一，抗(kàng)體純化

為(wéi)了提高(gāo)特(tè)異(yì)性(xìng)結(jié)合目標抗(kàng)原(yuán)的免(miǎn)疫球蛋(dàn)白濃度(dù)
，抗(kàng)血清(qīng)，腹水或細(xì)胞上清需(xū)要進一(yī)步純(chún)化以去(qù)除(chú)非(fēi)目(mù)標抗原免(miǎn)疫球(qiú)蛋白(bái)和(hé)其(qí)它(tā)血(xiě)清蛋白。無論(lùn)是多(duō)克隆(lóng)抗體還是(shì)單克隆抗(kàng)體
，純化方(fāng)法的選(xuǎn)擇至(zhì)關重要
，其(qí)中單克(kè)隆抗體(tǐ)需要根(gēn)據抗體亞型來選擇(zé)合(hé)適的親和介質或(huò)沉澱(diàn)方(fāng)法(fǎ)。多(duō)克隆抗(kàng)體 一(yī)般選擇用抗原(yuán)蛋白(bái)偶(ǒu)聯親(qīn)和柱(zhù)進行(háng)特異(yì)性(xìng)抗體(tǐ)收集(jí)。

二，怎樣(yàng)純(chún)化抗體才能提高特異性？

目前常用的(dí)親和(hé)純化方(fāng)式主要是抗(kàng)原親(qīn)和純化和 Protein A 或(huò) G 純化(huà)。

1.抗原親(qīn)和(hé)純化

抗(kàng)原親(qīn)和(hé)純化(huà)是(shì)基(jī)於抗(kàng)原 - 抗體可逆結合的特(tè)性(xìng)產(chǎn)生(shēng)的一種純(chún)化免疫球(qiú)蛋(dàn)白的方法
，通過交聯(lián)到樹(shù)脂上的抗原(yuán)
，純(chún)化出與抗(kàng)原有特(tè)異(yì)性(xìng)反應的(dí)抗體
，這(zhè)一(yī)純化方法大量(liáng)的去(qù)除了非特異性(xìng)的(dí)免疫(yì)球(qiú)蛋白(bái)成分
，得(dé)到(dào)的(dí)抗(kàng)體(tǐ)特異性更高(gāo)。

2.Protein A 或(huò) G 純化(huà)

Protein A 或 G 純化是(shì)利(lì)用金黃(huáng)色葡萄(táo)球(qiú)菌的(dí)蛋白(bái) A(Protein A) 或鏈球(qiú)菌的蛋白 G(Protein G)  對(duì)免疫(yì)球蛋白(bái) Fc 段(duàn)的高(gāo)親和性(xìng)
，從(cóng)抗血(xiě)清(qīng)中(zhōng)去(qù)除(chú)血清蛋(dàn)白(bái)
，這一方(fāng)法無法(fǎ)去除非(fēi)特(tè)異性(xìng)免(miǎn)疫球蛋(dàn)白。

3.兩種方式(shì)區別

用(yòng) Protein A 或(huò) G 純化(huà)的(dí)多(duō)抗通常會(huì)有交叉(chā)反應
，在(zài)實(shí)驗中(zhōng)可(kě)能(néng)產生背景(jǐng)，雜(zá)信號甚至(zhì)假陽性(xìng)。

采用抗原(yuán)親和純化
，雖然得率較 Protein A 或 G 純(chún)化(huà)的低
，但(dàn)抗體(tǐ)特(tè)異(yì)性得(dé)到很大提高(gāo)。

單(dān)克隆抗體大部分采用(yòng) Protein A 或(huò) G 的(dí)純化(huà)方法
，因為(wéi)小鼠腹水(shuǐ)成(chéng)分比抗血(xiě)清簡(jiǎn)單且(qiě)雜(zá)抗(kàng)體(tǐ)含(hán)量比(bǐ)例小(xiǎo)
，采用這一(yī)方法(fǎ)得到的(dí)單抗濃度高(gāo)且(qiě)特(tè)異性不受(shòu)幹擾(rǎo)。

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