(cháng)規的(dí)DNA染色(sè)。

使(shǐ)用說明(míng)：

1. 對於活細胞(bāo)或(huò)培養(yǎng)的(dí)組織：

對於(yú)培養(yǎng)器(qì)皿(mǐn)內(nèi)的(dí)活(huó)細胞或組織(zhī)，在培養液中均匀滴加(jiā)適量的(dí)Hoechst 33342活(huó)細胞(bāo)染色液(100X)至(zhì)終(zhōng)濃(nóng)度為1X，輕(qīng)柔(róu)混(hùn)匀(yún)。例(lì)如(rú)對於十(shí)二(èr)孔板(bǎn)中培(péi)養的細胞(bāo)，每孔有(yǒu)1ml的培(péi)養(yǎng)液(yè)，每(měi)孔(kǒng)需要加入(rù)10μl Hoechst 33342活細胞染(rǎn)色液(100X)。培(péi)養(yǎng)液中(zhōng)的(dí)血(xiě)清，酚紅等都不(bù)會(huì)對染色(sè)產生(shēng)幹擾(rǎo)。

2. 對於(yú)固定的(dí)細(xì)胞(bāo)或(huò)組織：

對(duì)於細(xì)胞或組織(zhī)樣(yàng)品(pǐn)，固定後，適(shì)當(dāng)洗滌去(qù)除(chú)固(gù)定(dìng)劑。隨後如果需要進(jìn)行免疫(yì)熒(yíng)光(guāng)染色，則先(xiān)進行免(miǎn)疫(yì)熒(yíng)光染色，染(rǎn)色完畢(bì)後再(zài)按後續步驟進(jìn)行Hoechst 33342染色(sè)。如果(guǒ)不需(xū)要進(jìn)行其它(tā)染色，則直(zhí)接進行後續的Hoechst 33342染(rǎn)色。

對於貼壁細胞或(huò)組(zǔ)織(zhī)切(qiē)片，加(jiā)入(rù)少量用(yòng)免(miǎn)疫(yì)染(rǎn)色洗滌液，PBS或生理鹽水稀(xī)釋至(zhì)1X的(dí)本產品(pǐn)，覆蓋(gài)住(zhù)樣品即(jí)可(kě)。對(duì)於(yú)懸浮細胞，至少加入待(dài)染色樣(yàng)品體積3倍(bèi)的染色液(yè)，混匀。室(shì)溫放置3-5分(fēn)鐘。

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