細(xì)胞(bāo)轉染(rǎn)是(shì)指將(jiāng)外源性(xìng)基因(yīn)導(dǎo)入到細(xì)胞內的(dí)技術。那你(nǐ)知(zhī)道細(xì)胞(bāo)轉染(rǎn)是(shì)如(rú)何(hé)分(fēn)類的嗎？讓(ràng)我們(mén)一(yī)起(qǐ)來看看吧
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一，根據(jù)導(dǎo)入時(shí)間長短進行分(fēn)類(lèi)

根據導入的(dí)核酸存(cún)在於(yú)宿主細(xì)胞的時(shí)間(jiān)長短(duǎn)，可(kě)以分為瞬時轉(zhuǎn)染(rǎn)和穩(wěn)定(dìng)轉染。

瞬時轉(zhuǎn)染（transient transfection）：指將構建好的(dí)質粒通過某種(zhǒng)方(fāng)式(shì)導入(rù)到(dào)哺乳動物(wù)細胞(bāo)內(nèi)，該質粒上的(dí)外(wài)源(yuán)基因不整合(hé)到細胞自身的(dí)基因(yīn)組上。細(xì)胞中瞬時轉染的外源基(jī)因表達(dá)時(shí)間有(yǒu)限(xiàn)，通(tōng)常(cháng)僅(jǐn)持續幾天，直(zhí)到外(wài)源基(jī)因(yīn)在細胞分(fēn)裂(liè)過程中(zhōng)因各種(zhǒng)因(yīn)素(sù)丟(diū)失(shī)為(wéi)止(zhǐ)。多用於(yú)啟(qǐ)動子和(hé)其他(tā)調控元(yuán)件的(dí)分析(xī)。目(mù)前(qián)，由於各(gè)種轉染試(shì)劑的(dí)發明(míng)，哺(bǔ)乳(rǔ)動物(wù)細胞的(dí)瞬時(shí)轉染已經(jīng)用(yòng)於生(shēng)產(chǎn)具有適當折疊(dié)和(hé)翻譯(yì)後修(xiū)飾的重組(zǔ)蛋(dàn)白(bái)。

穩(wěn)定(dìng)轉(zhuǎn)染（Stable transfected）：外(wài)源DNA整合到細胞(bāo)基(jī)因(yīn)組(zǔ)中或作為(wéi)附(fù)加(jiā)體質(zhì)粒(lì)保留在(zài)細胞中(zhōng)。與瞬(shùn)時(shí)轉(zhuǎn)染不同(tóng)，穩定轉染(rǎn)能夠整合到宿(sù)主基(jī)因組，因(yīn)此轉染細胞及其(qí)子代細(xì)胞(bāo)的基因組中(zhōng)會(huì)同時(shí)保(bǎo)留轉染(rǎn)的DNA。由於(yú)穩(wěn)轉效(xiào)率較(jiào)低(dī)，因此選(xuǎn)用有效(xiào)地(dì)轉(zhuǎn)染策略和篩選方(fāng)法很(hěn)重(zhòng)要。

二(èr)，根據(jù)轉染方式進行(háng)分(fēn)類

根據轉(zhuǎn)染(rǎn)方(fāng)式(shì)可(kě)以分(fēn)為化學(xué)，生物(wù)，物(wù)理(lǐ)方法。細胞(bāo)由帶負電荷的(dí)磷(lín)脂雙分子層構(gòu)成(chéng)，這對(duì)大(dà)分(fēn)子物(wù)質來(lái)說(shuō)是個不(bù)可透過(guò)的屏障，比如(rú)DNA和(hé)RNA的磷(lín)酸骨架，其也帶負(fù)電荷(hé)。為了(liǎo)使(shǐ)核酸(suān)穿(chuān)過(guò)細(xì)胞膜，研究人員(yuán)開發了多(duō)種(zhǒng)技(jì)術(shù)，大致(zhì)分為三類(lèi)：

化(huà)學方法(fǎ)：利用載體(tǐ)分(fēn)子包(bāo)被核(hé)酸(suān)使(shǐ)其呈現(xiàn)中(zhōng)性(xìng)電荷或正電荷(hé)。如陽離(lí)子(zǐ)脂(zhī)質體(tǐ)方法，磷酸(suān)鈣(gài)共(gòng)沉澱(diàn)法(fǎ)，其(qí)他陽(yáng)離(lí)子物(wù)質介導等技術(shù)。

生(shēng)物(wù)方(fāng)法(fǎ)：利用基因工(gōng)程病(bìng)毒轉染(rǎn)非病(bìng)毒(dú)基因到細胞中。現(xiàn)在(zài)比(bǐ)較多見(jiàn)的(dí)是各(gè)種病毒(dú)介(jiè)導的轉(zhuǎn)染技(jì)術。

物理方(fāng)法：在(zài)細(xì)胞膜表麵(miàn)產生一(yī)個瞬(shùn)時的孔從而導入DNA。如電(diàn)穿(chuān)孔法(fǎ)，顯(xiǎn)微注(zhù)射法。

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