抗體特異(yì)性驗(yàn)證方(fāng)法有(yǒu)什(shí)麼？

抗體(tǐ)特異性從始(shǐ)至(zhì)終(zhōng)備受重視
，那麼(mó)你知(zhī)道(dào)抗體(tǐ)特(tè)異(yì)性驗證(zhèng)方法有什麼(mó)嗎？讓我(wǒ)們一(yī)起來看看吧
！

一，RNA 幹擾(rǎo)(RNA Interference)

RNA 幹擾是與(yǔ)靶(bǎ)基因(yīn)序(xù)列(liè)同(tóng)源(yuán)的(dí)雙(shuāng)鏈(liàn) RNA(dsRNA)所(suǒ)誘(yòu)導的一(yī)種(zhǒng)特(tè)異性基(jī)因沉默(mò)
，可以迅速(sù)阻(zǔ)斷(duàn)基 因活性。siRNA(Small Interfering RNA)  是一(yī)種(zhǒng)小 RNA 分子(大(dà)約 21-25 核苷(gān)酸(suān))
，siRNA 隻降解與(yǔ)其序(xù)列(liè)互(hù)補配(pèi)對(duì)的 mRNA
， 其調(tiáo)控的機製是(shì)通(tōng)過(guò)互補配對來降低(dī)相(xiāng)應靶(bǎ)位(wèi)基因的表(biǎo)達(dá)
，所以(yǐ)是一種(zhǒng)典(diǎn)型(xíng)的負(fù)調控機(jī)製。

在(zài)抗體(tǐ)特異性檢測中
，可以通過這(zhè)種“基因敲降"的(dí)方(fāng)法來驗證目標蛋白(bái)表達量降(jiàng)低時(shí)
，抗(kàng)體(tǐ)與(yǔ)抗(kàng)原發(fā)生結合產生的(dí)目的(dí)條帶 是(shì)否會消(xiāo)除或(huò)降(jiàng)低(dī)。

二，基因敲除(chú)(Knock Out
，KO)

基因敲(qiāo)除是一(yī)種遺傳工(gōng)程技(jì)術
，敲(qiāo)除目的基(jī)因
，產生目(mù)的蛋白(bái)不(bù)表(biǎo)達(dá)的(dí)陰性樣品(pǐn)
，從而使(shǐ)部分功能(néng)喪失(shī)
， 並可(kě)進(jìn)一(yī)步對(duì)生物(wù)體造成影響
，進而推(tuī)測出(chū)該基因的生(shēng)物學功(gōng)能(néng)。在(zài)抗(kàng)體特(tè)異(yì)性檢測中(zhōng)
，可以通(tōng)過這種“基(jī)因敲(qiāo)除"方(fāng)法來驗證目(mù)標蛋白缺(quē)乏時
，抗(kàng)體是否(fǒu)會(huì)發生非特異(yì)性結(jié)合(hé)。

三，天然(rán)陰性樣本

天(tiān)然(rán)陰(yīn)性樣本是指(zhǐ)部(bù)分蛋(dàn)白質(zhì)存在組(zǔ)織(zhī)，細(xì)胞特異(yì)性(xìng)
，可(kě)以利(lì)用天然(rán)不表(biǎo)達(dá)的細胞(bāo)或(huò)組織作為陰性(xìng)對照
：如 CD20 不在 T 細(xì)胞(bāo)中表達
，PAX8 不 在 Hela 細(xì)胞中(zhōng)表達(dá)。此外
，某些(xiē)蛋(dàn)白質(zhì)在(zài)特(tè)定(dìng)的生(shēng)理條(tiáo)件(jiàn)下才表達
，或降(jiàng)低表達
，或表(biǎo)達(dá)量的改(gǎi)變
，也(yě)可以(yǐ)作為(wéi)特(tè)異性的參考(kǎo)依(yī)據(jù)。

四，酶(méi)法(fǎ)檢測

適(shì)用於(yú)修飾蛋白(bái)的(dí)抗體(tǐ)驗證。蛋白(bái)質(zhì)通(tōng)常會(huì)有一些修飾(shì)形(xíng)式
，如磷(lín)酸化
，糖基化等
，可以通(tōng)過檢測修(xiū)飾(shì)前後 western blot 條帶的(dí)變(biàn)化來(lái)判斷抗體的特異性
， 這時候(hòu)就(jiù)需要(yào)添加相應的(dí)酶(méi)來去除(chú)這(zhè)些修飾形式
，如磷酸酶(méi)
，糖(táng)苷酶等。酶法(fǎ)檢測(cè)是驗證抗體特(tè)異性的較為迅速(sù)簡便的(dí)方(fāng)法(fǎ)。

更(gēng)多有關(guān)抗體特(tè)異性(xìng)的(dí)驗證方法
，請聯(lián)係天津(jīn)益元(yuán)利康(kāng)生物科技有限(xiàn)公司(sī)。