抗體保(bǎo)存(cún)的是否得當(dāng)，直(zhí)接決定(dìng)了抗體的(dí)活性(xìng)和(hé)使用效果，那(nà)麼我們該如何正確(què)保存(cún)抗體呢(ní)？讓我們一起來看(kàn)看(kàn)吧(bā)！

一，保(bǎo)存溫度和條件

很多抗(kàng)體(tǐ)的最佳(jiā)保存條件(jiàn)是分裝成(chéng)小包裝凍存於-20°C或(huò)-80°C。分(fēn)裝(zhuāng)能(néng)使凍融引起的(dí)損(sǔn)失減到最小，同(tóng)時可(kě)避免多次在(zài)一個管(guǎn)內(nèi)取(qǔ)樣(yàng)而(ér)由(yóu)槍頭引入(rù)的汙(wū)染(rǎn)。分(fēn)裝凍存的(dí)抗體(tǐ)，融(róng)解(jiě)一次後剩(shèng)餘抗體應保存(cún)於(yú)4°C。收到抗體(tǐ)後(hòu)，應10,000 x g 離心(xīn)20秒，使(shǐ)管口(kǒu)螺紋(wén)內(nèi)的抗(kàng)體(tǐ)溶液全(quán)部離(lí)心(xīn)至管底，用(yòng)低(dī)蛋白(bái)吸附性(xìng)的(dí)微(wēi)量(liáng)離(lí)心管(guǎn)分(fēn)裝(zhuāng)。分裝量(liáng)的(dí)多少取決於(yú)每(měi)次試(shì)驗的使用量。分裝(zhuāng)量不能少於(yú)10μl；分裝量(liáng)越(yuè)少(shǎo)，由(yóu)於蒸發(fā)和吸(xī)附(fù)於(yú)管(guǎn)內壁而引起(qǐ)的(dí)損(sǔn)失會(huì)越大。

除了(liǎo)腹水液(yè)含蛋(dàn)白酶(méi)應(yīng)立即(jí)凍(dòng)存外，大多數抗體接收(shōu)後(hòu)可(kě)在4°C保(bǎo)存(cún)一(yī)至(zhì)兩(liǎng)周(zhōu)，隨後(hòu)可(kě)凍存(cún)以長期(qī)保存(cún)。同樣，應(yīng)按照說明書推薦(jiàn)的(dí)條(tiáo)件進(jìn)行(háng)保存。

二，特殊(shū)情況

1，酶聯抗體(tǐ)，不(bù)應凍存(cún)，4°C可保證(zhèng)穩(wěn)定(dìng)。凍(dòng)融會(huì)降低(dī)酶(méi)的活性(xìng)，同(tóng)時影(yǐng)響抗(kàng)體的吸附能(néng)力(lì)。

2，偶聯標記(jì)的(dí)抗(kàng)體(tǐ)，無論是(shì)標記的熒光(guāng)染料(liào)，酶還是(shì)生物(wù)素(sù)，都應(yīng)保存(cún)於深色的管內(nèi)並包裹上鋁(lǚ)箔(bó)。如果暴(bào)露(lòu)在光綫下(xià)可(kě)能會減(jiǎn)弱(ruò)偶(ǒu)聯標(biāo)記(jì)物(wù)的(dí)活(huó)性(xìng)。熒(yíng)光(guāng)標記物尤(yóu)其(qí)容(róng)易受到光漂(piāo)白作(zuò)用(yòng)，整個實驗過程中均(jūn)應避光。

3，免疫球蛋白G3同種(zhǒng)型抗(kàng)體(tǐ)凍融後易(yì)形成(chéng)聚合物，因此應一(yī)直(zhí)保存(cún)於4°C。

4，用疊(dié)氮(dàn)hua鈉(nà)防止汙染

為防(fáng)止(zhǐ)微生物汙(wū)染，在抗體(tǐ)溶液(yè)中應加(jiā)入(rù)疊氮(dàn)hua鈉，終(zhōng)濃度為0.02%（質(zhì)量百分(fēn)比）。

