polyplus轉染(rǎn)試劑INTERFERin®在(zài)1nM siRNA下已(yǐ)經提(tí)供了(liǎo)非常高的沉(chén)默(mò)效率，並且(qiě)可(kě)以(yǐ)用於多種(zhǒng)粘附(fù)細(xì)胞和(hé)懸浮(fú)細(xì)胞。使用(yòng)低濃度(dù)的siRNA可以(yǐ)避免脫靶(bǎ)效應(yīng)，其(qí)溫和的作用(yòng)模式(shì)確(què)保了更可靠的數據(jù)和優異(yì)的細胞活力(lì)。由(yóu)於與(yǔ)血清和抗生素的兼容性，INTERFERin®易於(yú)使用，也(yě)非常適(shì)合轉染miRNA和(hé)其他寡(guǎ)核苷(gān)酸(suān)，如pre-miRNA，mimic miRNA等。

polyplus轉染(rǎn)試(shì)劑INTERFERin®應(yīng)用方向廣泛(fàn)，主(zhǔ)要在以(yǐ)下幾(jī)個方麵
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一(yī)，RNA幹(gān)擾(rǎo)機(jī)製研(yán)究

RNA幹(gān)擾是由(yóu)細胞質(zhì)中的(dí)RNA分子介(jiè)導(dǎo)的，也稱為siRNA，意思(sī)是“小(xiǎo)幹擾RNA"。這(zhè)些siRNA寡(guǎ)核苷(gān)酸長21至25個鹼基(jī)對，其序(xù)列與信使RNA（mRNA）特異性互補。siRNA募(mù)集(jí)RISC復合(hé)物(wù)（“RNA誘導的(dí)沉默(mò)復合物(wù)"）與(yǔ)其(qí)靶(bǎ)mRNA結合(hé)，以切割(gē)其(qí)，從而導致(zhì)蛋(dàn)白質(zhì)表(biǎo)達的沉默（圖(tú)1）。

圖1
：細胞(bāo)中的RNA沉默機(jī)製(zhì)。

二，基因沉默實驗在(zài)進(jìn)行動(dòng)手實(shí)驗(yàn)之(zhī)前，siRNA必須根據(jù)研究目標(biāo)進行設計(jì)，並由專(zhuān)門(mén)的(dí)供(gōng)應(yīng)商(shāng)合成(chéng)。然(rán)後(hòu)是siRNA轉(zhuǎn)染(rǎn)步驟(zhòu)本身，然後(hòu)是基因(yīn)沉

默和/或表型(xíng)測定(dìng)的(dí)測(cè)量。

將siRNA引入細胞會(huì)產(chǎn)生一些(xiē)副(fù)作(zuò)用。這(zhè)些脫靶效應是通過(guò)識別(bié)誘導(dǎo)翻譯抑(yì)製和/或mRNA降(jiàng)解(jiě)的3'UTR序列產(chǎn)生(shēng)的，或者通(tōng)過識

別(bié)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)以(yǐ)外的mRNA產(chǎn)生(shēng)的，這(zhè)兩(liǎng)者都(dū)會導致細胞中(zhōng)的(dí)非特異性沉默(mò)。

為了(liǎo)避免脫靶效應(yīng)，siRNA必(bì)須(xū)設(shè)計有幾種(zhǒng)算法(fǎ)，以確保精確調(tiáo)整(zhěng)靶(bǎ)向。此外(wài)，可以通過(guò)使(shǐ)用盡(jìn)可(kě)能(néng)低的siRNA濃(nóng)度來(lái)避(bì)免非(fēi)特

異性相互作用。

在(zài)分析結(jié)果時，確保知(zhī)道感(gǎn)興(xīng)趣的(dí)蛋白(bái)質(zhì)和(hé)mRNA的(dí)半(bàn)衰期，並(bìng)在(zài)轉(zhuǎn)染後24至96小時測量(liáng)相(xiāng)應的基(jī)因沉默。理想(xiǎng)情(qíng)況下，基(jī)因(yīn)

沉默(mò)應(yīng)該在(zài)mRNA和蛋白(bái)質水平上進(jìn)行評(píng)估。

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品(pǐn)綫(xiàn)涉(shè)及(jí)細胞(bāo)與基因(yīn)治(zhì)療，免(miǎn)疫(yì)學(xué)，分子生物(wù)學，細(xì)胞(bāo)生(shēng)物學(xué)等(děng)多個方向(xiàng)，專注於生命科學(xué)試(shì)劑(jì)，耗材(cái)，細(xì)胞(bāo)，儀(yí)器(qì)等產(chǎn)品銷售，

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