DNA聚(jù)合(hé)酶是催化DNA或(huò)RNA為模板合成(chéng)DNA的一(yī)類(lèi)酶的(dí)總(zǒng)稱(chēng)，又(yòu)稱DNA依賴(lài)的(dí)DNA聚合(hé)酶(méi)（DNA—dependent DNA polymerase，DNA pol），它是(shì)以(yǐ)親代(dài)DNA為模(mó)板，催(cuī)化底(dǐ)物dNTP分子聚合形成(chéng)子(zǐ)代DNA的(dí)一(yī)類酶(méi)。此酶是(shì)美(měi)國科(kē)學家Arthur Komberg於1957年(nián)在(zài)大腸杆菌中發現(xiàn)的，被稱為DNA聚合酶(méi)Ⅰ（DNA polymerase Ⅰ，簡稱(chēng)polⅠ）以(yǐ)後陸續(xù)在(zài)其他(tā)原核(hé)生(shēng)物及真核(hé)生物(wù)中找到了多(duō)種DNA聚(jù)合(hé)酶。這些聚合(hé)酶的共同(tóng)特(tè)點是：它(tā)們都(dū)能(néng)把脫氧核糖核苷酸（dNTP）連(lián)續的(dí)加(jiā)到雙鏈DNA引物鏈的3'-羥基(jī)末(mò)端上，催化(huà)核苷(gān)酸的聚(jù)合(hé)，形(xíng)成新的DNA鏈(liàn)。

PCR DNA聚合酶(méi)的(dí)種類包括Taq DNA聚(jù)合酶，高(gāo)保(bǎo)真(zhēn)DNA聚合酶(méi)，熱啟動DNA聚合酶(méi)，等溫擴增(zēng)DNA聚(jù)合酶和鏈置換DNA聚合酶等。

一，PCR DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)：

1. Taq DNA聚合(hé)酶(méi)

特(tè)點(diǎn)：Taq DNA聚合酶是從(cóng)水(shuǐ)生棲熱菌中(zhōng)分離提(tí)取的，具有很(hěn)高的(dí)熱(rè)穩定性(xìng)，能夠在70℃保(bǎo)持活性，適合(hé)標準的PCR反應(yīng)。它(tā)缺乏3’→5’核酸(suān)外切酶活(huó)性(xìng)，因此(cǐ)無校正功能(néng)，容易產(chǎn)生(shēng)錯配鹼基(jī)。

應用(yòng)：用於常規PCR擴增，尤其是(shì)當對保真(zhēn)度要求不高(gāo)時。其擴(kuò)增(zēng)產物3’末(mò)端帶(dài)有(yǒu)A尾(wěi)，可(kě)直接用(yòng)於TA克隆(lóng)。

2. 高保(bǎo)真(zhēn)DNA聚(jù)合酶(méi)

特(tè)點：這類(lèi)酶具有3’→5’核(hé)酸(suān)外(wài)切酶活性(xìng)，能夠(gòu)校(xiào)正錯(cuò)誤(wù)插入的(dí)核苷酸(suān)，顯著(zhù)降低錯配率。常(cháng)見的有(yǒu)Pfu，KOD，Phusion等。

應用(yòng)：適(shì)用於需要高保(bǎo)真度(dù)的應用場景，如基因(yīn)克隆，定(dìng)點(diǎn)突(tū)變(biàn)，測(cè)序(xù)及(jí)SNP分析等(děng)。例如(rú)，Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase具有(yǒu)很(hěn)高(gāo)的保真性和擴增效率，適(shì)用於復雜(zá)模(mó)板的(dí)高保真(zhēn)擴(kuò)增。

3. 熱(rè)啟動(dòng)DNA聚合(hé)酶(méi)

特點(diǎn)：通過化(huà)學(xué)修(xiū)飾(shì)或抗體結合(hé)，在室(shì)溫下抑製其(qí)活性(xìng)，直到高(gāo)溫(wēn)激活。這種酶(méi)可減少非(fēi)特(tè)異(yì)性(xìng)擴增(zēng)，提(tí)高PCR反應(yīng)的特(tè)異(yì)性和靈(líng)敏(mǐn)度(dù)。

應(yīng)用：適用於(yú)需要高特(tè)異(yì)性擴增(zēng)的實驗(yàn)，如(rú)多(duō)重PCR，復雜模板(bǎn)的擴增等。例如，Hieff Union Hotstart High Specific Taq DNA Polymerase能夠有(yǒu)效(xiào)防(fáng)止非特異性(xìng)擴(kuò)增(zēng)，並(bìng)提(tí)高擴(kuò)增(zēng)特(tè)異(yì)性(xìng)。

4. 等(děng)溫擴增(zēng)DNA聚合(hé)酶

特點：這類酶(méi)具(jù)有鏈置換活性和(hé)5’→3’聚合酶活性，能(néng)在恒(héng)溫條(tiáo)件下進行(háng)快(kuài)速，高效，特異(yì)性擴增。

應用(yòng)：適(shì)用(yòng)於等溫擴增技(jì)術，如LAMP，CPA，RCA等。例(lì)如，Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase具有更(gēng)高的靈敏度，擴增效(xiào)率和穩(wěn)定(dìng)性(xìng)，且增加(jiā)了(liǎo)dUTP耐(nài)受性(xìng)，非常(cháng)適(shì)合(hé)基於(yú)等溫擴增(zēng)技術的應用。

5. 逆(nì)轉(zhuǎn)錄(lù)DNA聚合(hé)酶

特(tè)點：這類酶(méi)以RNA為(wéi)模(mó)板(bǎn)，按(àn)5’→3’方(fāng)向合(hé)成(chéng)互補DNA（cDNA），常用(yòng)於研(yán)究(jiū)基因(yīn)表達。

應(yīng)用：用於將(jiāng)RNA轉錄為DNA，如RT-PCR，qRT-PCR等。常用的逆轉(zhuǎn)錄酶(méi)包括M-MLV和AMV。

6. 鏈(liàn)置(zhì)換DNA聚(jù)合酶(méi)

特(tè)點(diǎn)：具(jù)有強鏈(liàn)置換(huàn)活性，可以(yǐ)在(zài)DNA復製過程(chéng)中取(qǔ)代舊(jiù)鏈(liàn)，常用於等溫擴增技術。

應(yīng)用：適用於基於鏈置(zhì)換的等(děng)溫擴增反(fǎn)應，如LAMP和滾(gǔn)環(huán)擴(kuò)增（RCA）。例(lì)如，Bca best聚合(hé)酶(méi)和(hé)phi29 DNA聚(jù)合酶(méi)在擴增速(sù)度，產量和熱(rè)穩(wěn)定(dìng)性方麵都有優異(yì)的表現。

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