產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱：病毒 DNA /RNA提取試劑(jì)盒

產(chǎn)品貨(huò)號：TD720-50 (50 次反應)

TD720-200 (200 次反應)

產(chǎn)品(pǐn)亮(liàng)點(diǎn)：

從血(xiě)清，血漿，CSF,尿液，血(xiě)液，唾液，口(kǒu)腔拭(shì)子，糞便等液體(tǐ)樣品中提(tí)取(qǔ)到小片段和大片段(duàn)的(dí)病毒基(jī)因組 DNA。

無需(xū)使用蛋白(bái)酶 K 或者有機(jī)變(biàn)性劑。

提取到的病毒(dú) DNA/RNA 可應(yīng)用於 RT-PCR，高通(tōng)量(liáng)測(cè)序，雜交等(děng)實驗(yàn)。

包含的(dí) DNA /RNA保護(hù)劑可以(yǐ)在常(cháng)溫下(xià)運(yùn)輸樣品並且滅活(huó)病(bìng)毒。

產(chǎn)品特(tè)性(xìng)：

1. 樣(yàng)品(pǐn)來(lái)源：血漿，血清，培(péi)養(yǎng)物(wù)的上(shàng)清(qīng)液，CSF,全血(xiě)，唾液(yè)，口腔拭(shì)子(zǐ)，糞(fèn)便，尿液，及(jí)其(qí)保(bǎo)存在DNA/RNA保護劑中(zhōng)的(dí)樣品。

2. 樣品範圍：≤400µl。

3. DNA/RNA純度：高(gāo)質量的(dí)DNA/RNA可應(yīng)用於RT/PCR等敏(mǐn)感的下遊實(shí)驗。

4. DNA/RNA結合(hé)量(liáng)：每個柱子可(kě)最多(duō)結合25µg的(dí)DNA 50µg的RNA。

5. 試劑(jì)盒內提供的(dí)DNA/RNA保護(hù)劑可(kě)穩定核酸並在(zài)常溫下(xià)運(yùn)輸，保(bǎo)護劑可(kě)有(yǒu)效(xiào)裂(liè)解細胞(bāo)並且(qiě)滅活病(bìng)毒。

6. 提(tí)取到高(gāo)質(zhì)量(liáng)病毒(dú)DNA可應用於(yú)NGS，RT/PCR等實驗。

溶(róng)液(yè)製備(bèi)：（使(shǐ)用之前(qián)需要(yào)配製）

添加β-巰基(jī)乙醇到(dào) 病(bìng)毒(dú) DNA/RNA 裂(liè)解(jiě)液(yè) 中，終濃度為(wéi) 0.5%（可選(xuǎn)）

例如(rú)：125µl 到 25ml 中(zhōng)，500µl 到(dào) 100ml 中(zhōng)。

添加 24 ml 100%的乙(yǐ)醇（26 ml 95%的(dí)乙醇）到 6 ml 的(dí)病毒洗滌液 中。

添加(jiā) 96 ml 100%的乙醇(chún)（102 ml 95%的乙(yǐ)醇(chún)）到 24 ml 的病毒(dú)洗(xǐ)滌(dí)液 中。

加(jiā)入(rù)後請及時在方框打(dǎ)鉤標記(jì)，以免多(duō)次加入

操作步(bù)驟：

提示：所有離心步(bù)驟均在室(shì)溫(wēn) 10，000-16,000 x g 下進(jìn)行

第一次(cì)使(shǐ)用(yòng)前請先(xiān)確(què)認(rèn)病毒(dú)洗(xǐ)滌(dí)液中(zhōng)已(yǐ)經添(tiān)加(jiā)乙醇(chún)!

以(yǐ)下步驟是(shì)針對 400μl 以內(nèi)體(tǐ)液(yè)設(shè)計(jì)的(dí)。體係(xì)可根(gēn)據實際樣(yàng)品量等比例調整。

首(shǒu)先需要(yào)去(qù)除(chú)樣品中的(dí)沉(chén)澱或不(bù)溶(róng)物(wù)，離心 1 分鐘，然後將(jiāng)上(shàng)清轉移(yí)到(dào)一(yī)個(gè)幹(gān)淨的無核(hé)酸酶的管(guǎn)子中。

如果樣(yàng)品是血(xiě)清(qīng)，血漿，CSF,唾(tuò)液(yè)，尿(niào)液等生物液(yè)體，從此步開(kāi)始。

1. 添加(jiā) 100μl 的 DNA/RNA 保護(hù)劑（2X）到(dào)每 100μl 樣品(pǐn)中，混(hùn)匀。如果樣品(pǐn)是(shì)細(xì)胞懸液，全血，或已經添加了(liǎo) DNA/RNA 保護劑的樣(yàng)品(口(kǒu)腔拭子(zǐ)，樣品保存管等)，從此(cǐ)步開始。

2. 添加 400μl 的病毒(dú) DNA/RNA 裂解液(yè)到每 200μl 的混合液(yè)中(zhōng)，混匀。

3. 將上(shàng)述混(hùn)合物加(jiā)入(rù)一個 2 號柱(zhù) XL 中(zhōng)，2 號(hào)柱 XL 套在收(shōu)集管內(nèi)，離(lí)心(xīn) 2 分鐘(zhōng)，倒(dǎo)掉濾(lǜ)出(chū)液(yè)，將(jiāng)2號(hào)柱(zhù)XL套在(zài)一個新的收集管內(nèi)。

4. 添加 500μl 病毒洗滌液(yè)到柱(zhù)中並且(qiě)離心(xīn) 1 分(fēn)鐘(zhōng)，重復此步驟(zhòu)。

5. 添(tiān)加 500μl 乙醇（95%-100%）到(dào)柱中(zhōng)並(bìng)且離(lí)心 1 分鐘，確保(bǎo)去(qù)除(chú)洗(xǐ)滌液的(dí)殘留，然後(hòu)將(jiāng)2號柱XL轉(zhuǎn)移(yí)到一個無 DNase/RNase 的(dí)離(lí)心管中(zhōng)。

6. 在(zài)吸(xī)附膜(mó)的中(zhōng)間部位(wèi)加 50µl 無 DNA 酶/RNA 酶水(shuǐ)（事先(xiān)在(zài) 65－70℃水浴中(zhōng)加熱(rè)效果更好(hǎo)），離(lí)心(xīn)30秒洗脫DNA/RNA。

7. 洗脫(tuō)下(xià)來的病毒 DNA/RNA 可以馬(mǎ)上進行下遊實驗(yàn)，或放置在-70℃備用(yòng)。

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