產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng)：病毒 DNA 提取(qǔ)試(shì)劑盒

產品(pǐn)貨(huò)號：TD315-50 (50 次反(fǎn)應(yīng))

TD315-200 (200 次(cì)反應)

產品(pǐn)亮點(diǎn)：

從血清，血(xiě)漿，CSF,尿(niào)液(yè)，血液(yè)，唾(tuò)液(yè)，口腔(qiāng)拭子(zǐ)，糞便(biàn)等液體樣(yàng)品中提(tí)取(qǔ)到(dào)小(xiǎo)片(piàn)段(duàn)和大(dà)片段(duàn)的病毒(dú)基因組 DNA。

無需(xū)使(shǐ)用蛋白酶 K 或(huò)者(zhě)有(yǒu)機(jī)變性(xìng)劑。

提取到的(dí)病毒 DNA 可應(yīng)用(yòng)於 RT-PCR，高通(tōng)量測序，雜(zá)交等(děng)實驗。

選(xuǎn)配(pèi)的(dí) DNA 保護劑(jì)可以在(zài)常溫下(xià)運(yùn)輸(shū)樣品並(bìng)且(qiě)滅活病(bìng)毒。

產品特性：

1. 樣品(pǐn)來源：血漿，血清，培養(yǎng)物(wù)的上(shàng)清液(yè)，CSF,全血(xiě)，唾液(yè)，口腔(qiāng)拭子(zǐ)，糞便(biàn)，尿液，及(jí)其保存在DNA/RNA保護劑中(zhōng)的樣品。

2. 樣品(pǐn)範圍：≤400µl。

3. DNA/RNA純度：高質量(liáng)的DNA/RNA可應用於RT/PCR等敏(mǐn)感(gǎn)的(dí)下(xià)遊實驗(yàn)。

4. DNA/RNA結(jié)合(hé)量(liáng)：每個(gè)柱子可最多結(jié)合5µg的(dí)DNA。

5. 試(shì)劑盒內提供的DNA/RNA保(bǎo)護劑(jì)可(kě)穩定核(hé)酸並在(zài)常溫下運(yùn)輸，保(bǎo)護劑可有(yǒu)效(xiào)裂(liè)解(jiě)細胞並(bìng)且滅(miè)活病毒。

6. 提取到高質量病毒DNA可應用(yòng)於NGS，RT/PCR等實驗(yàn)。

溶(róng)液(yè)製備(bèi)：（使用之前需要(yào)配製(zhì)）

添(tiān)加(jiā)β-巰(qiú)基(jī)乙醇到 病毒 DNA/RNA 裂解液 中(zhōng)，終濃(nóng)度(dù)為(wéi) 0.5%（可(kě)選(xuǎn)）

例(lì)如(rú)：125µl 到(dào) 25ml 中(zhōng)，500µl 到(dào) 100ml 中(zhōng)。

添加(jiā) 24 ml 100%的乙醇(chún)（26 ml 95%的乙醇）到 6 ml 的病毒洗滌液 中(zhōng)。

添加 96 ml 100%的(dí)乙醇（102 ml 95%的(dí)乙醇）到(dào) 24 ml 的(dí)病(bìng)毒洗滌液(yè) 中。

加入(rù)後(hòu)請及時在方框(kuàng)打鉤標記(jì)，以(yǐ)免多次(cì)加入(rù)

操(cāo)作步驟(zhòu)：

提(tí)示(shì)：所有離心步驟均在室(shì)溫 10，000-16,000 x g 下進(jìn)行

第一次(cì)使用前請先確(què)認(rèn)病毒洗(xǐ)滌(dí)液(yè)中(zhōng)已經添加乙(yǐ)醇(chún)!

以下步驟(zhòu)是(shì)針(zhēn)對(duì) 400μl 以(yǐ)內體(tǐ)液設計(jì)的。體係可根(gēn)據實(shí)際樣品量(liáng)等比例(lì)調整。

首先(xiān)需(xū)要去除(chú)樣(yàng)品(pǐn)中的沉澱或不溶(róng)物，離(lí)心 1 分鐘，然後(hòu)將上清(qīng)轉移到一(yī)個幹淨的無核(hé)酸(suān)酶(méi)的(dí)管子中(zhōng)。

如果樣(yàng)品是血(xiě)清(qīng)，血(xiě)漿，CSF,唾液，尿(niào)液(yè)等生物液(yè)體，從此步(bù)開(kāi)始(shǐ)。

1. 添(tiān)加 100μl 的(dí) DNA/RNA 保(bǎo)護(hù)劑（2X）到(dào)每 100μl 樣品中，混(hùn)匀。如(rú)果(guǒ)樣(yàng)品(pǐn)是細胞懸(xuán)液(yè)，全血(xiě)，或已(yǐ)經(jīng)添加(jiā)了(liǎo) DNA/RNA 保護劑的樣(yàng)品(口(kǒu)腔拭(shì)子，樣品保存管(guǎn)等(děng))，從此步(bù)開(kāi)始(shǐ)。

2. 添(tiān)加(jiā) 600μl 的(dí)病(bìng)毒 DNA/RNA 裂解液(yè)到每 200μl 的混(hùn)合液中，混匀。

3. 將上(shàng)述混(hùn)合(hé)物(wù)加(jiā)入一個(gè) 1 號(hào)純化(huà)柱(zhù)中(zhōng)，1 號(hào)純化(huà)柱套在(zài)收集管內，離心 2 分鐘(zhōng)，倒(dǎo)掉(diào)濾出液，將 1 號純(chún)化(huà)柱套在(zài)一(yī)個新的收集管內。

4. 添加 500μl 病毒洗(xǐ)滌(dí)液(yè)到柱中(zhōng)並且離心 1 分(fēn)鐘，重(zhòng)復(fù)此(cǐ)步驟。

5. 確(què)保去(qù)除洗(xǐ)滌液的(dí)殘留，然後(hòu)將 1 號(hào)純(chún)化柱轉移(yí)到一(yī)個(gè)無(wú) DNase/RNase 的離(lí)心管中。

6. 在(zài)吸附膜(mó)的(dí)中(zhōng)間部(bù)位加 6-10µl 無(wú) DNA 酶/RNA 酶水（事(shì)先在 65－70℃水浴(yù)中(zhōng)加熱(rè)效果更好(hǎo)），離(lí)試(shì)問放(fàng)置 1 分鐘，離心(xīn) 30 秒洗(xǐ)脫(tuō) DNA。

7. 洗脫下(xià)來(lái)的(dí)病毒 DNA 可(kě)以馬上(shàng)進(jìn)行下遊(yóu)實(shí)驗(yàn)，或放置(zhì)在-70℃備用。

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