細胞(bāo)培養是指(zhǐ)從體(tǐ)內組織取出(chū)細(xì)胞(bāo)在體(tǐ)外模(mó)擬體內(nèi)環境(jìng)下，使其(qí)生長(cháng)繁(fán)殖，並維(wéi)持其結構(gòu)和功能的(dí)一種培養技(jì)術(shù)。細胞培(péi)養(yǎng)的培養物可以(yǐ)是(shì)單個細胞(bāo)，也可以是(shì)細(xì)胞(bāo)係(xì)。細(xì)胞(bāo)復(fù)蘇是(shì)細胞培(péi)養(yǎng)的(dí)重(zhòng)要(yào)環(huán)節(jié)，下麵讓我(wǒ)們一起(qǐ)來看看細胞實(shí)驗的(dí)常(cháng)見問題都有(yǒu)哪(nǎ)些吧！
 

　　1.如(rú)何(hé)選(xuǎn)用(yòng)細胞(bāo)係培養基(jī)？
 

　　優(yōu)先(xiān)根據細胞(bāo)來(lái)源(yuán)公(gōng)司提供的(dí)培(péi)養條件(jiàn)，其(qí)次參(cān)考(kǎo)ATCC推(tuī)薦細(xì)胞(bāo)對應培養基(jī)。一(yī)般建議(yì)不(bù)要隨意更(gēng)換培養(yǎng)基(jī)種類。細(xì)胞株(zhū)均有(yǒu)其特(tè)定(dìng)使用(yòng)且已適應的細胞(bāo)培養(yǎng)基(jī)，若驟然(rán)使用與原先提供(gōng)的培養條件不(bù)同的培(péi)養基，可能(néng)造成(chéng)細胞(bāo)形態發生變(biàn)化或無法(fǎ)存活，以及細胞的(dí)表(biǎo)型(xíng)功能丟(diū)失(shī)。
 

　　2.為何培(péi)養基用一(yī)段時(shí)間後(hòu)，顏色偏紫(zǐ)？
 

　　培(péi)養基隨著(zhuó)多次開蓋會使培(péi)養(yǎng)液CO2 逐漸溢出，造成培(péi)養(yǎng)基(jī)越(yuè)來(lái)越偏鹼性(xìng)從而(ér)變(biàn)紫(zǐ)，尤其(qí)是剩(shèng)餘的培(péi)養(yǎng)基(jī)越(yuè)少越(yuè)容(róng)易變(biàn)紫。可將培(péi)養(yǎng)瓶瓶(píng)蓋(gài)旋(xuán)鬆(sōng)放入二(èr)氧化碳培養(yǎng)箱校正(zhèng)溶液(yè)PH值(zhí)，過(guò)一(yī)段時(shí)間(jiān)就(jiù)會變(biàn)回(huí)正常。變(biàn)紫(zǐ)的(dí)培養(yǎng)基(jī)是(shì)可(kě)以繼續使用(yòng)的，培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)時在(zài)培養箱會自動恢(huī)復(fù)顏(yán)色(sè)。
 

　　3.細(xì)胞培養液變(biàn)黃變(biàn)渾(hún)，如(rú)何處理(lǐ)？
 

　　細胞培養液變(biàn)黃(huáng)多半(bàn)是(shì)細胞密度(dù)過大，細胞(bāo)增(zēng)殖(zhí)速(sù)度(dù)過快，產生大量(liáng)酸性代謝廢物，導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養不(bù)足(zú)。而培(péi)養(yǎng)液變渾(hún)多半(bàn)是發(fā)生了(liǎo)細菌汙(wū)染。出現這(zhè)種情(qíng)況應立(lì)即(jí)進行消(xiāo)化傳代處理。
 

　　4.血(xiě)清中(zhōng)出現(xiàn)的沉(chén)澱(diàn)是什麼，有(yǒu)影響嗎(má)？
 

　　①纖維(wéi)蛋(dàn)白，是(shì)經(jīng)常(cháng)出(chū)現的較大沉(chén)澱物，可(kě)達到1-2mm，用(yòng)肉眼可觀察(chá)到；
 

　　②膽固(gù)醇(chún)，脂(zhī)肪(fáng)酸酯以及一(yī)些(xiē)蛋白質，是(shì)血清出(chū)現沉(chén)澱物的常見原(yuán)因(yīn)；
 

　　③磷酸鈣(gài)，也是(shì)一種常見沉(chén)澱物(wù)，通常(cháng)會(huì)使血(xiě)清出現渾(hún)濁，並(bìng)且(qiě)在37℃培養(yǎng)時會增(zēng)加。這(zhè)種沉澱物在(zài)倒置顯(xiǎn)微鏡下(xià)觀(guān)察(chá)像(xiàng)小黑點，這(zhè)些小黑點由於布朗運(yùn)動看上去可以活動(dòng)，因此(cǐ)經常(cháng)被誤(wù)認為(wéi)是微(wēi)生(shēng)物汙(wū)染(rǎn)。
 

　　5.細(xì)胞(bāo)何時換液最佳？
 

　　①細胞消化(huà)傳(chuán)代後，建議(yì)隔天或隔(gé)兩(liǎng)天(tiān)換一次(cì)液(yè)；
 

　　②細(xì)胞傳(chuán)代後，發現碎片(piàn)多，死(sǐ)細(xì)胞多，在(zài)細胞形(xíng)態(tài)已經形成的前(qián)提(tí)下可第(dì)二天(tiān)換液(yè)；
 

　　③對於(yú)生長速(sù)度(dù)較(jiào)慢的細(xì)胞(bāo)，可(kě)多(duō)放點培(péi)養基，減少換(huàn)液次數(shù)，讓細(xì)胞靜(jìng)養(yǎng)；
 

　　④細(xì)胞傳代後，細(xì)胞分布不(bù)均，細(xì)胞堆疊，細胞(bāo)間隙大，局部密(mì)度大，這些情況下(xià)不用換液，可(kě)采取消(xiāo)化(huà)重鋪(pū)的方式。
 

　　7.細胞(bāo)支(zhī)原(yuán)體(tǐ)汙染如(rú)何(hé)處(chǔ)理？
 

　　支(zhī)原體汙(wū)染是比較(jiào)難去(qù)除(chú)的，特(tè)別容易復發，一般(bān)建議(yì)直接(jiē)更(gēng)換新(xīn)的細胞(bāo)，如(rú)特別精(jīng)貴或重(zhòng)要(yào)的細胞(bāo)可嘗試(shì)使(shǐ)用四(sì)環素(sù)，大環(huán)內酯(zhǐ)類抗(kàng)生素(sù)(泰樂黴(méi)素)，喹(kuí)諾酮類(lèi)抗生素。
 

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