1.簡介

DEAE SepFast 6HF Plus是弱陰離子交換介質。結合容(róng)量和結(jié)合(hé)動(dòng)力學高於(yú)IEX  SepFast  6HF係列。該(gāi)離子(zǐ)交(jiāo)換(huàn)層(céng)析(xī)介質(zhì)特(tè)別適用(yòng)於(yú)需(xū)要(yào)增加結合能力的生(shēng)物(wù)分子(zǐ)的(dí)一(yī)般大規模(mó)純化。

DEAE SepFast 6HF Plus在配體密(mì)度，負(fù)載(zǎi)量和單個(gè)組分的分離能力之間(jiān)進行了(liǎo)平衡(héng)設計(jì)，適用於大規(guī)模(mó)生(shēng)物(wù)製造應用。

DEAE SepFast 6HF Plus的基(jī)質由高度交聯(lián)的 6%瓊脂糖(táng)和葡聚糖製成，具有優異的流動(dòng)性。它對(duì)生(shēng)物加(jiā)工行業中(zhōng)遇到的(dí)大(dà)多(duō)數(shù)化學條(tiáo)件都非常穩(wěn)定。

2.產品特性

表1 DEAE SepFast 6HF Plus的(dí)特性

*測試條件：10  mM緩衝液 pH  7.5，上樣5 mg/ml 蛋白質(zhì)，停留時(shí)間(jiān)5分(fēn)鐘(zhōng)，50%穿(chuān)透。

**在 32  mm內徑(jìng)色(sè)譜柱中，床高 15 cm，室溫下用水(shuǐ)測量。

圖(tú)1 IEX  SepFast  Media的(dí)壓力-流(liú)動(dòng)特性(xìng)

（備注：將基(jī)礎基質(zhì)填充到32 mm內徑的(dí)柱子中，最(zuì)終床⾼為15 cm。流動相是去離(lí)子水(shuǐ)。測試(shì)在(zài)室(shì)溫(wēn)下(xià)進(jìn)行）

圖2 滴定曲綫

3.方法優化(huà)

建議(yì)在載量，流速，結合pH值(zhí)，結(jié)合(hé)離子強度，洗脫速度(dù)和(hé)梯度等參數之(zhī)間進行篩(shāi)選(xuǎn)。由(yóu)於DEAE SepFast 6HF Plus的快速孔隙可及(jí)性，結合步驟可以在(zài)比洗脫步(bù)驟(zhòu)更(gēng)快(kuài)的(dí)流速下完(wán)成(chéng)。建議特(tè)別(bié)注意優(yōu)化洗脫條件以(yǐ)獲得(dé)最(zuì)佳分離能(néng)力。

強(qiáng)離(lí)子(zǐ)交(jiāo)換(huàn)介(jiè)質(zhì)可以在(zài)較(jiào)寬(kuān)的(dí)pH範圍(wéi)內保持其電(diàn)荷（並因此(cǐ)保(bǎo)持其(qí)功(gōng)能），而弱離子交換介質的離(lí)解(jiě)程(chéng)度(dù)和離子交換(huàn)容(róng)量隨pH值(zhí)而變化。因(yīn)此(cǐ)，如(rú)果使(shǐ)用弱離子交(jiāo)換介(jiè)質(zhì)，優(yōu)化pH值更為關(guān)鍵(jiàn)。

通常，在(zài)優化方法時，平衡組分分離(lí)度(dù)與(yǔ)工藝產量(liáng)是主要考(kǎo)慮(lǜ)因素。此外(wài)，對(duì)於(yú)不穩定(dìng)或對剪切(qiē)力敏(mǐn)感分子的(dí)純(chún)化，需要優化(huà)操作(zuò)條件(jiàn)以(yǐ)平(píng)衡產量和對目標(biāo)分(fēn)子可(kě)能造成的(dí)損害(hài)。

