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更新時間(jiān):2023-12-15
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Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)培養(yǎng)基作為細(xì)胞(bāo)培養(yǎng)領(lǐng)域的(dí)重要組成(chéng)部(bù)分,其(qí)配(pèi)方的設(shè)計(jì)直(zhí)接關(guān)係(xì)到(dào)細(xì)胞在(zài)體外環境(jìng)中的生(shēng)長和(hé)繁衍(yǎn)。本文(wén)將(jiāng)剖析DMEM培(péi)養基(jī)的(dí)配(pèi)方,逐(zhú)一(yī)解讀(dú)其中每一成分的作用,為科(kē)研(yán)人員提供詳實(shí)的(dí)培養(yǎng)基(jī)配(pèi)方指(zhǐ)南。
DMEM培養(yǎng)基(jī)配方成分詳解:
★基礎培養基(jī):
DMEM(Dulbecco改(gǎi)良(liáng)的Eagle培養基(jī))是一(yī)種(zhǒng)廣泛(fàn)使(shǐ)用(yòng)的(dí)基礎培(péi)養基(jī),可用(yòng)於支(zhī)持(chí)多(duō)種(zhǒng)不同的哺乳動物(wù)細胞生(shēng)長(cháng)。原(yuán)始(shǐ)的(dí)DMEM培養(yǎng)基配方中(zhōng)葡萄糖(táng)濃度為(wéi)(1 g/L),DMEM高糖培養基包(bāo)含4500 mg/L的D-葡(pú)萄糖,其提供了(liǎo)培養(yǎng)基的(dí)基礎(chǔ)結構(gòu),是營(yíng)養(yǎng)的主(zhǔ)要來源(yuán)。
★緩衝(chōng)劑:
碳酸氫(qīng)鈉(nà)緩(huǎn)衝係(xì)統(tǒng)(3.7 g/L),其使得(dé)DMEM高糖培(péi)養基(jī)能夠5–10% CO2的(dí)環境來(lái)維(wéi)持生理pH值。
Hepes緩衝液:調(tiáo)節(jié)培養基的pH值,確保(bǎo)適宜(yí)的酸鹼(jiǎn)平衡(héng)。
★氨基酸和維生(shēng)素(sù):
L-穀氨(ān)酰胺是細胞(bāo)生(shēng)長(cháng)的必(bì)須氨基(jī)酸,為培(péi)養的細胞提(tí)供(gōng)重要的能(néng)量來(lái)源,能(néng)促進細(xì)胞生長(cháng),有助(zhù)於細(xì)胞存(cún)活(huó);
L-胱胺酸(Cystine)為蛋白(bái)質和(hé)氨基酸代謝(xiè)提供(gōng)基礎。
L-蛋氨(ān)酸是轉甲基(jī)化和轉硫(liú)的(dí)前(qián)體。
維(wéi)生(shēng)素(sù)B群,維生(shēng)素(sù)C和(hé)維(wéi)生(shēng)素(sù)E可滿足細胞對(duì)維生(shēng)素(sù)的(dí)需求。
抗生素(sù)(通(tōng)常(cháng)為(wéi)青(qīng)黴素和(hé)鏈(liàn)黴素)可預(yù)防(fáng)微生物(wù)汙(wū)染。
★生(shēng)長因子(可選):
表皮生(shēng)長(cháng)因子(zǐ)(EGF)和(hé)胰島(dǎo)素(sù)樣(yàng)生長因子(zǐ)(IGF):可(kě)根據(jù)需要添加,促(cù)進(jìn)特定細胞類型(xíng)的增殖。
如(rú)果(guǒ)需(xū)要,可(kě)以(yǐ)在(zài)DMEM中添加(jiā)生(shēng)長因子(zǐ)。但是(shì)添加(jiā)的生長(cháng)因子(zǐ)類型和(hé)數量應根(gēn)據特(tè)定的細(xì)胞(bāo)類型(xíng)和實驗需(xū)求來確(què)定。是否(fǒu)在DMEM中添(tiān)加生長因子(zǐ),以及(jí)添(tiān)加哪(nǎ)種(zhǒng)生長(cháng)因(yīn)子,取(qǔ)決於實驗的(dí)具體需求(qiú)和實驗(yàn)目標(biāo)。
以上(shàng)僅列(liè)出DMEM培(péi)養基(jī)部(bù)分(fēn)配方成分,對不(bù)同(tóng)細(xì)胞(bāo)培(péi)養(yǎng),可(kě)以(yǐ)根據細(xì)胞特(tè)性自(zì)行調整DMEM培(péi)養基配(pèi)方。通過(guò)深(shēn)入(rù)理解DMEM培(péi)養基的(dí)配(pèi)方(fāng),科(kē)研人(rén)員可以(yǐ)更好地(dì)根據(jù)實驗需(xū)求進行(háng)調整,為(wéi)細(xì)胞提(tí)供精準(zhǔn),有針對性的(dí)培(péi)養(yǎng)環境。中科(kē)百(bǎi)抗的(dí)DMEM培養(yǎng)基(jī)包(bāo)含4.5 g/L葡(pú)萄糖,酚紅,L-穀(gǔ)氨(ān)酰胺和110 mg/L丙(bǐng)酮酸(suān)銨,以磷(lín)酸(suān)鹽緩衝鹽水(shuǐ)(PBS)作(zuò)為緩衝液,不含有蛋(dàn)白質(zhì),脂質(zhì)或生(shēng)長(cháng)因子(zǐ)的(dí)配(pèi)方(fāng),因(yīn)此(cǐ)在(zài)使(shǐ)用時需(xū)要額(é)外補(bǔ)充(chōng)10%的胎(tāi)牛(niú)血(xiě)清(FBS),以確(què)保(bǎo)細胞(bāo)得到充足的(dí)營養和生長(cháng)所需的(dí)支(zhī)持(chí)。
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