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當(dāng)前位(wèi)置:首頁技(jì)術文章(zhāng)胎牛血清(qīng)有沉澱正常嗎(má)

胎牛血(xiě)清有沉(chén)澱(diàn)正常嗎(má)

更(gēng)新(xīn)時間(jiān):2025-04-08點擊(jī)次數(shù):1874

胎(tāi)牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)在儲存(cún)或使(shǐ)用過(guò)程(chéng)中(zhōng)出(chū)現少(shǎo)量沉澱通常是正常現(xiàn)象,但(dàn)需根據沉(chén)澱的性質(zhì)和實驗(yàn)需(xū)求(qiú)判斷(duàn)是(shì)否需(xū)要處理(lǐ)。以(yǐ)下是具(jù)體(tǐ)分(fēn)析(xī)

一,沉澱的常見(jiàn)原(yuán)因

1. 纖(xiān)維(wéi)蛋(dàn)白(bái)原(yuán)聚(jù)合:
胎(tāi)牛血(xiě)清中含有纖(xiān)維蛋(dàn)白原(Fibrinogen),在解凍或長(cháng)期靜(jìng)置(zhì)後(hòu)可能形成絮狀或(huò)顆粒狀(zhuàng)沉澱(肉眼(yǎn)可見白(bái)色(sè)絮狀(zhuàng)物)。這是最(zuì)常(cháng)見(jiàn)的正常(cháng)現象(xiàng)。

2. 磷酸(suān)鈣(gài)結(jié)晶:
血清(qīng)中的(dí)鈣,磷(lín)離(lí)子(zǐ)在低(dī)溫(wēn)或反(fǎn)復凍融(róng)時可能形成細(xì)微結(jié)晶(jīng)(顯(xiǎn)微(wēi)鏡(jìng)下可(kě)見)。

3. 脂蛋白聚集(jí):
血清中(zhōng)的脂類(lèi)成(chéng)分(fēn)在(zài)低溫下(xià)可(kě)能(néng)析(xī)出,形成渾濁(zhuó)或沉澱。

4. 蛋(dàn)白質變性:
高(gāo)溫,劇(jù)烈(liè)震(zhèn)蕩或(huò)反復凍融可能導致(zhì)部(bù)分蛋白(bái)質變性沉(chén)澱(通常(cháng)伴(bàn)隨顏色變(biàn)化或渾(hún)濁)。

二,如何判斷是否正常(cháng)?

特(tè)征

正常沉澱

異(yì)常變質(zhì)

顏色

血(xiě)清(qīng)仍為(wéi)淡黃色,透明

渾(hún)濁,發紅或發黑(hēi)

沉(chén)澱形態(tài)

白色絮狀(zhuàng)或(huò)細顆粒(lì),可(kě)溶解(jiě)於(yú)37°C水(shuǐ)浴

塊狀(zhuàng),無(wú)法溶(róng)解,或伴有異味

細胞培養影響(xiǎng)

通常(cháng)不影(yǐng)響(xiǎng)細胞(bāo)生(shēng)長

細胞死亡,貼(tiē)壁差或汙(wū)染(rǎn)


三(sān),如(rú)何處(chǔ)理沉(chén)澱?

常(cháng)規操(cāo)作:

將(jiāng)血(xiě)清(qīng)置(zhì)於(yú) 37°C水浴 中輕(qīng)輕搖晃至(zhì)沉wanquan溶(róng)解(纖(xiān)維(wéi)蛋白原或(huò)磷酸(suān)鈣(gài)沉澱(diàn)通(tōng)常可(kě)逆)。

溶解(jiě)後 4°C靜(jìng)置(zhì)1小(xiǎo)時(shí),取上(shàng)清液(yè)使(shǐ)用(避免吸取(qǔ)底部沉澱(diàn))。

過濾除(chú)菌:
若(ruò)沉澱(diàn)較多或(huò)實(shí)驗敏(mǐn)感(如(rú)幹細(xì)胞培養(yǎng)),可用 0.22μm濾膜(mó) 過(guò)濾後使用(yòng)。

四(sì),需(xū)要(yào)更(gēng)換(huàn)血清(qīng)的情(qíng)況(kuàng)

以下情況可能(néng)提示血清(qīng)變質(zhì),建議停止使(shǐ)用:

1. 沉澱(diàn)無(wú)法通(tōng)過37°C溶(róng)解(jiě),且血清渾(hún)濁(zhuó),變(biàn)色。

2. 血清(qīng)有明(míng)顯(xiǎn)異味(如酸(suān)敗(bài)味)。

3. 使用後(hòu)細(xì)胞出(chū)現(xiàn)異(yì)常死(sǐ)亡或(huò)汙染。

五,如何減少沉澱產(chǎn)生(shēng)?

1. 分裝(zhuāng)凍存:避免反復凍(dòng)融,按(àn)需(xū)分(fēn)裝為小份(如50ml/管(guǎn)),-20°C保存。

2. 緩慢解凍:4°C過夜(yè)解(jiě)凍(dòng),或室(shì)溫靜置(zhì)至部分融化(huà)後(hòu)混匀。

3. 輕柔(róu)操作:避免(miǎn)劇烈(liè)搖(yáo)晃或高溫環境(如長時(shí)間置於37°C水(shuǐ)浴)。

總結

少量(liáng)白色絮(xù)狀(zhuàng)沉澱(diàn)(纖(xiān)維蛋白原(yuán)相關)是(shì)正常(cháng)現(xiàn)象(xiàng),不影響(xiǎng)大(dà)多(duō)數(shù)實驗;若沉澱不可(kě)逆,血清(qīng)性(xìng)狀改(gǎi)變(biàn)或(huò)影響細(xì)胞活(huó)性(xìng),則需(xū)更換(huàn)新(xīn)批(pī)次(cì)血(xiě)清(qīng)。建議選(xuǎn)擇正(zhèng)規品(pǐn)牌(pái)(如(rú)Gibco,HyClone)並(bìng)嚴格(gé)按說(shuō)明書(shū)儲存!

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