4.裝柱

DEAE SepFast 6HF Plus由高度交聯的珠(zhū)狀(zhuàng)瓊(qióng)脂糖(táng)製(zhì)成，具有(yǒu)出色(sè)的(dí)機械(xiè)強(qiáng)度。該(gāi)介質(zhì)可以很(hěn)容(róng)易(yì)地(dì)以(yǐ)任(rèn)何(hé)可能的填充方式(shì)填充到任(rèn)何類(lèi)型的色(sè)譜柱(zhù)中。典(diǎn)型的包(bāo)裝(zhuāng)壓力高(gāo)達3 bar。

5.保(bǎo)養

根(gēn)據不同的應(yīng)用(yòng)，介質(zhì)可(kě)能(néng)會被多(duō)次使(shǐ)用(yòng)。如(rú)需(xū)重復(fù)使用，請(qǐng)參(cān)閱以下(xià)說明。

（1）再(zài)生(shēng)

每次運行後，用(yòng)高離(lí)子(zǐ)強度(dù)溶液（例(lì)如1M NaCl緩衝液(yè)）或增(zēng)加(jiā)pH 值。

（2）就地(dì)清洗  (CIP)

CIP是一(yī)種去除強結合物質的(dí)程(chéng)序，例如再生(shēng)後殘留(liú)在吸(xī)附(fù)劑表麵的(dí)脂質(zhì)，內毒素和(hé)變(biàn)性蛋(dàn)白(bái)質。定(dìng)期(qī) CIP 可(kě)防止汙(wū)染物在填(tián)充床中積聚，並(bìng)有(yǒu)助於(yú)保持色譜柱(zhù)性(xìng)能(néng)。

應(yīng)根據(jù)存在的(dí)汙(wū)染物類(lèi)型(xíng)為每(měi)個(gè)過程(chéng)製定具體的 CIP程(chéng)序。CIP 的(dí)頻(pín)率取決(jué)於各(gè)個應(yīng)用的性質(zhì)。

以下(xià)信息可作(zuò)為一般(bān)指(zhǐ)導：濃(nóng)度(dù)高(gāo)達2 M的(dí)鹽可(kě)用(yòng)於(yú)清除(chú)因(yīn)離子相互(hù)作用而結合(hé)的(dí)雜質。疏水性(xìng)結(jié)合(hé)的汙染(rǎn)物可以通過(guò)以下試劑(jì)去(qù)除：1 M NaOH，低比(bǐ)例的非離子洗滌(dí)劑(jì)（例(lì)如0.1-2%），鹼性或酸性條件下(xià)的(dí)30%  異丙醇(chún)（例如(rú)在(zài)乙酸或(huò)磷(lín)酸存在(zài)下(xià)）。也可(kě)以探索(suǒ)上(shàng)述(shù)試(shì)劑(jì)的組(zǔ)合。一般(bān)來說，孵育(yù)時間應(yīng)該更長（例(lì)如從 30 min到(dào)2 h），以確(què)保汙(wū)染(rǎn)物(wù)WAN全解離。

（3）消毒

建議(yì)使用接觸時間為(wéi)1 h的0.5‑1.0 M NaOH進行消毒(dú)。

6.儲存

DEAE SepFast 6HF Plus應儲存(cún)在(zài)20%乙(yǐ)醇中（強陽離(lí)子(zǐ)交(jiāo)換(huàn)介質含(hán)有(yǒu)0.2 M NaAC）以(yǐ)防(fáng)止微生物生長(cháng)。將介質(zhì)存儲在(zài)4℃到30℃的溫度(dù)下。使(shǐ)用前，用至(zhì)少5床(chuáng)體(tǐ)積(jī)的(dí)運行緩(huǎn)衝液(yè)來(lái)平衡(héng)介(jiè)質。

7.更多(duō)信息(xī)

了(liǎo)解(jiě)更多關(guān)於(yú)BioToolomics產品(pǐn)代(dài)理信(xìn)息(xī)請(qǐng)聯(lián)係天津(jīn)益(yì)元利康科技(jì)有限(xiàn)公司(sī)了(liǎo)解產品(pǐn)信(xìn)息(xī)。 

8.訂購信息