原代細胞培養也(yě)叫初代(dài)培養,是(shì)建立細胞係(xì)的第一(yī)步,其步(bù)驟包括(kuò)取(qǔ)材→分(fēn)離→培養和(hé)維(wéi)持(chí)。那(nà)麼你知(zhī)道原(yuán)代細(xì)胞培(péi)養的(dí)常(cháng)見(jiàn)問(wèn)題(tí)有(yǒu)哪(nǎ)些嗎?讓我(wǒ)們一起來(lái)看(kàn)看吧!
一,倍(bèi)增和代數有什(shí)麼(mó)區(qū)別(bié)
倍增(zēng)是培(péi)養物中細胞總(zǒng)數(shù)的(dí)翻倍(bèi),通常(cháng)是(shì)指細胞(bāo)指(zhǐ)數(shù)或(huò)對數生長(cháng)期(qī)。代數是(shì)指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶(píng)中(zhōng)移出(chū),傳代培養過程的(dí)次(cì)數(shù),傳代(dài)培(péi)養的目的(dí),是(shì)使(shǐ)細(xì)胞(bāo)處於低(dī)密(mì)度以刺(cì)激其進一(yī)步(bù)生(shēng)長(cháng)。
二,接收到的(dí)凍(dòng)存(cún)細胞該(gāi)如何(hé)處理(lǐ)
收到包裝箱後,立即(jí)將(jiāng)凍(dòng)存細(xì)胞從幹(gān)冰移入(rù)液氮(dàn)中凍存(cún)。此(cǐ)過程盡量快(kuài),以避免升溫。不要將(jiāng)細(xì)胞(bāo)儲存在-80℃,這樣會對細胞(bāo)造成不可挽(wǎn)回的(dí)傷(shāng)害。
三(sān),細胞(bāo)培養過程中,多久更(gēng)換一(yī)次培(péi)養基(jī)
這取決(jué)於(yú)細胞(bāo)生(shēng)長(cháng)的(dí)速度(dù)。一(yī)般(bān)而言2-3天更(gēng)換一次培養基,許多細(xì)胞(bāo)培養(yǎng)實驗室通常(cháng)在周(zhōu)一(yī),周(zhōu)三,周五更(gēng)換培養(yǎng)基。
注(zhù)意(yì):凍存(cún)細胞復蘇(sū)後(hòu),在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養基,以去除(chú)殘(cán)留(liú)的二甲基(jī)亞楓和死亡的(dí)細胞。
四,能否擴(kuò)增培養(yǎng)和再次(cì)凍存(cún)原代正常人類細(xì)胞(bāo)
這取決(jué)於(yú)細胞的類(lèi)型(xíng)。一些(xiē)細胞類(lèi)型像神經(jīng)細(xì)胞(bāo),神經(jīng)膠質(zhì)細胞(bāo)和一(yī)些生(shēng)長(cháng)緩(huǎn)慢(màn)的上(shàng)皮細胞(bāo),不(bù)推薦擴增培養和(hé)再(zài)次凍(dòng)存。其(qí)它的細胞類(lèi)型(xíng)像(xiàng)成(chéng)纖(xiān)維細(xì)胞,星形細(xì)胞,腎(shèn)係(xì)膜細(xì)胞,星形膠(jiāo)質細胞等等,可以擴增(zēng)培養和再次凍存。然(rán)而,需要(yào)注意的是再次凍存(cún)的(dí)過(guò)程可能(néng)導致(zhì)細(xì)胞(bāo)生(shēng)長(cháng)性(xìng)能(néng)的(dí)改變(biàn)。
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