分子(zǐ)診(zhěn)斷技術是指(zhǐ)以DNA和RNA為(wéi)診(zhěn)斷材(cái)料(liào)，用(yòng)分(fēn)子生物學技術(shù)通(tōng)過(guò)檢(jiǎn)測基因的(dí)存(cún)在，缺(quē)陷(xiàn)或(huò)表達(dá)異常，從而對(duì)人體狀(zhuàng)態和(hé)疾病作(zuò)出(chū)診斷的(dí)技(jì)術。其基本(běn)原(yuán)理(lǐ)是(shì)檢(jiǎn)測DNA或(huò)RNA的(dí)結構(gòu)是否(fǒu)變(biàn)化(huà)，量的(dí)多(duō)少及表達(dá)功能(néng)是否(fǒu)異常(cháng)，以確定(dìng)受(shòu)檢(jiǎn)者有無(wú)基(jī)因水平的異常(cháng)變化，對疾(jí)病的(dí)預(yù)防(fáng)，預(yù)測(cè)，診斷(duàn)，治(zhì)療具有(yǒu)重要意義(yì)。那(nà)麼(mó)你知道(dào)PCR檢(jiǎn)測技(jì)術(shù)的分(fēn)類(lèi)嗎
？讓我(wǒ)們(mén)一(yī)起(qǐ)來看看吧！

PCR技(jì)術是(shì)一種用(yòng)於擴(kuò)增特定(dìng)DNA片(piàn)段的分子生(shēng)物學技(jì)術(shù)，基本原(yuán)理(lǐ)是(shì)在反應室中模擬細胞內的(dí)DNA復製，即人(rén)為(wéi)創造(zào)核(hé)酸(suān)半保留(liú)復製(zhì)條(tiáo)件，使目的DNA在(zài)細胞(bāo)外完成擴增的過(guò)程。是(shì)體外(wài)DNA擴增(zēng)技術(shù)之一，至今(jīn)已(yǐ)經(jīng)超(chāo)過30年的歷(lì)史(shǐ)。

在(zài)1983年，美(měi)國(guó)人Mullis發(fā)明了聚合酶鏈反(fǎn)應技術(shù)(polymerase chain reaction, PCR),這(zhè)一(yī)技術將DNA的(dí)變(biàn)性(xìng)原理以及復性原理(lǐ)加以利(lì)用，采用適溫延伸，高(gāo)溫變性以(yǐ)及(jí)低溫(wēn)復性，讓核酸片段(duàn)實現了體(tǐ)外擴(kuò)增，可將(jiāng)極(jí)微(wēi)量的目標DNA特(tè)異地擴(kuò)增上百(bǎi)萬(wàn)倍，從(cóng)而提高對(duì)DNA分子的(dí)分析和(hé)檢測(cè)，因(yīn)為PCR有著(zhuó)很高(gāo)的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)以及特(tè)異(yì)性(xìng)，而且簡便快(kuài)速(sù)，所以這種(zhǒng)技術已經成為目前臨(lín)床基(jī)因擴增(zēng)實(shí)驗(yàn)室(shì)接受(shòu)程(chéng)度(dù)最(zuì)高(gāo)的(dí)技術。同時，PCR技術又可以分為(wéi)定量(liáng)PCR和(hé)常規PCR，定量PCR分(fēn)為(wéi)實時熒(yíng)光(guāng)定量PCR（RT-PCR）和(hé)數(shù)字PCR。

一(yī)，普(pǔ)通PCR：

采(cǎi)用普(pǔ)通(tōng)PCR 擴增儀來(lái)對(duì)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)進行擴增(zēng)，然後采(cǎi)用(yòng)瓊脂糖凝膠電(diàn)泳對(duì)產物進行(háng)檢(jiǎn)測，隻能做(zuò)定性分析(xī)。

二，熒(yíng)光定量(liáng)PCR（RT-PCR）：

熒光定(dìng)量PCR（Real-Time PCR），也叫做(zuò)qPCR，通過在(zài)反(fǎn)應體係(xì)中(zhōng)加入能夠指示(shì)反映進(jìn)程的熒(yíng)光(guāng)探(tàn)針，通(tōng)過熒光(guāng)信(xìn)號的(dí)積(jī)累來監測擴增(zēng)產(chǎn)物的積(jī)累(léi)，通過(guò)熒光(guāng)曲綫來(lái)判(pàn)斷結果，並可以(yǐ)借(jiè)助Cq 值和(hé)標準曲綫(xiàn)來定量(liáng)。

qPCR 技(jì)術由於操(cāo)作過(guò)程在封閉體(tǐ)係中進行(háng)，降低了(liǎo)汙(wū)染(rǎn)概(gài)率(shuài)，並且(qiě)可以通過對熒(yíng)光(guāng)信號監測從(cóng)而進行定(dìng)量檢(jiǎn)測(cè)，因此臨(lín)床(chuáng)應用(yòng)最為(wéi)廣(guǎng)泛(fàn)，已成為(wéi)PCR中(zhōng)的主(zhǔ)導(dǎo)技術。

實(shí)時熒光(guāng)定量PCR所(suǒ)使(shǐ)用的熒光(guāng)物質可分為：TaqMan熒光探針，分子信(xìn)標(biāo)和(hé)熒光染料。

三(sān)，數字PCR(dPCR)：

數字PCR（DigitalPCR, dPCR, Dig-PCR）通(tōng)過終點(diǎn)檢(jiǎn)測計算(suàn)目標序列(liè)的(dí)拷貝數(shù)，無(wú)需(xū)采用(yòng)內參和標準曲綫即可(kě)進行精(jīng)確的(dí)絕(jué)對(duì)定(dìng)量(liáng)檢測(cè)。

數字(zì)PCR采(cǎi)用終點(diǎn)檢測，不(bù)依(yī)賴(lài)於Ct值(zhí)（循環(huán)閾(yù)值(zhí)），所以(yǐ)數字(zì)PCR反(fǎn)應(yīng)受(shòu)擴(kuò)增(zēng)效率的(dí)影(yǐng)響(xiǎng)降低，對PCR反(fǎn)應(yīng)抑(yì)製物的耐受(shòu)能(néng)力(lì)提高，具(jù)有很高的(dí)準確度和重(zhòng)現(xiàn)性。

由(yóu)於(yú)具(jù)備(bèi)高靈(líng)敏(mǐn)度，高精確(què)度(dù)的特(tè)點，不(bù)易被PCR反應抑製劑幹擾，無需(xū)標準(zhǔn)品可(kě)實現(xiàn)真正意義的絕(jué)對(duì)定(dìng)量(liáng)，而成為(wéi)研究和(hé)應用(yòng)熱點(diǎn)。

更(gēng)多有關(guān)PCR檢測技(jì)術(shù)的(dí)分類，請(qǐng)聯(lián)係天(tiān)津益元(yuán)利康(kāng)生物科(kē)技有(yǒu)限公司(sī)：