HGC-27細(xì)胞(bāo)是一種來(lái)源於人(rén)胃癌患者(zhě)轉(zhuǎn)移(yí)性(xìng)淋巴(bā)結的(dí)低(dī)分(fēn)化胃癌細(xì)胞係，具有(yǒu)較強(qiáng)的侵(qīn)襲性和增(zēng)殖(zhí)能(néng)力，常用於研究胃(wèi)癌的分(fēn)子機製(zhì)，藥(yào)物(wù)篩選以及侵襲與轉移特性(xìng)分(fēn)析(xī)。它在(zài)體外呈(chéng)上皮(pí)樣(yàng)貼壁(bì)生長，呈(chéng)多(duō)角形(xíng)或短梭(suō)形，以(yǐ)單層(céng)形式(shì)生長。能夠(gòu)在免(miǎn)疫缺陷小鼠(shǔ)中(zhōng)形成移(yí)植瘤(liú)，是胃癌相關(guān)研究的重要模(mó)型(xíng)。

一(yī)，實(shí)驗(yàn)準備(bèi)（關(guān)鍵物料(liào)清單(dān)）

✅ 細(xì)胞來源：建議從(cóng)ATCC/中科院細(xì)胞庫獲取（批(pī)號(hào)可溯(sù)源(yuán)）
✅ 培養基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1%雙(shuāng)抗(kàng)（Gibco品牌(pái)優選(xuǎn)）
✅ 儀(yí)器(qì)：37℃恒溫CO₂培養箱(xiāng)（CO₂濃(nóng)度(dù)5%），生(shēng)物安全櫃(guì)（潔淨度(dù)100級(jí)）

二，詳(xiáng)細培(péi)養步驟

1. 復蘇操(cāo)作

快速解凍37℃水浴≤2分鐘離心去DMSO1000rpm×5min重懸接種初始密度2×10⁴ cells/cm²

⚠️ 防凍(dòng)傷要(yào)點：解凍後(hòu)立即(jí)轉(zhuǎn)移至(zhì)預(yù)溫培(péi)養基

2. 傳代方法(fǎ)

• 消(xiāo)化(huà)控製(zhì)：0.25%胰(yí)酶(méi)（含EDTA）作(zuò)用(yòng)2-3分(fēn)鐘(zhōng)（鏡下(xià)觀察(chá)細(xì)胞變圓）

• 終(zhōng)止技巧：加(jiā)入含(hán)血(xiě)清培養(yǎng)基(jī)（體(tǐ)積≥3倍(bèi)消化液）

• 分(fēn)瓶比例：1:3至1:4（24-48小時可達80%融(róng)合度）

3. 凍存方(fāng)案

• 凍存液(yè)配方：90% FBS + 10% DMSO（現(xiàn)用(yòng)現配）

• 程序(xù)降溫(wēn)：4℃ 30min → -20℃ 2h → 液氮長(cháng)期保(bǎo)存

三，培養問題排(pái)查（附(fù)解(jiě)決(jué)方(fāng)案）

⚠️ 注意(yì)事(shì)項(xiàng)（提(tí)升實驗成功(gōng)率）

• 狀(zhuàng)態監(jiān)控：每(měi)日觀察細胞形(xíng)態(tài)（貼壁率＜50%需(xū)排(pái)查(chá)）

• 傳(chuán)代(dài)周(zhōu)期：不超過30代（建(jiàn)議(yì)定(dìng)期(qī)STR鑒定）

• 汙染(rǎn)預(yù)防：操作前紫外(wài)滅菌30min，試劑(jì)瓶(píng)酒精噴(pēn)淋

  
  

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