目前比較(jiào)常(cháng)用(yòng)的提取DNA的(dí)方(fāng)法(fǎ)有(yǒu)：苯酚氯仿(fǎng)抽提法，離心(xīn)柱法(fǎ)和(hé)磁(cí)珠(zhū)法，提(tí)取DNA的這(zhè)些(xiē)方(fāng)法(fǎ)有(yǒu)哪些優(yōu)缺(quē)點(diǎn)呢？你(nǐ)都知道(dào)嗎(má)？讓(ràng)小(xiǎo)編帶(dài)你(nǐ)來(lái)看(kàn)看(kàn)吧！

一(yī)，苯酚(fēn)氯仿抽提法(fǎ)

苯(běn)酚(fēn)氯仿(fǎng)提取DNA是(shì)利(lì)用酚(fēn)是蛋白質的變性劑(jì)，反復抽提(tí)，使(shǐ)蛋白質變(biàn)性，SDS(十二烷(wán)基磺酸(suān)鈉(nà))將細胞膜(mó)裂(liè)解，在蛋(dàn)白酶K，EDTA的(dí)存(cún)在下(xià)消化(huà)蛋白質或多(duō)肽(tài)或(huò)小(xiǎo)肽(tài)分(fēn)子(zǐ)，變性降解核蛋白，使DNA從(cóng)核蛋(dàn)白中(zhōng)遊離出(chū)來。而DNA易溶(róng)於(yú)水，卻不溶(róng)於(yú)有機溶劑(jì)。

蛋(dàn)白質(zhì)分子表麵(miàn)帶有(yǒu)親水基(jī)團(tuán)，也(yě)容易進行水(shuǐ)合作用，並在(zài)表麵(miàn)形(xíng)成(chéng)一(yī)層水化層，使(shǐ)蛋白(bái)質(zhì)分子(zǐ)能順(shùn)利(lì)地(dì)進入(rù)到(dào)水(shuǐ)溶液中形成穩定的膠(jiāo)體溶液(yè)。當(dāng)有(yǒu)機溶液存在時，蛋白質的(dí)這(zhè)種(zhǒng)膠(jiāo)體穩(wěn)定性(xìng)遭(zāo)到破(pò)壞，變性(xìng)沉澱。離心後有機溶劑(jì)在試管底層(有(yǒu)機相)，DNA存在(zài)於上(shàng)層水(shuǐ)相中(zhōng)，蛋(dàn)白(bái)質則沉澱於(yú)兩(liǎng)相(xiāng)之間。利(lì)用(yòng)萃取(qǔ)原(yuán)理，根據蛋白(bái)核酸溶於不同(tóng)的試(shì)劑層，將(jiāng)槍頭(tóu)伸(shēn)入(rù)不同(tóng)液(yè)層(céng)內(nèi)抽取所需的成(chéng)分，經多(duō)次(cì)洗滌(dí)後獲得純(chún)化核(hé)酸(suān)。

該方法的缺點是(shì)由(yóu)於(yú)使用(yòng)了苯(běn)酚(fēn)，氯仿等試劑，毒(dú)性較(jiào)大，長時間操(cāo)作(zuò)對(duì)人(rén)員健(jiàn)康有較(jiào)大影(yǐng)響，而且(qiě)核(hé)酸的回收率較(jiào)低(dī)，損失(shī)量較大，由於(yú)操(cāo)作體係大，不(bù)同(tóng)實驗人(rén)員操作(zuò)重(zhòng)復性(xìng)差，不利於保護(hù)RNA，很難進(jìn)行(háng)微(wēi)量化的操作(zuò)。  優(yōu)點是(shì)采(cǎi)用了實驗(yàn)室常(cháng)見(jiàn)的試劑(jì)和藥(yào)品(pǐn)，做起(qǐ)來成(chéng)本(běn)比(bǐ)較低廉。

二(èr)，離心(xīn)柱法(fǎ)

離心(xīn)柱(zhù)法主(zhǔ)要原理是將對核(hé)酸有吸附作用的官能基團(tuán)固定在離心柱模上，通過加入不同(tóng)的(dí)裂解試劑(jì)，洗滌(dí)試劑(jì)並(bìng)反復離心(xīn)，以(yǐ)達到核酸(suān)與雜質分離的(dí)目(mù)的(dí)，獲得(dé)純化(huà)的核(hé)酸。離心(xīn)柱法(fǎ)DNA提(tí)取(qǔ)它的(dí)優點是比傳統(tǒng)的酚氯(lǜ)法提取(qǔ)的純度高，有利於(yú)RNA保護，而(ér)且(qiě)能(néng)進行(háng)微(wēi)量(liáng)操(cāo)作(zuò)，以(yǐ)其(qí)低廉(lián)的價格和相(xiāng)對(duì)便捷(jié)的操作(zuò)，漸(jiàn)逐(zhú)取代了傳(chuán)統DNA提(tí)取方(fāng)法，被高校(xiào)科研(yán)所等市(shì)場普遍接(jiē)受。

