產品名稱(chēng)：血液/細胞基因組(zǔ)DNA小量提(tí)取試(shì)劑盒(hé)

產(chǎn)品(pǐn)貨號(hào)：TD324-50 (50 次反應(yīng))

      TD324-200 (200 次反(fǎn)應)

產(chǎn)品(pǐn)亮點：

可(kě)從全血，有核血(xiě)，唾液，痰，精子，乳汁，等(děng)樣品裏(lǐ)提(tí)取到(dào)高(gāo)純度的(dí)基因組(zǔ)DNA。

獲得的(dí)基(jī)因(yīn)組(zǔ) DNA 產(chǎn)量高，純度(dù)好，可以直(zhí)接用於酶切(qiē)，PCR，高通量(liáng)測(cè)序等(děng)敏感(gǎn)的(dí)分子生(shēng)物學實驗。

產品特性(xìng)：

樣品種類: 全(quán)血，有核(hé)血(xiě)，唾(tuò)液(yè)，痰(tán)，精子，乳(rǔ)汁(zhī)等樣(yàng)品，保(bǎo)存(cún)在保(bǎo)護劑裏的樣(yàng)品(pǐn)等(děng)。獲(huò)得的(dí)基因(yīn)組 DNA 產量高，純度好(hǎo)， 可(kě)以(yǐ)直接用(yòng) PCR 等各(gè)種分(fēn)子(zǐ)生(shēng)物學實驗。不(bù)推薦(jiàn)使(shǐ)用此試(shì)劑盒(hé)提(tí)取(qǔ)小(xiǎo) DNA 或(huò)者遊(yóu)離(lí) DNA(可使用 TD476 產品) 

基因組(zǔ) DNA 大(dà)小(xiǎo): 一般(bān)可(kě)回(huí)收(shōu)到(dào)大(dà)於 50 kb 的(dí)基因組(zǔ) DNA。如果(guǒ)樣品中(zhōng)存(cún)在(zài)綫粒體DNA，病毒(dú)DNA等也會(huì)一起提(tí)取到(dào)。

DNA 純度(dù): 獲(huò)得的(dí)基因組 DNA 產量高(gāo)，純(chún)度好， 可以(yǐ)直接用(yòng) PCR 等(děng)各(gè)種分子生物學(xué)實驗(yàn)。一般(bān)情(qíng)況 Abs260/280 ≥ 1.8 Abs260/230 ≥ 2.0。

基因組 DNA 產量(liáng): 針(zhēn)對(duì)哺乳(rǔ)動(dòng)物一(yī)般 100µl 全(quán)血中回(huí)收(shōu)到(dào) 3µg 以上的基(jī)因組DNA。

需要的儀(yí)器(qì)設備(bèi): 水浴鍋(guō)或者(zhě)金(jīn)屬(shǔ)浴（55℃）。微型離(lí)心(xīn)機(jī)，渦(wō)旋(xuán)儀(yí)。

試劑製(zhì)備：

在操作之前，需添加1060µl蛋白(bái)酶K保(bǎo)存液到(dào)每(měi)管蛋白(bái)酶K（20mg）中(zhōng)。蛋(dàn)白(bái)酶(méi)K溶液的濃(nóng)度為20mg/ml,混(hùn)匀後(hòu)，需要放到-20℃長(cháng)期(qī)保存。

提取步驟：

使(shǐ)用(yòng)基因(yīn)組DNA洗(xǐ)脫液或其(qí)他(tā)等滲(shèn)溶(róng)液（如(rú)PBS）來(lái)重懸(xuán)培養(yǎng)的細胞沉澱(diàn)。（ ≤1 x 106 細胞使用 100 μl 基因(yīn)組(zǔ)DNA洗脫(tuō)液 106 -5 x 106 細(xì)胞(bāo)數使(shǐ)用200 μl基因組(zǔ)DNA洗脫液(yè)）55℃下(xià)的蛋(dàn)白酶K過夜消(xiāo)化不會影響DNA的完整(zhěng)性。

4. 將上(shàng)清轉(zhuǎn)移(yí)至(zhì) 2L 柱中，2L 柱(zhù)套(tào)在(zài)一(yī)個收(shōu)集(jí)管裏，在≥12,000 x g 離(lí)心(xīn)力下(xià)離(lí)心1 分鐘。丟棄(qì)盛有(yǒu)濾出液(yè)的收(shōu)集(jí)管。

5. 將 2L 柱套(tào)在(zài)一(yī)個新(xīn)的(dí)收(shōu)集(jí)管裏，添(tiān)加(jiā) 400μl 的基因組(zǔ) DNA 洗(xǐ)滌(dí)液 1 到 2L 柱中(zhōng)，在(zài)≥12,000 x g離心(xīn)力(lì)下離(lí)心(xīn)1分鐘(zhōng)。倒(dǎo)掉(diào)收(shōu)集管(guǎn)中的(dí)廢(fèi)液(yè)。

6. 添加 700μl 的基因組 DNA 洗滌液 2 到(dào) 2L 柱(zhù)中，在≥12,000 x g 離(lí)心(xīn)力下(xià)離(lí)心1 分鐘。倒掉收集(jí)管中的廢液(yè)。7. 添(tiān)加 200μl 的基因組 DNA 洗滌液(yè) 2 到 2L 柱(zhù)中(zhōng)，在≥12,000 x g 離心力(lì)下(xià)離心(xīn)1 分鐘。丟棄(qì)盛(shèng)有濾出(chū)液的(dí)收(shōu)集管。

8. 將 2L 柱移至(zhì)幹(gān)淨的(dí) 1.5ml 離心管(guǎn)中直接添(tiān)加≥ 50μl 的基(jī)因(yīn)組(zǔ) DNA 洗(xǐ)脫液(yè)到(dào)柱基(jī)質上（洗脫液事(shì)先(xiān)在65-70℃水(shuǐ)浴中(zhōng)預熱效果(guǒ)更好(hǎo)，如(rú)果是(shì) 25mg 的組(zǔ)織(zhī)可以(yǐ)添加 200μl），室溫下(xià)放(fàng)置 2-5 分(fēn)鐘(zhōng)，全(quán)速(sù)離(lí)心1分鐘來(lái)洗(xǐ)脫基因(yīn)組 DNA。

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