細(xì)胞(bāo)培(péi)養物汙(wū)染往往是細胞培養實(shí)驗(yàn)室中最(zuì)常見的問題(tí)，有(yǒu)時會造成非常嚴(yán)重的後(hòu)果。細胞(bāo)培養汙染(rǎn)物可(kě)分(fēn)為兩大類，一類(lèi)是(shì)化學汙(wū)染物(wù)，如培(péi)養(yǎng)基(jī)，血清和水中的(dí)雜質，包(bāo)括內(nèi)毒素，增塑(sù)劑和(hé)洗滌劑(jì)，另(lìng)一類是(shì)生物汙染物，如細菌，黴(méi)菌(jūn)，酵母(mǔ)，病(bìng)毒和支(zhī)原體，以(yǐ)及其他細(xì)胞(bāo)係(xì)的交(jiāo)叉汙(wū)染。那麼我(wǒ)們該(gāi)如何分辨(biàn)各種(zhǒng)細胞汙(wū)染呢？讓我們一起來看看(kàn)吧！

一(yī)，細菌汙(wū)染

肉(ròu)眼(yǎn)觀察(chá)特(tè)點(diǎn)：細菌汙(wū)染時細(xì)胞(bāo)培養(yǎng)基(jī)可(kě)能在(zài)幾個小(xiǎo)時呈現混(hùn)濁(zhuó)，爆(bào)發很(hěn)快。有時稍加震蕩(dàng)，便(biàn)會有很多(duō)混濁物漂起。

在低(dī)倍顯(xiǎn)微(wēi)鏡下，細菌(jūn)以細小顆(kē)粒(lì)的形(xíng)式出(chū)現在細(xì)胞(bāo)之間(jiān)，在(zài)高(gāo)倍顯(xiǎn)微(wēi)鏡下觀察(chá)可(kě)以分辨出單個(gè)細(xì)菌(jūn)的形狀。

二(èr)，真菌汙(wū)染

常見(jiàn)的(dí)真(zhēn)菌有煙(yān)曲(qū)黴(méi)，黑(hēi)曲菌，白(bái)色念珠菌(jūn)和酵(jiào)母菌。真(zhēn)菌汙染(rǎn)時(shí)細胞(bāo)培養(yǎng)液一般(bān)不會變(biàn)渾濁(zhuó)，但在(zài)顯(xiǎn)微鏡(jìng)下(xià)可(kě)以觀察(chá)到(dào)各種(zhǒng)形(xíng)狀(zhuàng)的菌(jūn)絲。像念珠菌和酵母(mǔ)菌則會(huì)呈(chéng)卵圓(yuán)形(xíng)散在細(xì)胞周邊(biān)和(hé)細胞(bāo)之間(jiān)。

肉(ròu)眼觀察特點(diǎn)：真菌汙染(rǎn)最短3天(tiān)才能長(cháng)出橢圓形的(dí)黴(méi)斑。黴斑往(wǎng)往會漂(piāo)浮(fú)在(zài)培(péi)養(yǎng)液(yè)表(biǎo)麵，隨(suí)著時(shí)間逐步(bù)擴大。真(zhēn)菌(jūn)汙(wū)染後，細胞(bāo)生長(cháng)變(biàn)慢，最後由於(yú)營(yíng)養耗(hào)盡(jìn)及(jí)毒(dú)性作用而使(shǐ)細胞脫落死亡。真(zhēn)菌(jūn)生(shēng)長(cháng)的比較慢(màn)，不那麼(mó)容易被發(fā)現，但(dàn)是一旦發現有它的(dí)存在細胞(bāo)就被汙染了，也(yě)很難救活了。

三(sān)，病毒汙(wū)染

組(zǔ)織細(xì)胞培(péi)養過(guò)程(chéng)中(zhōng)，如(rú)果(guǒ)沒(méi)有(yǒu)除(chú)去(qù)潛(qián)在(zài)的病毒，就(jiù)會產生(shēng)病(bìng)毒汙(wū)染(rǎn)。目前，從(cóng)原代猴腎(shèn)細胞的培養(yǎng)中(zhōng)已發(fā)現不(bù)少於20種(zhǒng)血(xiě)清性(xìng)病毒。

盡管病毒(dú)汙染的(dí)細(xì)胞(bāo)不(bù)影響原(yuán)代培養(yǎng)，但生(shēng)產(chǎn)疫苗(miáo)是不(bù)安全(quán)的。因(yīn)此(cǐ)，潛在(zài)病(bìng)毒是細胞大量(liáng)生產和疫苗，幹(gān)擾素等生物(wù)製(zhì)品(pǐn)製作中的(dí)難題。

五，交(jiāo)叉汙(wū)染

雖然不如(rú)微(wēi)生物(wù)汙染普遍，但(dàn)許(xǔ)多細胞(bāo)係(xì)與HeLa以(yǐ)及其他(tā)快速生長細胞(bāo)係(xì)之(zhī)間的(dí)廣泛交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)已(yǐ)經(jīng)是(shì)一個明(míng)確(què)的問(wèn)題，會(huì)產(chǎn)生嚴重的(dí)後(hòu)果。

在進行多種細(xì)胞(bāo)培養操作時(shí)，所(suǒ)用(yòng)器具要嚴(yán)格區分(fēn)。

在進(jìn)行(háng)換液或傳代操作時，注射(shè)器和(hé)滴(dī)管(guǎn)不(bù)要觸及(jí)細胞培養瓶(píng)瓶(píng)口，以免(miǎn)把細(xì)胞帶(dài)到培養液(yè)中(zhōng)汙染其他細胞(bāo)。

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