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技(jì)術文(wén)章
英諾(nuò)思EasyIso™人NK細胞(bāo)分選試(shì)劑盒(SN3201)深度解析
更(gēng)新時(shí)間:2025-07-24
點擊次(cì)數:1388
本(běn)試(shì)劑盒(hé)采用陰(yīn)選的方(fāng)式(shì),通過無柱磁極分離人PBMC中(zhōng)的(dí)NK細胞。分(fēn)離過(guò)程中抗體(tǐ)和磁(cí)珠不(bù)會(huì)接觸(chù)NK細胞,能(néng)夠(gòu)最大限(xiàn)度保(bǎo)持NK細(xì)胞(bāo)最原(yuán)始的狀(zhuàng)態(tài)。
試(shì)劑盒(hé)通過生(shēng)物素偶聯的抗(kàng)體標記(jì)非NK細(xì)胞,再將(jiāng)細胞和鏈黴親(qīn)和素(sù)納米(mǐ)磁珠(zhū)孵育(yù)偶(ǒu)聯(lián),然後(hòu)通過(guò)磁極(jí)進行(háng)無(wú)柱(zhù)分離(lí)。目(mù)標(biāo)細(xì)胞(bāo)隻(zhī)需(xū)倒(dǎo)入(rù)一個(gè)新的管中(zhōng)即(jí)可分(fēn)離(lí),分(fēn)離(lí)後(hòu)的細胞(bāo)可(kě)立即用(yòng)於(yú)後續(xù)應用(yòng),如流式細胞術(shù),細胞培(péi)養和(hé)功(gōng)能實(shí)驗(yàn)等。
優勢(shì):
–操(cāo)作簡(jiǎn)便
–純度可(kě)達(dá)85-93%
–35分(fēn)鐘(zhōng)左右完(wán)成(chéng)分離
二,性能實(shí)測數據(jù)(對(duì)標美(měi)天旎)
> 數(shù)據(jù)來源:中檢院細(xì)胞(bāo)製品測評報(bào)告(gào)(2024-BETC-SN01)
三,操(cāo)作(zuò)極(jí)簡
1.準(zhǔn)備PBMC單細胞懸(xuán)液至指定濃(nóng)度,1 x 10^8 cells/mL
2.加入(rù)EasyIso™ Human NK Cell Isolation Cocktail至樣(yàng)品中,100 μL/mL
3.抗體(tǐ)和(hé)細(xì)胞孵育,4℃孵育(yù)15 min,
4.加入(rù)10倍體積(jī)的(dí)FACS buffer,400 g離心5分(fēn)鐘(zhōng)後(hòu),再(zài)采(cǎi)用(yòng)初(chū)始(shǐ)體積的FACS重懸(xuán)。
5.震(zhèn)蕩(dàng)混匀 Streptavidin Nanobeads,混匀(yún)30 s
6.加(jiā)Streptavidin Nanobeads至樣(yàng)品(pǐn)中,100 μL/mL
7.輕柔混匀(yún)磁珠和細胞,孵育,在4℃孵(fū)育(yù)15 min
8.加入(rù)FACS Buffer到樣品(pǐn)中,輕(qīng)輕(qīng)混匀(yún)。
總體積加(jiā)入(rù)至2.5 mL (5 mL流(liú)式管)
總(zǒng)體(tǐ)積(jī)加入至(zhì) 7.5 mL (15 mL離心(xīn)管(guǎn))
9.樣品置(zhì)於磁(cí)力(lì)架上(shàng),使磁珠吸(xī)附(fù)。
單(dān)孔磁力架(jià)吸附(3 min)
聯(lián)排磁(cí)力架吸附(fù)(5 min)
10.傾斜(xié)磁力架,將樣(yàng)品(pǐn)倒(dǎo)入新(xīn)的(dí)收集管中,收集樣品(pǐn)。
細胞分離成功(gōng)
> 用(yòng)戶(hù)反(fǎn)饋:“從(cóng)樣(yàng)本(běn)到分選完成(chéng),比(bǐ)煮(zhǔ)泡麵(miàn)還快!”
四,四大應(yīng)用場景驗證(zhèng)
| 研(yán)究領域(yù) | 實(shí)驗(yàn)方案 | 效(xiào)果 |
| 腫瘤(liú)免疫治(zhì)療(liáo) | NK細(xì)胞擴(kuò)增後(hòu)殺傷肝癌細(xì)胞 | 殺(shā)傷(shāng)效率提升(shēng)40%* |
| 病(bìng)毒感染研究 | HIV感染模型NK細(xì)胞功(gōng)能(néng)監測 | IFN-γ分(fēn)泌量(liáng)增(zēng)加3倍(bèi) |
| 細胞療(liáo)法(fǎ)開發(fā) | CAR-NK製備前分(fēn)選 | 轉導(dǎo)效(xiào)率達(dá)78% |
| 免(miǎn)疫(yì)衰老 | 老(lǎo)年(nián)人vs年輕(qīng)人NK細(xì)胞活(huó)性對比 | 細(xì)胞毒(dú)性下降(jiàng)50% |
> 注(zhù):對比陽性分選法,使用同批(pī)PBMC樣(yàng)本
五(wǔ),用(yòng)戶痛點解決方案
| 常見(jiàn)問題(tí) | 英(yīng)諾思(sī)對策(cè) |
| 血小板汙(wū)染 | 試(shì)劑(jì)盒含(hán) CD61阻斷(duàn)劑(防(fáng)非特異結合(hé)) |
| 單(dān)核(hé)細胞殘留(liú) | 優化抗(kàng)體配方(fāng):抗(kàng)CD14高(gāo)親(qīn)和(hé)力 |
| 低溫(wēn)運輸(shū)活(huó)性(xìng)下降 | 配送(sòng)含 細胞保活(huó)劑(4℃維持7天(tiān)活(huó)性(xìng)) |
六,采購支持政(zhèng)策
- 技術支援(yuán):流(liú)式(shì)方(fāng)案設計(jì) + 分選protocol優化(huà)
歡(huān)迎咨詢英諾思(sī)代(dài)理——天津(jīn)益元利(lì)康生(shēng)物(wù)科技有限公司
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