在(zài)單細(xì)胞(bāo)測序，原代(dài)細胞培(péi)養等高精(jīng)度實(shí)驗中，細(xì)胞(bāo)碎片汙(wū)染是(shì)導(dǎo)致(zhì)數據偏(piān)差的核心風險。百奧(ào)益康通(tōng)用(yòng)細(xì)胞(bāo)碎片去(qù)除試(shì)劑(jì)盒(hé)（貨號BA3304），通過(guò)密度梯度離心-選擇(zé)性(xìng)裂(liè)解技術(shù)，可(kě)在(zài)20分鐘內清(qīng)除樣本中90%以上的細胞碎(suì)片與(yǔ)雜質，為(wéi)下(xià)遊(yóu)實(shí)驗提供高純(chún)度細胞(bāo)懸液(yè)。
 

　　一，技術原理：雙機製(zhì)協(xié)同淨(jìng)化
 

　　1.溫(wēn)和(hé)裂(liè)解(jiě)：DRS緩(huǎn)衝液選擇(zé)性裂解破損細胞(bāo)，釋放(fàng)的(dí)DNA碎(suì)片形成網狀結(jié)構(gòu)包裹(guǒ)雜(zá)質(zhì)
 

　　2.密度(dù)分層(céng)：通過(guò)3000×g梯(tī)度離(lí)心(xīn)，形成(chéng)三(sān)層結(jié)構(gòu)：
 

　　上層：含細(xì)胞(bāo)碎片與蛋(dàn)白(bái)聚集體
 

　　中(zhōng)層(céng)：網(wǎng)狀DNA-雜質復(fù)合物
 

　　底層：完整目標細(xì)胞(bāo)
 

　　3. 精(jīng)準去(qù)除：移除(chú)上中(zhōng)兩(liǎng)層，保(bǎo)留底(dǐ)層(céng)高(gāo)活力(lì)細胞(活性損(sǔn)失<5%)
 

　　二，標(biāo)準(zhǔn)化(huà)操作流(liú)程(chéng)（25分鐘(zhōng)完成）
 

　　1.樣本預(yù)處(chǔ)理
 

　　將(jiāng)細胞(bāo)懸液經(jīng)300×g離(lí)心(xīn)5分鐘(zhōng)，用(yòng)3.1 mL含(hán)5% FBS的PBS重懸
 

　　2.DRS緩衝液處理
 

　　加(jiā)入900 μL DRS緩衝(chōng)液，輕(qīng)柔(róu)吹打(dǎ)混匀(yún)10次，避免渦旋振(zhèn)蕩
 

　　3.梯(tī)度(dù)離心(xīn)分(fēn)層(céng)
 

　　沿管(guǎn)壁緩慢加入4 mL PBS覆蓋液(yè)層(céng)，3000×g水(shuǐ)平離(lí)心20分鐘(zhōng)(啟(qǐ)用(yòng)離心(xīn)機緩升(shēng)緩降(jiàng)模式(shì))
 

　　4.碎(suì)片層(céng)去(qù)除
 

　　分層(céng)後依(yī)次(cì)吸(xī)取：
 

　　➤ 上層4 mL PBS
 

　　➤ 中層DRS-碎(suì)片復合物
 

　　保(bǎo)留(liú)底層細胞(bāo)沉(chén)澱(diàn)
 

　　5.細(xì)胞回(huí)收
 

　　用(yòng)含(hán)5% FBS的(dí)PBS重懸細(xì)胞，經20 μm濾網(wǎng)過(guò)濾(lǜ)，即(jí)獲(huò)高純度懸液
 

　　三，性能驗證數(shù)據
 

　　· 碎片清(qīng)除率：92.3% ± 4.1%(流式細胞術檢測)
 

　　· 細(xì)胞回收率：85%以(yǐ)上(與(yǔ)初始(shǐ)活細(xì)胞數(shù)正相(xiāng)關)
 

　　· 活性保持(chí)：處(chǔ)理(lǐ)前(qián)後(hòu)細胞活(huó)性差異(yì)<3%(台(tái)盼藍檢測)
 

　　· 兼容(róng)性驗證：適用於PBMC，腫瘤浸潤淋巴細胞(bāo)，幹細胞等多種樣(yàng)本
 

　　四(sì)，三大應用場景(jǐng)突破
 

　　1.單細胞測序前(qián)處理：
 

　　◎ 碎片殘留率(shuài)<5%，滿(mǎn)足(zú)10X Genomics Chromium係統建庫要求(qiú)
 

　　◎ 有效提mRNA捕(bǔ)獲(huò)效率(shuài)(較未(wèi)處(chǔ)理(lǐ)組(zǔ)提(tí)升(shēng)30%)
 

　　2. 原(yuán)代(dài)細(xì)胞(bāo)培養(yǎng)：
 

　　◎ 去(qù)除凋(diāo)亡(wáng)細(xì)胞碎(suì)片，將原代成(chéng)纖維細胞增殖速(sù)度(dù)提(tí)升2倍
 

　　◎ 降低(dī)支原體汙染風險(xiǎn)(碎(suì)片攜(xié)帶微(wēi)生物減少80%)
 

　　3. 流式(shì)細胞(bāo)分(fēn)選：
 

　　◎ 前向散(sàn)射(shè)/側向散射(shè)圖(tú)背景信(xìn)號(hào)降低至(zhì)處理前(qián)的(dí)1/4
 

　　◎ 提(tí)高罕(hǎn)見細(xì)胞亞群(qún)檢測靈(líng)敏度(如(rú)循(xún)環腫(zhǒng)瘤細胞檢出限達0.01%)
 

　　選擇BA3304的四大優勢：
 

　　✔ 廣(guǎng)譜(pǔ)適(shì)用(yòng)：兼(jiān)容人/小(xiǎo)鼠/大鼠等哺乳(rǔ)動物細胞(bāo)
 

　　✔ 極(jí)簡操作：無需特殊設備，標準離(lí)心機(jī)即可完(wán)成
 

　　✔ 成(chéng)本(běn)可(kě)控：單(dān)次(cì)處理成本僅為流(liú)式分選的(dí)1/10
 

　　✔ 靈活(huó)拓展(zhǎn)：可搭配(pèi)BA3311紅細(xì)胞裂解液同(tóng)步去除非核細胞
 

　　立即獲取(qǔ)BA3306+BA3304組合方案(àn)(碎(suì)片去除(chú)+死細(xì)胞清除)，實現細(xì)胞懸液(yè)純度(dù)三級躍(yuè)升！更(gēng)多產(chǎn)品(pǐn)資(zī)料請咨詢百(bǎi)奧(ào)益(yì)康試(shì)劑(jì)盒(hé)代(dài)理——天(tiān)津益元利康生物(wù)科技有(yǒu)限(xiàn)公司！