1. 裂解液要(yào)預(yù)熱,以抑(yì)製DNase,加速蛋(dàn)白變(biàn)性(xìng),促進(jìn)DNA溶解
。

2.酚一(yī)定(dìng)要鹼平衡(héng)，使用平衡(héng)飽和(hé)酚(fēn)
。苯(běn)酚具有高(gāo)度腐蝕(shí)性(xìng)，飛濺(jiàn)到皮膚(fū)，粘(nián)膜和眼睛(jīng)會(huì)造(zào)成損傷(shāng)，因此應注意防(fáng)護
。氯仿易(yì)燃，易(yì)爆(bào)，易(yì)揮(huī)發(fā)，具有(yǒu)神經毒作用(yòng)，操作時應(yīng)注(zhù)意(yì)防護
。

3.各操作步(bù)驟(zhòu)要(yào)輕(qīng)柔,盡(jìn)量減少(shǎo)DNA的(dí)人為(wéi)降(jiàng)解
。

4.取(qǔ)各上清(qīng)時,不(bù)應貪多,以防非核(hé)酸(suān)類成分幹擾
。

5.異丙(bǐng)醇,乙(yǐ)醇(chún).NaAc,KAc等要預冷(lěng),以(yǐ)減少DNA的(dí)降解,促(cù)進DNA與(yǔ)蛋(dàn)白等的分相及(jí)DNA沉(chén)澱(diàn)
。

6.提(tí)取DNA過程中(zhōng)所用(yòng)到的(dí)試劑和器(qì)材(cái)要(yào)通過高(gāo)壓(yā)烤幹(gān)等(děng)辦法(fǎ)進行無核酸(suān)酶化處(chǔ)理
。

7.所有(yǒu)試(shì)劑均(jūn)用(yòng)高壓滅菌雙蒸水(shuǐ)配(pèi)製
。

8.用大口(kǒu)滴管或吸頭操作，以盡量減少(shǎo)打(dǎ)斷DNA的(dí)可(kě)能性
。

9.要用新鮮樣品或(huò)液(yè)氮冷凍-70度(dù)保(bǎo)存的樣品
。這樣(yàng)通(tōng)過降低(dī)內切酶(méi)的活(huó)性(xìng)DNA的(dí)降(jiàng)解
。

10.避(bì)免劇(jù)烈(liè)吸(xī)打DNA，不能攪(jiǎo)動基(jī)因組DNA
。

11.吸取基(jī)因組(zǔ)DNA時，要用專(zhuān)用的(dí)粗口(kǒu)吸(xī)頭，普(pǔ)通吸(xī)頭(tóu)可(kě)能(néng)會切斷(duàn)DNA或造成DNA缺口
。

12.在準(zhǔn)備(bèi)實驗的過程中，應(yīng)將DNA樣品(pǐn)放在碎(suì)冰(bīng)上
。

13.加緩(huǎn)衝液(yè)後，為了加速DNA溶(róng)解(jiě)，可(kě)以(yǐ)輕輕晃動(dòng)或輕(qīng)彈試管(guǎn)
。

14.加入(rù)緩衝(chōng)液(yè)後，置於4度過(guò)夜，也可以溶解(jiě)DNA
。

15.將DNA溶液65度(dù)溫(wēn)育(yù)10分(fēn)鐘，可以(yǐ)滅活DNase
。

16.在抽提過程中如果水(shuǐ)相和(hé)有(yǒu)機(jī)層(céng)的(dí)界麵不(bù)太(tài)清楚(chǔ)，說明其(qí)中(zhōng)蛋(dàn)白質(zhì)含量較高，可增加酚/氯仿抽提的(dí)次數或適當延長(cháng)離(lí)心(xīn)的時(shí)間(jiān)
。

17.酚(fēn)抽提時(shí)如(rú)果(guǒ)上清(qīng)液太粘稠，無(wú)法(fǎ)進行水相轉移時(shí)，可加入(rù)適量TES稀釋(shì)後(hòu)再抽提
。

更(gēng)多(duō)有關(guān)DNA提取的注意(yì)事項(xiàng)，請(qǐng)聯係(xì)天(tiān)津益元利康(kāng)生(shēng)物(wù)科技有限(xiàn)公司
。