哺(bǔ)乳動物細(xì)胞表達(dá)係(xì)統(tǒng)具有促(cù)使(shǐ)蛋白(bái)正確折(zhē)疊(dié)和實(shí)現復雜修(xiū)飾的功能(néng)，表(biǎo)達(dá)的蛋白更近天然(rán)狀(zhuàng)態，能夠運用於製(zhì)藥(yào)等(děng)活(huó)性(xìng)要求高(gāo)的(dí)領域(yù)。利用(yòng)哺(bǔ)乳(rǔ)動物細(xì)胞(bāo)表達(dá)係(xì)統(tǒng)生(shēng)產(chǎn)蛋白(bái)通(tōng)常(cháng)有(yǒu)兩種(zhǒng)方式：瞬(shùn)時轉(zhuǎn)染與穩定轉(zhuǎn)染(rǎn)。那麼瞬時轉(zhuǎn)染與穩定轉(zhuǎn)染的區(qū)別(bié)是什(shí)麼(mó)呢？讓(ràng)我(wǒ)們一起(qǐ)來(lái)看(kàn)看(kàn)吧！
 

　　一，瞬(shùn)時(shí)轉(zhuǎn)染(rǎn)與穩定(dìng)轉(zhuǎn)染(rǎn)實(shí)驗原理(lǐ)的異同
 

　　瞬時轉染與(yǔ)穩定(dìng)轉染都是將目的基因(yīn)轉染(rǎn)至(zhì)特定哺乳(rǔ)動(dòng)物細(xì)胞內，進而(ér)表達(dá)得到目(mù)的蛋(dàn)白(bái)。不同的是瞬時轉(zhuǎn)染的方式(shì)外(wài)源基(jī)因(yīn)並沒有(yǒu)轉染到細胞的染色體(tǐ)上(shàng)而(ér)是(shì)存(cún)在於(yú)遊離(lí)的載(zǎi)體(tǐ)上，這(zhè)樣可以在(zài)短(duǎn)時(shí)間(jiān)內獲得基因的(dí)表達產物，但(dàn)是隨著(zhuó)細胞的(dí)不斷分(fēn)裂增(zēng)殖外(wài)源基(jī)因最終(zhōng)會(huì)丟(diū)失，無法繼續進(jìn)行重組蛋白(bái)的(dí)生(shēng)產(chǎn)；而利用(yòng)細胞穩定轉(zhuǎn)染(rǎn)則會將外源基(jī)因(yīn)轉染至細胞(bāo)染(rǎn)色體(tǐ)上，目的(dí)基因不(bù)會(huì)隨(suí)著(zhuó)細胞傳代而消失(shī)，穩定轉染(rǎn)的細胞(bāo)株(zhū)能(néng)夠(gòu)長期(qī)穩定的生產目(mù)的(dí)蛋白。
 

　　二，實(shí)驗操作的(dí)差(chà)別
 

　　1. 瞬時(shí)轉染(rǎn)與(yǔ)穩(wěn)定轉染所用(yòng)的(dí)質粒是(shì)不同(tóng)的(dí)，瞬轉的(dí)質(zhì)粒(lì)不(bù)需要帶有抗性(xìng)，而(ér)用於(yú)穩定轉(zhuǎn)染(rǎn)的質粒一定(dìng)要(yào)帶(dài)有特(tè)定(dìng)的(dí)抗性(xìng)以(yǐ)便於(yú)後續的克隆(lóng)株篩選(xuǎn)。另外(wài)，兩者所(suǒ)用的培養(yǎng)基及實驗(yàn)試(shì)劑(jì)也(yě)有(yǒu)所區(qū)別(bié)。
 

　　2. 瞬(shùn)時轉染(rǎn)的(dí)操作比構建穩定(dìng)細(xì)胞係的(dí)操(cāo)作簡單(dān)，構建(jiàn)好質粒(lì)後，經(jīng)過細胞復(fù)蘇(sū)，轉染(rǎn)，細(xì)胞(bāo)培養，蛋(dàn)白純(chún)化等(děng)步(bù)驟即可得(dé)到目(mù)的蛋白；而構建(jiàn)穩定(dìng)細(xì)胞係(xì)需要先(xiān)將構建(jiàn)好的(dí)質(zhì)粒(lì)綫(xiàn)性化(huà)，再導入(rù)培(péi)養好的哺(bǔ)乳動物細胞內，通過一定(dìng)的轉(zhuǎn)染(rǎn)方式實(shí)現(xiàn)質粒與(yǔ)細胞的融(róng)合，接著經過(guò)細(xì)胞池篩選，單克隆篩(shāi)選(xuǎn)，細(xì)胞(bāo)傳代培(péi)養等步(bù)驟才(cái)能(néng)得到穩(wěn)定(dìng)轉染(rǎn)的細胞係(xì)。對穩定(dìng)細胞係進行培養能(néng)夠長期穩(wěn)定的生(shēng)產目(mù)的蛋白(bái)。
 

　　三，應(yīng)用(yòng)場景
 

　　瞬(shùn)時(shí)轉(zhuǎn)染表達(dá)和(hé)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染(rǎn)表達(dá)顯著(zhù)的(dí)區別就是在時間上(shàng)。瞬(shùn)時轉染(rǎn)在(zài)轉染後四天即能收(shōu)獲細(xì)胞，瞬(shùn)時轉(zhuǎn)染(rǎn)一(yī)般用(yòng)於(yú)基(jī)因產物的短(duǎn)期(qī)表(biǎo)達，蛋白質(zhì)的(dí)小(xiǎo)規模(mó)合(hé)成(chéng)。相對於瞬時轉(zhuǎn)染，穩定轉染表(biǎo)達適用於長(cháng)期(qī)的藥理(lǐ)學(xué)研究遺傳(chuán)調控(kòng)機製研究(jiū)及(jí)大(dà)規模的蛋白(bái)質合成(chéng)，需要大量的(dí)周(zhōu)期，因(yīn)此更(gēng)費力(lì)成(chéng)本投入(rù)高(gāo)。
 

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