菌種(zhǒng)活化就(jiù)是將保(bǎo)藏狀態的菌種放(fàng)入適宜的培養(yǎng)基(jī)中培養,逐級擴(kuò)大(dà)培(péi)養得到純而壯(zhuàng)的培養(yǎng)物,即獲得(dé)活(huó)力(lì)旺盛的,接種數量足(zú)夠的培養(yǎng)物(wù)菌種發酵有一(yī)般需(xū)要2-3代的復(fù)壯過程,因為保存時(shí)的條(tiáo)件往往和培養(yǎng)時的條件(jiàn)不(bù)相同,所以(yǐ)要活(huó)化(huà),讓菌種(zhǒng)逐漸適應培(péi)養(yǎng)環境(jìng)。下麵讓我們(mén)一(yī)起來看看細菌(jūn)活化的(dí)方(fāng)法吧!
一,一(yī)般菌種臨(lín)時(shí)存放及活化
1.低溫(wēn)保存(cún)管應存放於-20℃ ~ -80℃之(zhī)低溫(wēn)條件下。
2.準備 37℃之(zhī) 70﹪酒精(jīng)浴槽(隻(zhī)能(néng)在電氣水(shuǐ)浴槽中改(gǎi)放(fàng)酒精(jīng),不(bù)可(kě)以火(huǒ)加溫(wēn),以免危險;若以 37℃水浴取(qǔ)代(dài),應(yīng)避免水中(zhōng)微生物汙染),其中事(shì)先安(ān)放(fàng)小試管(guǎn)架,液(yè)麵不(bù)可高達管塞(sāi)。
3.將低(dī)溫(wēn)保存管(guǎn)從(cóng)低溫保(bǎo)存(cún)條件中(zhōng)取出,置於 37℃浴槽(cáo)之小試(shì)管(guǎn)架上。
4.不(bù)斷輕微搖動低(dī)溫(wēn)保(bǎo)存(cún)管,液麵不可高(gāo)至(zhì)管塞(sāi),直至結冰溶(róng)解(約(yuē)需 2 分鐘)。
二,無菌(jūn)培養
1.用無菌微(wēi)量(liáng)吸管(guǎn),從已溶解(jiě)之低溫保(bǎo)存(cún)管(guǎn) 吸取 1-2滴之菌(jūn)液(yè),滴(dī)入固態(tài)培養(yǎng)基某一(yī)邊(biān)緣附(fù)近(jìn),以劃綫(xiàn)法接種(zhǒng)於(yú)培(péi)養基(jī)。
2.將接(jiē)種好的培(péi)養基(jī)置(zhì)於(yú)指定溫度(dù)的培(péi)養(yǎng)箱中(zhōng)培(péi)養。
三,平板劃綫(xiàn)分(fēn)離法(fǎ)
平板劃綫(xiàn)分(fēn)離(lí)法(fǎ)是(shì)指(zhǐ)把(bǎ)混雜在(zài)一(yī)起(qǐ)的(dí)微生(shēng)物(wù)或同一(yī)微生(shēng)物(wù)群體中(zhōng)的(dí)不同細胞(bāo)用接種環在(zài)平板(bǎn)培養基(jī)表麵通過分區(qū)劃(huá)綫稀(xī)釋而(ér)得(dé)到較多獨立(lì)分(fēn)布(bù)的(dí)單(dān)個細(xì)胞,經培養後生(shēng)長繁(fán)殖成單菌(jūn)落,通常把這(zhè)種單菌(jūn)落當(dāng)作(zuò)待分(fēn)離微生物的(dí)純(chún)種。有時這(zhè)種(zhǒng)單(dān)菌落(là)並(bìng)非都由(yóu)單個細胞(bāo)繁(fán)殖(zhí)而(ér)來的,故(gù)必須反復分(fēn)離(lí)多次(cì)才可(kě)得(dé)到純種。其原理是(shì)將(jiāng)微(wēi)生物樣品(pǐn)在(zài)固體培(péi)養基表麵(miàn)多次作(zuò)“由點到綫”稀釋(shì)而達(dá)到(dào)分離目的的(dí)。
1.手(shǒu)持金屬(shǔ)接種環,用酒(jiǔ)精(jīng)燈將接種環(共約(yuē)5cm)燒(shāo)至火紅(hóng),並不(bù)斷來回(huí)燒烤金屬固定(dìng)杆(gān)之(zhī)前(qián)約10公(gōng)分,等(děng)待約10秒(miǎo)鐘,將接種環(huán)前(qián)端(duān)輕(qīng)觸(chù)培養基(jī)邊緣凝膠(jiāo)(無(wú)菌體部份(fèn)),待(dài)接種(zhǒng)環(huán)冷(lěng)卻後(hòu),以(yǐ)環(huán)沾(zhān)黏(nián)菌滴(dī),由(yóu)培養基(jī)邊(biān)緣向中央輕輕(qīng)橫(héng)劃緊(jǐn)接的並(bìng)行(háng)綫(xiàn),直(zhí)到涵蓋1/3培(péi)養基為止(zhǐ)。
2.灼(zhuó)燒接種(zhǒng)環,待(dài)數秒(miǎo)冷(lěng)卻後,旋(xuán)轉培養(yǎng)基(jī)自I區(qū)塗布的邊緣再(zài)橫(héng)劃數(shù)條綫到未接種的區域(yù)。
3.重(zhòng)復(fù)2的(dí)動作完(wán)成。
4.灼燒接種(zhǒng)環,將接種(zhǒng)環(huán)歸(guī)位。
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