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服(fú)務(wù)熱綫(xiàn):
更(gēng)新(xīn)時(shí)間(jiān):2023-12-11
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DMEM培養(yǎng)基是一(yī)種(zhǒng)常(cháng)用的(dí)細(xì)胞培養(yǎng)基(jī),用於(yú)支(zhī)持多種(zhǒng)哺乳(rǔ)動物細胞的生(shēng)長和增殖(zhí)。那麼你知(zhī)道DMEM培養基(jī)的製作工(gōng)藝(yì)是什麼(mó)嗎?讓我們(mén)一起來(lái)看看(kàn)吧!
1. 準備(bèi)所需(xū)材(cái)料:DMEM培養基(jī)粉末(mò),無菌(jūn)去離(lí)子(zǐ)水,無菌濾器(qì),無菌(jūn)容(róng)器(qì),pH計,稱(chēng)量儀(yí)器,試(shì)劑(jì)瓶等(děng)。
2. 消毒(dú)操作(zuò)區(qū)域(yù):將工(gōng)作台,培(péi)養(yǎng)器(qì)具(jù),儀(yí)器(qì)等(děng)進(jìn)行消毒處(chǔ)理(lǐ),確保無(wú)菌條(tiáo)件(jiàn)。
3. 稱量(liáng)DMEM粉(fěn)末:根(gēn)據所需培(péi)養(yǎng)基(jī)的(dí)濃(nóng)度和(hé)容量,稱取(qǔ)適(shì)量(liáng)的(dí)DMEM粉(fěn)末(mò)。
4. 加(jiā)入無菌(jūn)去離子水:將DMEM粉末緩慢加入(rù)無菌容器(qì)中的(dí)無(wú)菌去(qù)離(lí)子水,同時攪拌均匀,直(zhí)到wan全溶解(jiě)。
5. 調整pH值:使(shǐ)用pH計測量培養(yǎng)基的(dí)pH值(zhí),如(rú)果不在(zài)理想範(fàn)圍內(通(tōng)常為(wéi)7.2-7.4),則通過添(tiān)加少量(liáng)無菌的NaOH或HCl來(lái)調(tiáo)整pH值。
6. 滅(miè)菌(jūn):將(jiāng)調(tiáo)整(zhěng)好(hǎo)pH值(zhí)的DMEM培養基(jī)進行(háng)高(gāo)壓滅菌處理,確(què)保(bǎo)無(wú)菌(jūn)性(xìng)。
7. 分(fēn)裝(zhuāng)和(hé)保存(cún):將(jiāng)滅(miè)菌的DMEM培養(yǎng)基分裝到無(wú)菌試(shì)劑瓶(píng)中(zhōng),封(fēng)閉好,存(cún)放(fàng)在4℃冰箱(xiāng)中(zhōng)保(bǎo)存(cún)。
注(zhù)意事項(xiàng):
1. 在製備過程(chéng)中(zhōng),需(xū)要嚴格(gé)遵守(shǒu)無(wú)菌(jūn)操(cāo)作規(guī)範,以避免(miǎn)細菌和(hé)其他微生(shēng)物的(dí)汙(wū)染(rǎn)。
2. 所使(shǐ)用的(dí)水(shuǐ),容器,儀器等都必須(xū)經過(guò)嚴(yán)格的消毒處理(lǐ),以(yǐ)確(què)保培養基的(dí)無菌性。
3. 在稱取DMEM粉末(mò)時,應(yīng)注意(yì)避免(miǎn)粉塵(chén)飛揚,以(yǐ)免對操(cāo)作人員(yuán)的健康造成(chéng)危(wēi)害。
4. 調(tiáo)整pH值時,應小心操作,避免(miǎn)酸鹼溶(róng)液(yè)濺(jiàn)到皮膚(fū)或眼睛,如有(yǒu)意外發(fā)生,應立(lì)即(jí)用大(dà)量清水(shuǐ)衝(chōng)洗(xǐ)相(xiāng)應(yīng)部位(wèi)。
5. 製備好的DMEM培養基(jī)應盡(jìn)快分裝和(hé)保(bǎo)存(cún),避免(miǎn)長(cháng)時間(jiān)暴露在環境中(zhōng),以免細菌和其他汙(wū)染(rǎn)物(wù)進入培(péi)養基中(zhōng)影(yǐng)響其(qí)質量(liáng)。
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