DNA的提(tí)取(qǔ)可以簡(jiǎn)單的分(fēn)為裂(liè)解和純化兩大步(bù)驟(zhòu),裂(liè)解(jiě)是破壞樣品(pǐn)細胞結構(gòu),從(cóng)而使樣品中的DNA遊離在裂解體係(xì)中(zhōng)的(dí)過程,純化(huà)則是使(shǐ)DNA與(yǔ)裂(liè)解體(tǐ)係中(zhōng)的其它成分,如蛋(dàn)白質(zhì),鹽及其它雜(zá)質分(fēn)離的過程。那麼該如何選擇(zé)DNA提取方法呢(ní)?讓我們一起(qǐ)來看看吧(bā)!
一,酚(fēn)氯仿抽提法
酚氯仿(fǎng)抽提是去除(chú)蛋白(bái)質(zhì)的有(yǒu)效手(shǒu)段,但如(rú)果蛋白質含(hán)量超(chāo)過了(liǎo)其飽(bǎo)和(hé)度,裂(liè)解體係(xì)中的蛋白(bái)質就不會被一(yī)次(cì)性去(qù)除,需(xū)要進(jìn)行多(duō)次(cì)反復(fù)抽提(tí),而每(měi)次的抽提(tí)均會(huì)導(dǎo)致核(hé)酸的損(sǔn)失(shī)。酚(fēn)氯仿(fǎng)抽提的優勢(shì)是(shì)成(chéng)本低廉,對實驗條(tiáo)件(jiàn)要求較低。二(èr),高鹽(yán)沉(chén)澱法
高(gāo)鹽沉(chén)澱法(fǎ)是酚氯仿(fǎng)抽提(tí)方法的一個變(biàn)種(zhǒng),其省略了酚(fēn)氯仿抽(chōu)提操(cāo)作的麻煩,並(bìng)且(qiě)克服了(liǎo)酚氯仿抽(chōu)提方(fāng)法的(dí)缺點,隻(zhī)是得(dé)到DNA的純度不夠(gòu)穩定(dìng)。
三,柱(zhù)式(shì)法(fǎ)
過(guò)柱法利(lì)用(yòng)某些固相(xiāng)介質,在(zài)某些特定(dìng)的(dí)條件(jiàn)下(xià),選擇性地吸附(fù)核(hé)酸(suān)而(ér)不吸(xī)附(fù)蛋白質(zhì)及(jí)鹽(yán)的特點,實現核(hé)酸與蛋(dàn)白(bái)質及鹽的(dí)分(fēn)離,是(shì)目(mù)前(qián)試劑(jì)盒提(tí)取廣泛使用的方法。
離心柱法DNA提取它(tā)的優(yōu)點是比傳統的酚氯法提取的純度(dù)高(gāo),有利於RNA保護(hù),而(ér)且(qiě)能進(jìn)行微量(liáng)操作,以其低廉的(dí)價格和相(xiāng)對(duì)便(biàn)捷的操作(zuò),漸逐取代了(liǎo)傳統DNA提(tí)取方法,被高(gāo)校科(kē)研所等(děng)市場普遍接(jiē)受。
四,磁(cí)珠法
該方(fāng)法(fǎ)將純(chún)化介質包被在(zài)納米級的磁(cí)珠(zhū)表麵(miàn),通過介(jiè)質對(duì)DNA的(dí)吸附,在外(wài)加磁(cí)場的(dí)作(zuò)用(yòng)下使DNA附(fù)著(zhuó)於磁(cí)珠並(bìng)定向(xiàng)移動,從而達到核酸(suān)與其(qí)它(tā)物質(zhì)分離(lí)的(dí)目(mù)的(dí)。磁珠(zhū)法的(dí)優勢是(shì)高質量(liáng),高通(tōng)量滿足如(rú)今對(duì)核(hé)酸提取效率的需求;靈敏(mǐn)度(dù)高(隻(zhī)需微(wēi)量的(dí)樣本);分離速(sù)度快(kuài)(磁(cí)場分(fēn)離(lí)隻需幾秒鐘(zhōng));
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