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更新時間:2023-12-11
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DMEM培(péi)養基是一種(zhǒng)常用(yòng)的細(xì)胞培養基(jī),常用於培養多(duō)種哺(bǔ)乳動(dòng)物(wù)細(xì)胞(bāo)。那麼你知道DMEM培養基的配製(zhì)方法是什麼嗎?讓我們一(yī)起(qǐ)來看看吧(bā)!
一,準備(bèi)所需(xū)材料(liào):
1.DMEM粉(fěn)末(mò)
2.蒸(zhēng)餾(liù)水
3.生長因(yīn)子(如胰(yí)島素,胰(yí)島(dǎo)素(sù)樣(yàng)生(shēng)長(cháng)因(yīn)子,轉鐵(tiě)蛋白(bái)等(děng))
4.氨基酸(如(rú)穀氨(ān)酸,絲氨酸,甘(gān)氨酸等(děng))
5.維生(shēng)素(如(rú)維生素C,維(wéi)生素(sù)E等(děng))
6.礦(kuàng)物(wù)質鹽(yán)溶液(如鈣鹽,鉀鹽(yán),鎂(měi)鹽等(děng))
7.脂質(zhì)(如膽固醇,油酸(suān)等)
8.血清(qīng)(可(kě)選(xuǎn))
二(èr),使(shǐ)用(yòng)蒸餾水將DMEM粉(fěn)末溶解
1.根(gēn)據(jù)需(xū)要製(zhì)備的培養基量,按(àn)比(bǐ)例(lì)計算(suàn)DMEM粉末的(dí)用(yòng)量。
2.將所(suǒ)需量(liáng)的(dí)DMEM粉末加(jiā)入(rù)幹淨的(dí)燒杯中。
3.加入(rù)足(zú)夠(gòu)的蒸(zhēng)餾(liù)水攪(jiǎo)拌溶解(jiě),直至DMEM粉(fěn)末(mò)wan全溶解。
三,添加(jiā)生(shēng)長(cháng)因子(zǐ),氨基酸和(hé)維生(shēng)素
1.根據(jù)需要培養的細胞類(lèi)型(xíng)和實驗要(yào)求,添加(jiā)適量(liáng)的生長因子,氨基(jī)酸和(hé)維生素。
2.按照(zhào)zhi定(dìng)的(dí)濃(nóng)度(dù)將它們(mén)加入DMEM溶(róng)液中,並充分(fēn)攪(jiǎo)拌混合。
四(sì),添加(jiā)礦(kuàng)物質(zhì)鹽溶(róng)液(yè)和脂質(zhì)
1.根據需要培(péi)養(yǎng)的細胞類(lèi)型和(hé)實驗(yàn)要(yào)求,添加(jiā)適量的礦(kuàng)物質(zhì)鹽溶液(yè)和(hé)脂質(zhì)。
2.按照zhi定的(dí)濃度(dù)將它們(mén)加入DMEM溶液(yè)中(zhōng),並充(chōng)分攪拌(bàn)混(hùn)合。
五,調(tiáo)整(zhěng)pH值(zhí)
1.使用pH計測量(liáng)DMEM溶液的(dí)pH值(zhí)。
2.如(rú)有需要,使(shǐ)用(yòng)鹽酸(suān)或(huò)*溶(róng)液(yè)調整(zhěng)pH值至7.2-7.4。
六,配(pèi)製完(wán)畢(bì):
1.將配製好(hǎo)的DMEM培養基分(fēn)裝到無(wú)菌培(péi)養瓶或板中。
2.如(rú)需(xū)長期(qī)保(bǎo)存,可以(yǐ)在-20℃或更低(dī)溫度下(xià)保(bǎo)存。
3. DMEM培(péi)養(yǎng)基(jī)的(dí)配製方法(fǎ)可(kě)能(néng)會因實(shí)驗(yàn)要求(qiú)和細胞類型的不(bù)同而(ér)有所變化(huà),所(suǒ)以在(zài)具(jù)體(tǐ)使(shǐ)用(yòng)前最好參考(kǎo)相關文獻或生產廠家的說明書。
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