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產品簡介
293細胞(bāo)專用轉染試劑盒——PolyTool™ 293-Fit Transfection Reagent Kit,適用(yòng)於HEK293細(xì)胞(bāo)及其他HEK293細(xì)胞(bāo)的(dí)高密(mì)度懸(xuán)浮(fú)培養,DNA瞬時(shí)轉染及(jí)蛋白表達(dá)。
產(chǎn)品分類
一,產(chǎn)品簡介(jiè)
293細胞專用轉染(rǎn)試(shì)劑(jì)盒(hé)——PolyTool™ 293-Fit Transfection Reagent Kit,適用於HEK293細胞(bāo)及(jí)其他HEK293細胞的高(gāo)密度懸浮培(péi)養,DNA瞬(shùn)時(shí)轉(zhuǎn)染及蛋白(bái)表達(dá)。
PolyTool™ 293-Fit Transfection Reagent Kit適用範圍(wéi):HEK293細(xì)胞(bāo)懸(xuán)浮培養(yǎng),其(qí)他(tā)HEK293細(xì)胞的高(gāo)密度懸浮(fú)培養(yǎng),DNA瞬(shùn)時轉染及蛋(dàn)白表(biǎo)達。
該(gāi)試劑(jì)盒包括下列(liè)試(shì)劑:
(1)PolyTool™ 293 Transfection Reagent (懸浮(fú)293細胞(bāo)轉染(rǎn)試劑(jì));
(2)PolyTool™ 293 Medium(化(huà)學限定293 細胞無(wú)血(xiě)清細胞(bāo)培(péi)養液);
(3)PolyTool™ 293 B(化(huà)學成分限定(dìng)的,高濃(nóng)度(dù)營養成(chéng)分的補(bǔ)料 1);
(4)PolyTool™ 293 C(化(huà)學成分限(xiàn)定(dìng)的(dí),高(gāo)濃度(dù)營養成(chéng)分的補料(liào) 2)。
PolyTool™ 293 Transfection Reagent 配(pèi)合PolyTool™ 293 Medium,PolyTool™ 293 B及PolyTool™ 293 C使(shǐ)用,可(kě)大(dà)幅度提(tí)高(gāo)重組蛋白的表(biǎo)達產(chǎn)量(liáng)。
二(èr),操(cāo)作流程
1.細胞接(jiē)種(zhǒng)(以25mL體(tǐ)係為例):
根(gēn)據細胞(bāo)狀態(tài),選(xuǎn)擇(zé)合適的(dí)接種(zhǒng)密度,建(jiàn)議接(jiē)種密度為(wéi) 1×106 cells/mL,待第二天(tiān)細(xì)胞(bāo)密度(dù)達(dá)到2×106 cells/mL左(zuǒ)右,活性大於(yú)95%時(shí)進行(háng)轉(zhuǎn)染(rǎn)。
2.瞬(shùn)時(shí)轉(zhuǎn)染(rǎn):
建議質粒(lì)(μg)與(yǔ)試劑(μL)參(cān)考配(pèi)比區(qū)間為1:3~1:5之(zhī)間。具體步(bù)驟如圖(tú)1所示(shì)(以1:4為(wéi)例):
(1)使用本(běn)樣品前渦旋混(hùn)匀(yún)5秒,使用1.25 mLPolyTool™ 293 Medium稀釋100 μL的(dí)轉染試劑(jì),並(bìng)吹打(dǎ)均(jūn)匀(yún);
(2)使用(yòng)1.25 mL PolyTool™ 293 Medium稀釋25 μg質粒(lì),並吹打混匀;
(3)將(1)和(2)所述(shù)溶(róng)液混(hùn)合(hé)均匀;
(4)將(3)所述混(hùn)合(hé)溶(róng)液(yè)室溫(wēn)靜(jìng)置孵育10~15 min;
(5)將(jiāng)(4)中(zhōng)的(dí)復合物(wù)溶液加(jiā)入25 mL的細胞培養(yǎng)體係(xì)中,放回搖床中,在37 ℃,震(zhèn)蕩(dàng)速(sù)度120 rpm下繼(jì)續培養(yǎng)。
3.產物表達(dá)與(yǔ)檢(jiǎn)測:
(1)轉(zhuǎn)染(rǎn)24小時(shí),72小時(shí),120小(xiǎo)時,168小時後加入(rù)3%(75 mL/100mL)PolyTool™293 B,0.3%(75 μL/25 mL)PolyTool™ 293 C。
(2)轉染後(hòu)第(dì)5~7天(tiān)測(cè)定產物(wù)表達(dá)量(liáng)。多數蛋(dàn)白的(dí)合(hé)成(chéng)在(zài)轉染後第5天左(zuǒ)右可達(dá)到最(zuì)高(gāo)值(zhí),客戶可(kě)根據(jù)細(xì)胞狀態及表(biǎo)達(dá)量選(xuǎn)擇適宜(yí)的(dí)收(shōu)獲時(shí)間。

圖1 細(xì)胞轉染(rǎn)示意圖(tú)
293細胞專用(yòng)轉染(rǎn)試劑盒——PolyTool™ 293-Fit Transfection Reagent Kit代(dài)理(lǐ)——天(tiān)津益(yì)元利(lì)康生物科(kē)技(jì)有限公(gōng)司,成(chéng)立(lì)於(yú)2018年,坐(zuò)落(là)於天津(jīn)經(jīng)濟(jì)技術開(kāi)發(fā)區。公司產品綫涉及(jí)細胞與基(jī)因治療,免(miǎn)疫學(xué),分(fēn)子(zǐ)生(shēng)物學,細胞(bāo)生物學等(děng)多個(gè)方向(xiàng),專(zhuān)注於(yú)生命科學試(shì)劑,耗(hào)材,細(xì)胞,儀器等(děng)產品(pǐn)銷(xiāo)售,經(jīng)營的品牌(pái)主(zhǔ)要有:ThermoFisher,Sigma,Qiagen,EZBioscience,ZYMO Research,MedKoo,Abcam等等。我們(mén)提(tí)供質(zhì)優(yōu)價美的產品(pǐn),及(jí)時(shí)到位的服務(wù),努力成(chéng)長(cháng)為(wéi)生(shēng)命科學(xué)和(hé)生物技術企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供(gōng)應(yīng)商(shāng)。

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