細(xì)胞(bāo)接種鋪(pū)板(bǎn)作為體外藥(yào)理實驗中最基本的(dí)技能(néng)，是實(shí)驗成敗的關(guān)鍵因(yīn)素。鋪板(bǎn)不(bù)匀又(yòu)是(shì)科研實(shí)驗中通往成(chéng)功(gōng)道(dào)路(lù)的一大(dà)障礙(ài)，細胞聚集導致(zhì)的接(jiē)觸抑(yì)製現象(xiàng)使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的(dí)可信度(dù)大打(dǎ)折扣。本(běn)片文(wén)章將(jiāng)會(huì)介紹細胞(bāo)鋪板不匀(yún)的解決方法有哪些？一(yī)起來跟小編(biān)漲知識吧！

對(duì)於96孔(kǒng)板，每孔(kǒng)通(tōng)常(cháng)加(jiā)入100μL細胞(bāo)懸液(yè)。加樣方(fāng)式為傾斜(xié)槍頭，從孔(kǒng)的(dí)左(zuǒ)邊(biān)靠(kào)近(jìn)底部緩(huǎn)慢加入(rù)（加樣過(guò)快(kuài)同(tóng)樣容易導致細胞聚(jù)集）。筆者建議，每(měi)加(jiā)完半(bàn)拉板(bǎn)子(zǐ)時，把細(xì)胞重(zhòng)新(xīn)混匀，繼續加樣(yàng)。加樣結(jié)束後(hòu)，鏡(jìng)下觀(guān)察如有局(jú)部(bù)不(bù)均(jūn)匀(yún)現象，可以(yǐ)采取敲(qiāo)擊(jī)法(fǎ)，具體操作(zuò)如下：將(jiāng)板子置(zhì)於台(tái)麵(miàn)上(shàng)，左(zuǒ)手(shǒu)持住板子的左(zuǒ)邊，右手(shǒu)輕(qīng)輕(qīng)敲(qiāo)擊板子(zǐ)的右邊(biān)緣(yuán)(5-8次)，力(lì)度(dù)太強或次(cì)數太(tài)多會(huì)反(fǎn)而(ér)更易(yì)導(dǎo)致細胞聚集(jí)。將板子順(shùn)時(shí)針(zhēn)旋轉，依次敲擊(jī)剩餘三個(gè)邊（據(jù)說逆(nì)時針(zhēn)效果(guǒ)不好），靜置約(yuē)5-10分鐘後(hòu)，放(fàng)入37℃培(péi)養(yǎng)箱。

對於6孔(kǒng)板
，12孔(kǒng)板(bǎn)或24孔板，為(wéi)防(fáng)止表麵張力導致(zhì)的中間(jiān)液麵(miàn)太低細胞聚(jù)集的現象。通(tōng)常每孔(kǒng)首(shǒu)先滴加少(shǎo)量培(péi)基(jī)，輕(qīng)輕(qīng)晃動(dòng)浸(jìn)潤(rùn)整個孔(kǒng)底(dǐ)以(yǐ)保證(zhèng)板(bǎn)子(zǐ)的孔底都(dū)是(shì)濕(shī)潤的，這樣加液後(hòu)細胞(bāo)懸(xuán)液(yè)會(huì)平(píng)鋪在整(zhěng)個孔(kǒng)底，可(kě)以避免(miǎn)加(jiā)在(zài)中間位(wèi)置和(hé)加在周(zhōu)邊晃(huǎng)匀後周邊細胞(bāo)局(jú)部太多的(dí)現(xiàn)象，細胞分(fēn)散會較(jiào)均(jūn)匀。注(zhù)意(yì)加完細胞懸液後(hòu)要放(fàng)工作台(tái)靜(jìng)置(zhì)一(yī)下(xià)（5-10分鐘）。鏡下觀察細(xì)胞均匀(yún)度(dù)，如不(bù)均匀(yún)可(kě)采用以(yǐ)下8字法(fǎ)
，十字(zì)法及(jí)震蕩(dàng)法等(děng)方法(fǎ)進行(háng)細胞均匀度處理。具體操(cāo)作(zuò)如下(xià)：

