l 血(xiě)清(qīng)

血清是生長(cháng)和(hé)附著因子(zǐ)，礦(kuàng)物質，脂(zhī)質(zhì)和(hé)激(jī)素的(dí)來源(yuán)，是細胞(bāo)培(péi)養(yǎng)的重(zhòng)要(yào)組(zǔ)分。血清能調(tiáo)節細(xì)胞膜的通透(tòu)性(xìng)，同時(shí)能作(zuò)為(wéi)載體攜帶酶，脂質，酶和(hé)微量元素(sù)等進(jìn)入(rù)細胞。

l 血清使(shǐ)用(yòng)的(dí)常見(jiàn)問(wèn)題

Q1. 收(shōu)到(dào)的血(xiě)清(qīng)有部(bù)分解凍的(dí)現(xiàn)象(xiàng)，影(yǐng)響後續使(shǐ)用(yòng)嗎？

正常情(qíng)況下，血清(qīng)應冷凍(dòng)送(sòng)達。但(dàn)是如(rú)果(guǒ)血清(qīng)有(yǒu)部分解凍，仍(réng)可(kě)繼(jì)續使用(yòng)。血(xiě)清在解凍(dòng)後，根(gēn)據實驗需求(qiú)分裝成單(dān)次用量後(hòu)再進(jìn)行儲存以(yǐ)供(gōng)後續(xù)使用。

Q2. 血(xiě)清需要避光(guāng)保(bǎo)存嗎？

正(zhèng)常(cháng)情(qíng)況下，在(zài)室內(nèi)或實驗(yàn)室燈(dēng)光的照(zhào)明下，不(bù)影響(xiǎng)血清的使(shǐ)用(yòng)。但不建(jiàn)議將血(xiě)清暴(bào)露(lòu)在波長短或強(qiáng)度(dù)高(gāo)的(dí)光(guāng)下(xià)，因為(wéi)血(xiě)清(qīng)中含(hán)有(yǒu)一些(xiē)對光(guāng)敏(mǐn)感(gǎn)的成(chéng)分。

Q3. 血(xiě)清必(bì)須熱(rè)滅活嗎(má)？

熱滅活(huó)可(kě)以破(pò)壞血(xiě)清中補體的活性。哺乳(rǔ)動物(wù)血清中存在的(dí)補(bǔ)體蛋白(bái)參(cān)與細胞的(dí)溶解(jiě)，收(shōu)縮平滑肌(jī)，刺激細胞(bāo)和(hé)血小(xiǎo)板(bǎn)釋放組胺，並激活淋(lín)巴(bā)細胞(bāo)和巨(jù)噬細(xì)胞。有研究比較(jiào)了正常熱(rè)滅活(huó)胎牛(niú)血清(qīng)對各種細(xì)胞株的生長(cháng)能(néng)力(lì)影響（如(rú)下圖所示(shì)），發(fā)現(xiàn)11株細胞(bāo)中(zhōng)，熱(rè)滅(miè)活對6株(zhū)細(xì)胞(bāo)有(yǒu)負麵影(yǐng)響（紅框(kuàng)），3株無影(yǐng)響(xiǎng)（綠框(kuàng)），2株有微弱正麵改善（黃(huáng)框），因(yīn)此在(zài)多數細(xì)胞培(péi)養中血清不(bù)需要(yào)熱滅活(huó)，熱(rè)滅(miè)活對(duì)細胞(bāo)生(shēng)長沒有明顯的(dí)促(cù)進作(zuò)用，反(fǎn)而還(huán)會影(yǐng)響血清(qīng)質量，使(shǐ)細胞的(dí)生長速率(shuài)降低(dī)。因此如果不(bù)是(shì)非必須，可(kě)不(bù)必做血清(qīng)熱滅(miè)活(huó)這(zhè)一處理。

圖1 使用未滅活或滅(miè)活(huó)血清的細胞生長狀(zhuàng)況(kuàng)

Q4. 培(péi)養(yǎng)哪些(xiē)細胞需(xū)要(yào)熱滅活(huó)血清(qīng)？

培養胚胎(tāi)幹(gān)細(xì)胞(bāo)（ESC），平(píng)滑(huá)肌細(xì)胞，免疫細胞(bāo)和昆蟲細胞時(shí)，建(jiàn)議(yì)使(shǐ)用(yòng)熱滅活血(xiě)清。

Q5. 血清如何(hé)熱滅(miè)活？

有(yǒu)研究表(biǎo)明(míng)，熱(rè)滅(miè)活時若水浴溫(wēn)度(dù)過高或加(jiā)熱(rè)時間(jiān)過(guò)長(cháng)，都(dū)會(huì)降(jiàng)低血清的性能(néng)，從而影(yǐng)響(xiǎng)細胞生長（如下圖(tú)2和3所(suǒ)示）。因此(cǐ)建議(yì)將(jiāng)血(xiě)清加熱(rè)至56 °C，持(chí)續(xù)30分(fēn)鐘進行熱(rè)滅活。

圖(tú)2 使(shǐ)用不同(tóng)溫(wēn)度(dù)熱滅活血清對細(xì)胞(bāo)生長(cháng)的(dí)影響

圖(tú)3 使(shǐ)用(yòng)不同時間熱(rè)滅活(huó)血清對細胞生長的(dí)影(yǐng)響

注意(yì)：滅活時(shí)，若(ruò)使(shǐ)用(yòng)水浴(yù)槽(cáo)，請(qǐng)保持水(shuǐ)麵(miàn)與血清液(yè)麵等高(gāo)。滅活後(hòu)，建議使用冷(lěng)水(shuǐ)浴降(jiàng)溫。

Q6. 什麼是γ-輻照血清(qīng)？

γ-輻照(zhào)是將血清(qīng)暴露於(yú)25-35 kGy劑量的鈷-60源，使(shǐ)病毒(dú)和支原體等其他(tā)微生物菌體(tǐ)失(shī)活。γ-輻照(zhào)不(bù)會降(jiàng)低(dī)血清的理化(huà)特性或細(xì)胞培(péi)養(yǎng)性(xìng)能(néng)。

Q7. FBS的顏(yán)色(sè)與之前的(dí)批次不(bù)一樣(yàng)。這會(huì)影響(xiǎng)血(xiě)清(qīng)性能(néng)嗎？

血(xiě)清中(zhōng)含有微量(liáng)的(dí)血(xiě)紅蛋(dàn)白(bái)，血清的(dí)顏色取(qǔ)決(jué)於(yú)血(xiě)紅蛋白濃(nóng)度(dù)，顏(yán)色的(dí)深(shēn)淺(qiǎn)和血清的(dí)性能無關。