金黃(huáng)色(sè)葡(pú)萄球菌腸毒(dú)素(sù)B（Staphylococcal enterotoxin B, SEB）由於(yú)具(jù)有(yǒu)超抗原性(xìng)，且在SEs係(xì)列(liè)毒素中(zhōng)毒(dú)性最qiang，最為(wéi)耐熱，對腸(cháng)胃道蛋(dàn)白(bái)酶最(zuì)有(yǒu)抵抗性(xìng)，在食品加工過程中(zhōng)極難(nán)去(qù)除(chú)，故對人類健康具(jù)有嚴重的(dí)威(wēi)脅(xié)。

《金黃色(sè)葡(pú)萄(táo)球(qiú)菌(jūn)腸毒素B單(dān)克隆(lóng)抗(kàng)體(tǐ)的研製及雙(shuāng)功能免(miǎn)疫層析試紙(zhǐ)條(tiáo)產品開發》一(yī)文中，就(jiù)首(shǒu)先以(yǐ)為免疫原，通(tōng)過(guò)免(miǎn)疫Balb/C小鼠，測(cè)定(dìng)小(xiǎo)鼠(shǔ)血(xiě)清效價(jià)，細 胞融合，篩(shāi)選(xuǎn)陽性雜交(jiāo)瘤細(xì)胞，亞克(kè)隆以及(jí)抗體(tǐ)配(pèi)對等(děng)一(yī)係(xì)列(liè)操作，最終(zhōng)獲(huò)得兩株能穩定分(fēn)泌抗(kàng)SEB單(dān)克隆抗(kàng)體(tǐ)的細胞株(zhū)（分(fēn)別命名為15H11和(hé)5D6），且(qiě)兩(liǎng)株抗體能(néng)夠與SEB形(xíng)成穩定(dìng)的(dí)“三明治(zhì)"夾心結構；兩株抗SEB單克(kè)隆(lóng)抗(kàng)體(tǐ)均為(wéi)IgG1 亞(yà)型，親和(hé)常數分別(bié)為(wéi)2.08 × 109 M以及1.81 × 109 M；且(qiě)與其它(tā)四種(zhǒng)常(cháng)見(jiàn)腸毒(dú)素 ，SEC，以(yǐ)及(jí)均無交叉反(fǎn)應。 其次，以(yǐ)油(yóu)氨(ān)修飾(shì)的(dí)金(jīn)納米(mǐ)粒(lì)子（AuNPs@OA），紅(hóng)色(sè)聚集(jí)誘導發射熒光染料（AIEgens）為(wéi)比(bǐ)色，熒光功能(néng)材料(liào)，1-十八(bā)烯馬來(lái)酸酐(gān)聚合物（PMAO）為(wéi)填(tián)充(chōng)劑，通過微(wēi)乳(rǔ)液(yè)法(fǎ)合(hé)成了具(jù)有(yǒu)Janus結(jié)構的比色(sè)-熒光(guāng)雙功(gōng)能(néng)納米(mǐ)微球（JAIE@Au NBs）。由於(yú)AuNPs@OA和AIEgens在(zài)聚(jù)合物PMAO中溶(róng)解(jiě)度存(cún)在極(jí)大差異，在(zài)氯仿(fǎng)蒸發過程中(zhōng)AuNPs@OA和AIEgens發(fā)生明顯相分(fēn)離(lí)，導致(zhì)AIEgens自動聚集成核，PMAO形(xíng)成(chéng)殼(ké)層(céng)，而(ér)AuNPs@OA分(fēn)布在(zài)PMAO層(céng)一(yī)側，因而形(xíng)成(chéng)了具有Janus結(jié)構(gòu)的比色-熒(yíng)光雙(shuāng)功能(néng)J-AIE@Au NBs。由(yóu)於AuNPs與AIEgens存(cún)在物理間隔，且(qiě)AuNPs在AIEgens一(yī)側(cè)，因此有(yǒu)效(xiào)地(dì)消(xiāo)除了(liǎo)兩者之間(jiān)的(dí)能(néng)量(liáng)轉移(yí)，且降低(dī)了(liǎo)熒光內濾效(xiào)應(yīng)，從而(ér)極大地保(bǎo)留了(liǎo)AIEgens的熒光(guāng)信(xìn)號。隨後將單克隆抗體15H11標記(jì)J-AIE@Au NBs獲得免(miǎn)疫探針，在NC膜上噴塗抗(kàng)體5D6製備獲得(dé)比(bǐ)色(sè)定(dìng)性以及熒光定(dìng)量檢測(cè)SEB的免疫層析(xī)試紙條J-AIE@Au-ICA。在(zài)最佳(jiā)條件下，該試紙(zhǐ)條(tiáo)檢測(cè)全脂乳中(zhōng)SEB的定(dìng)量(liáng)綫性範(fàn)圍(wéi)為(wéi)0.39 ng/mL ~ 400 ng/mL，最(zuì)di檢(jiǎn)測限(xiàn)（Limit of detection, LOD）為(wéi)0.09 ng/mL，靈(líng)敏(mǐn)度較(jiào)傳統(tǒng)ELISA法提高了近70 倍；同(tóng)時，采用比色(sè)法裸(luǒ)眼定(dìng)性檢測SEB的(dí)最(zuì)di檢測限(xiàn)為1.56 ng/mL。該試紙(zhǐ)條(tiáo) 檢測全脂(zhī)乳中(zhōng)SEB的批內(nèi)，批(pī)間加標(biāo)回(huí)收率為86.0 2%至115 %，變異係(xì)數(shù)介於 4.97 %至12.86 %之間(jiān)，且與其(qí)它4種(zhǒng)常見腸毒素無交(jiāo)叉(chā)反應(yīng)。此外，該試紙(zhǐ)條檢 測生牛乳(rǔ)以(yǐ)及脫脂乳(rǔ)中SEB的LOD分(fēn)別(bié)為(wéi)0.19 ng/mL和0.19 ng/mL。隨(suí)後，將(jiāng)試紙 條分別(bié)用於檢(jiǎn)測人工汙染SEB的全脂乳(rǔ)，生牛乳和脫脂乳樣(yàng)品，結果顯示(shì)回(huí)收率(shuài) 介於(yú)91.04 %至118.82 %之間，變(biàn)異(yì)係數介於(yú)3.91 %至12.86 %之(zhī)間。以上(shàng)結(jié)果表(biǎo)明，本(běn)研究(jiū)建立的比(bǐ)色，熒光雙(shuāng)功能試(shì)紙條能(néng)夠實(shí)現對(duì)多種牛奶(nǎi)中的(dí)SEB快速且(qiě)準確的(dí)定量(liáng)分(fēn)析。

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