離心柱法(fǎ)DNA提取的(dí)缺點是需要較(jiào)多(duō)的(dí)樣本(běn)，耗(hào)材(cái)多，對於zhen稀(xī)樣本無(wú)能為(wéi)力，特(tè)別是在(zài)法(fǎ)醫，考古等(děng)領域顯(xiǎn)得(dé)力不從心。同時(shí)離心柱(zhù)法DNA提取需要反(fǎn)復(fù)離心，不(bù)便(biàn)於高通(tōng)量(liáng)，自動(dòng)化(huà)操作，與現(xiàn)代(dài)生(shēng)物學(xué)實(shí)驗的高通量(liáng)，自動(dòng)化(huà)要(yào)求格格不入，特別(bié)是(shì)在基(jī)因診斷，疾病檢(jiǎn)測，轉基(jī)因檢測等領(lǐng)域，離心(xīn)柱法(fǎ)DNA提取需要(yào)大量的(dí)操作人(rén)員及儀器設(shè)備(bèi)。當麵對突發疫(yì)情(qíng)時，更(gēng)是需要(yào)有(yǒu)高通(tōng)量的DNA提取設(shè)備與(yǔ)方法才(cái)能更有效(xiào)準確的監測(cè)疫情，控(kòng)製疫情。為此(cǐ)需要(yào)一種(zhǒng)新(xīn)的(dí)DNA提(tí)取方法解決這個實(shí)際(jì)難(nán)題。在這(zhè)個(gè)時代潮流需求的(dí)驅動下，磁(cí)珠法DNA提取應運(yùn)而(ér)生。

三，磁珠(zhū)法(fǎ)

磁珠法的(dí)原理是在(zài)磁珠(zhū)表麵(miàn)修飾有(yǒu)對核(hé)酸有吸(xī)附作用(yòng)的特(tè)定(dìng)活性(xìng)官能基團(tuán)，通(tōng)過不(bù)同的(dí)裂解液結合(hé)液(yè)洗滌(dí)液在特定(dìng)的(dí)條(tiáo)件下能夠(gòu)與(yǔ)目(mù)的(dí)物質(zhì)進行(háng)特異(yì)性結(jié)合(hé)，同時(shí)利用磁珠自身的(dí)磁性(xìng)，在外(wài)磁(cí)場(cháng)的作用(yòng)下(xià)可以方便(biàn)的實現定(dìng)向移動與富(fù)集，從(cóng)而達到(dào)核(hé)酸與雜(zá)質(zhì)分(fēn)離(lí)的(dí)目的，進(jìn)而實現對目標(biāo)物質的分離純(chún)化，獲(huò)得純化核(hé)酸(suān)。

磁珠(zhū)法(fǎ)是納米科(kē)技與生物技(jì)術(shù)的(dí)wan美結合，具(jù)有其(qí)他(tā)DNA提取方法無(wú)fa比(bǐ)擬的(dí)優(yōu)勢(shì)，主要體現在：

a.能(néng)夠(gòu)實(shí)現自動化(huà)，高通(tōng)量操作，配合(hé)96孔的(dí)核酸(suān)自(zì)動(dòng)提取儀，在以往(wǎng)做一個樣品(pǐn)的提取時(shí)間(jiān)內可(kě)同(tóng)時實現對(duì)96個(gè)樣品(pǐn)的處理(lǐ)，效率直接提高(gāo)96倍(bèi)，滿足了當前生物學(xué)高(gāo)通量(liáng)操(cāo)作(zuò)的要(yào)求，使得在(zài)大規模疫(yì)情爆發(fā)時能夠進行快速(sù)篩查原(yuán)因(yīn)，這(zhè)個(gè)優點是其他方(fāng)法難以趕超的。

b.操作簡單，用(yòng)時(shí)短，整個(gè)提取(qǔ)流程隻有裂解，結合(hé)，洗滌(dí)，洗脫四(sì)步短時(shí)間內即可完成(chéng)。

c.安(ān)全無毒，不使用傳統方法中的苯(běn)，氯(lǜ)仿等有(yǒu)毒試劑，對(duì)實驗操作人員(yuán)的傷(shāng)害少，保護了實(shí)驗人員(yuán)的身(shēn)體健康。

d.磁珠與(yǔ)核(hé)酸的特(tè)異(yì)性(xìng)結(jié)合使得(dé)提取(qǔ)的核(hé)酸(suān)純(chún)度高，濃度(dù)大(dà)。

e.靈(líng)敏度高(gāo)，適合法(fǎ)醫(yī)樣本等痕量(liáng)DNA提取(qǔ)。

隨(suí)著(zhuó)當代生(shēng)物(wù)學(xué)的(dí)高速發展(zhǎn)及核(hé)酸提(tí)取儀(yí)的(dí)大量普(pǔ)及，為(wéi)了滿足(zú)時代(dài)要求，吉(jí)恩(ēn)特生(shēng)物專業(yè)研(yán)製磁珠(zhū)法DNA提(tí)取(qǔ)，並(bìng)開發(fā)了(liǎo)多係(xì)列磁(cí)珠法DNA提(tí)取的(dí)係(xì)統(tǒng)化方案，為廣(guǎng)大科研工作(zuò)者(zhě)提高(gāo)試驗效(xiào)率，簡化試驗(yàn)過程提供(gōng)強有力的(dí)技術支(zhī)持和產品保(bǎo)障(zhàng)，磁(cí)珠法DNA提取(qǔ)也將成為現(xiàn)代(dài)分(fēn)子生物學的(dí)主流(liú)。

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