5，什(shí)麼(mó)時候不能(néng)用(yòng)疊氮(dàn)hua鈉

如(rú)果(guǒ)用(yòng)抗(kàng)體標記(jì)活(huó)細(xì)胞，或用(yòng)於體內(nèi)實(shí)驗，確保所用製(zhì)劑(jì)中(zhōng)不(bù)含(hán)疊氮(dàn)hua鈉。這種抗(kàng)生素(sù)對大多(duō)數(shù)有機體都有(yǒu)毒性(xìng)：會阻斷(duàn)細(xì)胞色(sè)素(sù)電(diàn)子傳遞係(xì)統(tǒng)的(dí)信號。

疊氮(dàn)hua鈉會幹(gān)擾胺基的(dí)偶(ǒu)聯(lián)標(biāo)記，應在進行標(biāo)記之前(qián)將其除去。標記後(hòu)抗體(tǐ)可保存(cún)於(yú)疊氮(dàn)hua鈉，也可用不含(hán)胺基的硫(liú)柳(liǔ)汞替(tì)代(dài)。疊氮hua鈉(nà)可(kě)用(yòng)透析或凝膠過濾法(fǎ)從抗體(tǐ)溶(róng)液(yè)中除去。免(miǎn)疫(yì)球(qiú)蛋白(bái) G的(dí)分(fēn)子量是(shì)150,000 kDa（免(miǎn)疫球(qiú)蛋(dàn)白M的分(fēn)子量(liáng)是600,000 kDa），疊氮hua鈉的(dí)分子量是65道爾頓。使(shǐ)用14,000 kDa的(dí)微(wēi)量(liáng)透析裝置(zhì)，隨(suí)著(zhuó)疊(dié)氮hua鈉(nà)的擴(kuò)散，抗(kàng)體將(jiāng)保留。將(jiāng)帶有(yǒu)燒(shāo)杯的(dí)磁力(lì)攪拌器置於(yú)4°C攪拌(bàn)透(tòu)析裝置6小(xiǎo)時 , 每毫升抗體溶(róng)液要(yào)用(yòng)至(zhì)少1升(shēng)的(dí)磷酸鹽緩衝(chōng)液。更換2次lin酸(suān)鹽(yán)緩衝(chōng)液，每(měi)次均攪拌至少(shǎo)6小時(shí)。如果(guǒ)可(kě)以(yǐ)的(dí)話，所有材料均要求無(wú)菌，所有溶(róng)液都應(yīng)無菌配製。

三(sān)，凍存 / 復(fù)蘇(sū)的損失(shī)

反(fǎn)復(fù)凍融(róng)可使(shǐ)抗(kàng)體變(biàn)性(xìng)，使其(qí)形成聚(jù)合(hé)物而降(jiàng)低了抗體結(jié)合能力(lì)。

大多數抗(kàng)體在(zài)-20°C保(bǎo)存就(jiù)足夠(gòu)了(liǎo)，沒(méi)有必要(yào)置於-80°C保(bǎo)存(cún)。千萬不要使用無(wú)霜(shuāng)的(dí)冰(bīng)箱(xiāng)。反(fǎn)復凍融能(néng)減少霜的(dí)形(xíng)成，但(dàn)這正是(shì)應該避免(miǎn)的(dí)。同(tóng)理，抗(kàng)體(tǐ)應該放置於(yú)冰箱中溫(wēn)度變化最(zuì)小(xiǎo)的(dí)部位，如應放置於冰箱格裏(lǐ)，而(ér)不應放置於冰(bīng)箱門(mén)上(shàng)。

稀釋(shì)至工作濃度(dù)的(dí)抗(kàng)體最好不(bù)要在(zài)4°C保(bǎo)存超過一天時間。通(tōng)常蛋白質(zhì)在(zài)較高(gāo)濃度保存時(shí)不(bù)易發生(shēng)降解(jiě)，理想濃度(dù)為(wéi)1mg/ml或(huò)更高(gāo)，因為抗體(tǐ)溶液中包(bāo)含了如(rú)牛(niú)血清白蛋白等蛋白質(zhì)穩定(dìng)劑(jì)。加入的蛋(dàn)白可吸附於(yú)管(guǎn)壁(bì)從(cóng)而使抗(kàng)體的損(sǔn)失(shī)減到最小(xiǎo)。對(duì)用於聚合的抗體(tǐ)，不(bù)應加入(rù)蛋白(bái)穩定(dìng)劑，因(yīn)為其可(kě)能(néng)會與(yǔ)抗體競爭(zhēng)而(ér)降低抗(kàng)體(tǐ)的聚合活性。

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