你知(zhī)道(dào)瓊脂糖(táng)凝膠(jiāo)電(diàn)泳實驗的實(shí)驗(yàn)方(fāng)法(fǎ)是什麼(mó)嗎？有什麼(mó)注意(yì)事項呢(ní)？讓(ràng)我(wǒ)們(mén)一起(qǐ)來看看吧！

一(yī)，瓊(qióng)脂糖凝膠電(diàn)泳(yǒng)實(shí)驗(yàn)方(fāng)法

1. 擇適(shì)合(hé)樣品預期片(piàn)段(duàn)大(dà)小(xiǎo)的(dí)瓊脂糖(táng)凝膠濃度百分(fēn)比。將(jiāng)瓊脂糖粉末(mò)與用於運(yùn)行凝(níng)膠的(dí)相同類型(xíng)的緩衝液(yè)（TAE）結(jié)合起(qǐ)來(lái)，加(jiā)熱(rè)使混合物融(róng)化，避免(miǎn)沸(fèi)騰(téng)。

2. 選擇所需(xū)尺(chǐ)寸(cùn)的(dí)凝膠(jiāo)澆注模具和梳子(zǐ)，為(wéi)樣品和marker提供足夠(gòu)數(shù)量的孔(kǒng)，以及容(róng)納每個待裝樣品(pǐn)數(shù)量的(dí)孔容量。

3. 膠凝(níng)固(gù)後(hòu)，將(jiāng)凝(níng)膠(jiāo)放入電(diàn)泳(yǒng)儀中，電(diàn)泳(yǒng)液沒過凝(níng)膠(jiāo)，根據加入(rù)量(liáng)的多(duō)少(shǎo)，決定混(hùn)合多少ul的(dí)loding buffer，將(jiāng)樣液混合loding buffer用(yòng)移液(yè)槍加入到凝(níng)膠中。

4. 蓋上蓋(gài)子，確保電極(jí)和(hé)蓋子(zǐ)的方(fāng)向正確，注意正(zhèng)負極(jí)， 打(dǎ)開電泳儀 ，設定(dìng)凝(níng)膠(jiāo)運行的(dí)時間和電壓，根(gēn)據樣(yàng)品(pǐn)大小(xiǎo)確(què)定運行時(shí)間。

二(èr)，瓊脂(zhī)糖(táng)凝膠電(diàn)泳實(shí)驗(yàn)注意事項

1. 瓊脂糖凝(níng)膠(jiāo)溶液配(pèi)製時總液(yè)體量(liáng)不宜(yí)超(chāo)過錐型瓶50%容(róng)量。

2. 加熱時(shí)可(kě)以(yǐ)中途(tú)搖動(dòng)搖動(dòng)，防(fáng)止瓊脂糖凝膠(jiāo)凝在(zài)錐形瓶底部(bù)。

3. 注(zhù)意不要損傷梳(shū)底(dǐ)部的凝(níng)膠。防(fáng)止加樣時(shí)樣品漏出。

4. 凝膠濃(nóng)度(dù)越低(dī)，分(fēn)辨(biàn)的片段越大(dà)；凝膠(jiāo)濃度越高(gāo)，分辨的(dí)片段(duàn)越小。

5. 使用(yòng)紫(zǐ)外透射儀觀(guān)察，紫(zǐ)外(wài)光(guāng)對DNA 分子有(yǒu)損傷(shāng)作用，不可長時間照射(shè)。從(cóng)膠上回收(shōu)DNA時，應盡量(liáng)縮(suō)短光照(zhào)時(shí)間(jiān)以(yǐ)減少紫外光切割DNA。

6. 紫光燈(dēng)下觀察時(shí)應(yīng)戴(dài)上防護鏡，以(yǐ)免(miǎn)損(sǔn)傷(shāng)眼(yǎn)睛。

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