ELISA,全稱(chēng)為:酶聯免疫吸附測(cè)定法(fǎ) (enzyme-linked immunosorbent assay),是(shì)用(yòng)於(yú)檢測體液中微(wēi)量物(wù)質(zhì)的固相(xiāng)免疫(yì)測(cè)定方法。它(tā)是(shì)一(yī)種特殊的試(shì)劑分(fēn)析(xī)方法(fǎ),是在免(miǎn)疫(yì)酶技術(shù)( immunoenzymatic techniques ) 的基(jī)礎(chǔ)上發展(zhǎn)起來的一種新(xīn)型的(dí)免(miǎn)疫(yì)測(cè)定技術(shù)。那讓我們一(yī)起來看看ELISA的(dí)基(jī)本原(yuán)理吧(bā)!
ELISA 的基(jī)礎是抗原或抗(kàng)體的(dí)固相化(huà)及(jí)抗(kàng)原或抗體(tǐ)的酶(méi)標(biāo)記。結合在固(gù)相載(zǎi)體表麵(miàn)的(dí)抗(kàng)原或抗體仍(réng)保(bǎo)持(chí)其免疫學活(huó)性,酶標記的(dí)抗原(yuán)或抗(kàng)體(tǐ)既保(bǎo)留其(qí)免疫學(xué)活性,又保(bǎo)留(liú)酶(méi)的(dí)活性(xìng)。在(zài)測(cè)定時,受檢標本(běn)(測定(dìng)其中的(dí)抗(kàng)體(tǐ)或抗原(yuán))與(yǔ)固相載(zǎi)體(tǐ)表(biǎo)麵(miàn)的(dí)抗原或抗體起反應。用洗(xǐ)滌的(dí)方法使(shǐ)固(gù)相載(zǎi)體(tǐ)上形(xíng)成的抗原抗體(tǐ)復合(hé)物(wù)與(yǔ)液體中的(dí)其(qí)他(tā)物質分開(kāi)。再加入酶(méi)標記的抗原或抗體(tǐ),也通(tōng)過反(fǎn)應而(ér)結合(hé)在固相載(zǎi)體(tǐ)上(shàng)。此時(shí)固相上的(dí)酶(méi)量與(yǔ)標(biāo)本中受檢物(wù)質的量呈一定的(dí)比例。加入(rù)酶反應的(dí)底物後(hòu),底物(wù)被酶催(cuī)化水解(jiě)或氧(yǎng)化還(huán)原(yuán)反(fǎn)應而成為(wéi)有(yǒu)色產(chǎn)物,產物(wù)的(dí)量與標(biāo)本(běn)中受(shòu)檢(jiǎn)物質(zhì)的(dí)量直(zhí)接相關,故可根據(jù)呈(chéng)色的深淺(qiǎn)進行定性(xìng)或(huò)定量分(fēn)析(xī)。由於(yú)酶(méi)的(dí)催(cuī)化(huà)效(xiào)率(shuài)很(hěn)高,間接地放大了免疫(yì)反(fǎn)應的(dí)結(jié)果(guǒ),使測(cè)定方法(fǎ)達(dá)到很高的敏感度(dù)。所生(shēng)成有色產物的顏(yán)色深(shēn)淺(qiǎn)與欲(yù)測的(dí)抗原(yuán)(抗(kàng)體)含量(liáng)成正(zhèng)比(bǐ)。這種有(yǒu)色(sè)產物可(kě)用(yòng)肉眼(yǎn),光(guāng)學(xué)顯微鏡(jìng),電(diàn)子顯微(wēi)鏡(jìng)觀察,也可以用(yòng)分光光(guāng)度計(酶標(biāo)儀(yí))加以測定。其方法簡(jiǎn)單,方(fāng)便迅(xùn)速,特異性(xìng)強(qiáng)。
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