超濾離心管操(cāo)作(zuò)步驟(zhòu)一
：準(zhǔn)備(bèi)工(gōng)作

從4°C冰(bīng)箱中取(qǔ)出超(chāo)濾(lǜ)管，使其(qí)恢(huī)復(fù)至室(shì)溫（約15-30分(fēn)鐘(zhōng)），以(yǐ)防(fáng)止冷(lěng)膜(mó)在離心(xīn)過(guò)程中破(pò)裂(liè)。

準備樣(yàng)品(pǐn)
：確(què)保樣品已(yǐ)充(chōng)分混匀(yún)，無大的不溶性(xìng)顆粒物，以免堵塞(sāi)膜孔。如(rú)有(yǒu)必(bì)要，可先進行離(lí)心或(huò)過(guò)濾預處(chǔ)理(lǐ)。

預冷離心機
：將離(lí)心機預(yù)冷至4°C（除非您的樣品有(yǒu)特殊要求），以(yǐ)減少蛋白質(zhì)變性(xìng)和(hé)降(jiàng)解。

佩(pèi)戴手套
：操作(zuò)全(quán)程佩(pèi)戴(dài)手套，防(fáng)止皮(pí)膚油脂(zhī)汙染膜(mó)或樣(yàng)品。

超(chāo)濾(lǜ)離心(xīn)管操作(zuò)步(bù)驟二(èr)
：預處(chǔ)理(lǐ)/潤(rùn)洗(xǐ)膜 (重(zhòng)要步驟(zhòu)！)

向樣品(pǐn)室中加(jiā)入適量預冷(lěng)的超純水(shuǐ)或目(mù)的緩衝(chōng)液（通常加(jiā)至最大容量的(dí)一半以上）。

蓋上(shàng)蓋子(zǐ)，在指(zhǐ)定離(lí)心(xīn)力(lì)下(xià)離心(xīn)1-2分鐘(zhōng)。

棄(qì)去濾出(chū)液。此步(bù)驟(zhòu)可以去除膜孔(kǒng)中的(dí)保護(hù)劑（如甘(gān)油(yóu)），並(bìng)激活(huó)膜孔，提(tí)高回收率(shuài)和流(liú)速(sù)。

超(chāo)濾(lǜ)離(lí)心管操作(zuò)步(bù)驟三(sān)
：加入樣(yàng)品

將(jiāng)預(yù)處(chǔ)理的超濾管(guǎn)放入一個新(xīn)的收集(jí)管中。

用移(yí)液器(qì)將樣(yàng)品加入樣(yàng)品室(shì)中。注意
：不(bù)要超過最大(dà)標(biāo)定(dìng)體積，以(yǐ)免(miǎn)樣(yàng)品(pǐn)溢出汙染(rǎn)濾(lǜ)膜(mó)外側(cè)。

平(píng)衡
：如(rú)果(guǒ)同時(shí)處理(lǐ)多個樣(yàng)品(pǐn)，務(wù)必在(zài)天(tiān)平上(shàng)用(yòng)水(shuǐ)配平(píng)至重量(liáng)一致(zhì)，以(yǐ)確(què)保離心機(jī)平穩(wěn)運行(háng)。

超(chāo)濾離(lí)心(xīn)管(guǎn)操(cāo)作(zuò)步(bù)驟四(sì)
：離心濃縮(suō)

蓋上蓋(gài)子(zǐ)（如(rú)果蓋(gài)子有功(gōng)能孔，確保其(qí)暢(chàng)通(tōng)）。

根據(jù)說(shuō)明書推(tuī)薦(jiàn)的離(lí)心力（× g）和(hé)時間進(jìn)行離心。切勿(wù)使用製動(dòng)（brake）功(gōng)能，以免(miǎn)產(chǎn)生(shēng)的負壓破壞膜(mó)結構(gòu)。

起(qǐ)始離心條件參(cān)考
：通常(cháng)為2000-4000 × g，離心10-30分鐘(zhōng)。具體條(tiáo)件(jiàn)需根(gēn)據樣品粘度(dù)，濃(nóng)度和目標(biāo)濃縮倍數(shù)進(jìn)行(háng)調(tiáo)整(zhěng)。

離心後，檢查濾(lǜ)出液的(dí)體積(jī)。如(rú)需(xū)進一(yī)步濃(nóng)縮(suō)，可棄去濾出(chū)液，將(jiāng)樣(yàng)品室(shì)放回(huí)收集管中(zhōng)繼續離(lí)心(xīn)。

超濾離心管(guǎn)操作步驟五(wǔ)
：樣(yàng)品回(huí)收

方法(fǎ)一（常規(guī)回(huí)收）
：離心(xīn)完(wán)成(chéng)後，小心(xīn)地(dì)將(jiāng)超濾管倒扣在(zài)一個新的收(shōu)集管上。以1000 × g 離(lí)心(xīn) 1-2 分鐘，即可將濃縮的(dí)樣品回收(shōu)至(zhì)收(shōu)集管中(zhōng)。

方(fāng)法(fǎ)二（移液(yè)器回收(shōu)）
：對(duì)於(yú)小(xiǎo)體(tǐ)積樣品，可用移液(yè)器小心地吹打膜表(biǎo)麵多次(cì)，將粘附的(dí)濃縮(suō)樣品(pǐn)吸下(xià)收集(jí)。注(zhù)意(yì)
：切勿用移液器jianduan觸碰或刺破(pò)超濾膜！

超(chāo)濾離心(xīn)管(guǎn)操作步(bù)驟六
：清洗(xǐ)與保存

立即用(yòng)大量超純(chún)水衝(chōng)洗樣品(pǐn)室(shì)和膜(mó)，防止樣(yàng)品殘留(liú)幹涸堵(dǔ)塞(sāi)膜(mó)孔(kǒng)。

短(duǎn)期保存
：可浸(jìn)泡在超(chāo)純(chún)水或20%乙(yǐ)醇中，於4°C存(cún)放(fàng)。

長(cháng)期保(bǎo)存(cún)
：清洗後(hòu)，幹燥，室(shì)溫避光保存。

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