方法一(8字法)：這種(zhǒng)方法也是大家最常見(jiàn)的(dí)細胞搖(yáo)匀方法。橫(héng)向8字(zì)搖(yáo)匀(yún)法參考下圖，搖動次數根(gēn)據鏡(jìng)下觀(guān)察和個人力度具(jù)體分(fēn)析（參(cān)考(kǎo)：保證(zhèng)液(yè)體不被晃(huǎng)動出去(qù)，8字晃動(dòng)5次理論(lùn)上就可以基本晃(huǎng)匀）。搖(yáo)匀結(jié)束，切(qiē)忌(jì)在鏡下移動觀(guān)察視野(yě)太久，以(yǐ)免伴隨(suí)著輕微的移(yí)動，細(xì)胞又(yòu)往中間(jiān)聚集(jí)。

方法(fǎ)二(èr)(十(shí)字(zì)法): 細胞鋪完板後，在水平(píng)方向上，上(shàng)下左右四個方向(xiàng)進(jìn)行移動，呈十字(zì)形(xíng)狀，重復5-6次。有些(xiē)同學(xué)覺得十字法搖匀效果並不好，方法(fǎ)關鍵的(dí)是搖(yáo)完後最好(hǎo)直接(jiē)放入培養(yǎng)箱(xiāng)中(zhōng)，不(bù)要(yào)再做過多的移動(dòng)（也有同(tóng)學建(jiàn)議可以(yǐ)在培養(yǎng)箱中搖匀）。另外，同樣不(bù)建議放到鏡下(xià)長時間(jiān)去觀(guān)察。

方法三(十字(zì)類(lèi)似法)：細胞鋪(pū)完(wán)板(bǎn)後，放(fàng)在水平(píng)板麵(miàn)上先(xiān)上下(xià)移(yí)動，再左(zuǒ)右(yòu)移動(dòng)，每個方(fāng)向(xiàng)5-6次。其他具(jù)體操作同十字法。

方(fāng)法(fǎ)四(震(zhèn)蕩(dàng)法)：細(xì)胞懸液加(jiā)完(wán)後(hòu)，將細(xì)胞(bāo)培養板抬高，對(duì)著燈光，從(cóng)底(dǐ)部往(wǎng)上看，看細胞有(yǒu)沒有抱(bào)團(tuán)。然(rán)後從底(dǐ)部敲擊(jī)，使(shǐ)之分(fēn)散。如果(guǒ)實驗(yàn)室有(yǒu)平(píng)板(bǎn)振(zhèn)蕩(dàng)器(qì)的話(huà)，我(wǒ)建議用(yòng)這(zhè)個(gè)儀(yí)器稍(shāo)振(zhèn)蕩(dàng)一(yī)下，效果(guǒ)不(bù)錯(cuò)，就(jiù)是振幅(fú)小，頻率(shuài)高(gāo)的那種(zhǒng)。（個人不太推薦這(zhè)種(zhǒng)方(fāng)法，板子接(jiē)觸(chù)振蕩(dàng)器(qì)後(hòu)增(zēng)加了染(rǎn)菌的風(fēng)險，而(ér)且(qiě)轉(zhuǎn)速(sù)的調(tiáo)節(jié)和時間(jiān)的掌(zhǎng)握比較(jiào)困難(nán)）。
以上就(jiù)是有(yǒu)關於(yú)細(xì)胞(bāo)鋪板(bǎn)不匀的(dí)解決(jué)方(fāng)法(fǎ)有哪(nǎ)些的問(wèn)題(tí)解答，如果(guǒ)你(nǐ)有更(gēng)多問題(tí)請(qǐng)咨詢益元(yuán)利(lì)康客服哦！