細胞(bāo)凍(dòng)存(cún)是細(xì)胞(bāo)保存的主要方(fāng)法之(zhī)一。利用凍存技(jì)術(shù)將細胞置於-196℃液氮(dàn)中低溫(wēn)保(bǎo)存，可(kě)以使(shǐ)細胞暫時脫離生長狀(zhuàng)態而(ér)將其細胞特性保(bǎo)存(cún)起(qǐ)來，這樣在需要(yào)的(dí)時候再復蘇(sū)細胞(bāo)用於實(shí)驗。既(jì)可(kě)以防止因正在培養的細胞被(bèi)汙(wū)染或其(qí)他意外事件(jiàn)而使細胞丟種(zhǒng)，又(yòu)起(qǐ)到了細(xì)胞保(bǎo)種(zhǒng)的作用。那(nà)麼你知(zhī)道(dào)細胞凍(dòng)存的(dí)注意事項(xiàng)有什(shí)麼嗎(má)？讓我(wǒ)們(mén)一(yī)起(qǐ)來(lái)看(kàn)看吧(bā)！
 

　　1. DMS0稀釋時會產生(shēng)巨大的(dí)熱量(liáng)，不(bù)能直(zhí)接添加到細胞液(yè)中，需預先(xiān)配(pèi)製，且DMSO必(bì)須(xū)是細(xì)胞(bāo)培養(yǎng)級(jí)別(bié)的(dí)；
 

　　2. 緩慢冷凍，使(shǐ)細(xì)胞逐漸脫水(shuǐ)，以(yǐ)免因(yīn)形成巨大的冰晶而(ér)受損；
 

　　3. 選(xuǎn)擇生長(cháng)良(liáng)好，密(mì)度(dù)約為(wéi)80-90%，活(huó)力超(chāo)過(guò)90%的細胞(bāo)進行(háng)凍存；
 

　　4. 當細(xì)胞密(mì)度低於(yú)5x105個活細胞/mL時，復蘇成功(gōng)的幾(jī)率較低；
 

　　5. 不(bù)宜(yí)長時(shí)間(jiān)將細(xì)胞(bāo)保存(cún)在(zài)-80°C的冰箱中(zhōng)。我們建(jiàn)議(yì)將其(qí)放(fàng)入液(yè)氮中保(bǎo)存，並確保在(zài)-80°C的冰(bīng)箱(xiāng)中(zhōng)保存(cún)的(dí)時(shí)間不(bù)超過48小時(shí)；
 

　　6. 在凍存細胞操作時，請佩戴防(fáng)護眼鏡和手套(tào)，以免受(shòu)到液(yè)氮(dàn)的凍傷(shāng)；
 

　　7. 務必(bì)擰緊(jǐn)凍(dòng)存管的(dí)蓋(gài)子，以(yǐ)免(miǎn)在復(fù)蘇(sū)過程中(zhōng)滲水，導致支原體汙染；
 

　　8. 定期(qī)檢查液氮儲備，確(què)保所(suǒ)有細胞(bāo)浸沒(méi)在(zài)液體之下；
 

　　9. 在(zài)每個(gè)凍存管(guǎn)上(shàng)標(biāo)明(míng)細(xì)胞(bāo)的(dí)名稱(chēng)和凍(dòng)存(cún)時間，並記錄(lù)在(zài)冊，以避(bì)免取(qǔ)錯(cuò)細胞或(huò)找(zhǎo)不到凍存管(guǎn)的(dí)情(qíng)況發生；
 

　　10. 在-20°C的(dí)冰箱(xiāng)中將細胞(bāo)放(fàng)置(zhì)的時(shí)間不應超過1小(xiǎo)時，以防止冰(bīng)晶(jīng)過大而損(sǔn)壞(huài)細(xì)胞。
 

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