一，動(dòng)物(wù)原代細胞(bāo)

動物原代細(xì)胞是通過機(jī)械或酶(méi)的(dí)方(fāng)法，或(huò)兩(liǎng)者的(dí)結合，直(zhí)接從動物組織中(zhōng)分離和純化出(chū)來(lái)的。它們通常攜(xié)帶(dài)來自(zì)特定組織(zhī)(如腦(nǎo)，肝(gān)，胰(yí)腺(xiàn)，肺，心(xīn)肌，腎(shèn)，乳(rǔ)腺，前列腺，睾丸，甲(jiǎ)狀(zhuàng)腺，胃，小(xiǎo)腸，結腸，骨骼肌，脂(zhī)肪組(zǔ)織(zhī)和(hé)皮(pí)膚)的(dí)原始(shǐ)動物細(xì)胞的(dí)所(suǒ)有(yǒu)特征(zhēng)。動(dòng)物原代細(xì)胞可(kě)以從(cóng)健康或(huò)患病(bìng)的(dí)動(dòng)物身(shēn)上(shàng)提取，在(zài)組織(zhī)移(yí)除(chú)之前不(bù)需(xū)要進(jìn)行(háng)其(qí)他實驗。

一(yī)旦(dàn)目標(biāo)組(zǔ)織在無(wú)菌(jūn)條件(jiàn)下被消(xiāo)化和(hé)解剖，將被過(guò)濾(lǜ)和(hé)離(lí)心(xīn)進一(yī)步純化，重(zhòng)懸的(dí)原代細胞將(jiāng)被(bèi)計數並用(yòng)冷凍保(bǎo)存培(péi)養(yǎng)基冷凍保存(cún)或用(yòng)其有(yǒu)利(lì)的天然(由(yóu)天然(rán)存在(zài)的(dí)生物(wù)液體組成，如(rú)血(xiě)漿，組織提取物等)或人工培養基(jī)(由(yóu)必(bì)需(xū)氨基(jī)酸，維(wéi)生素，鹽(yán)，血清，碳水(shuǐ)化(huà)合(hé)物，輔助(zhù)因(yīn)子等)在孵育前為其(qí)正(zhèng)常生(shēng)長所(suǒ)需(xū)，培(péi)養(yǎng)基將(jiāng)在幾小(xiǎo)時(shí)後(hòu)根據(jù)特定細胞類型(xíng)進(jìn)行更(gēng)換(huàn)。例如(rú)，圖1顯(xiǎn)示了(liǎo)從小鼠肝(gān)髒中(zhōng)分(fēn)離和純(chún)化原代肝細胞(bāo)的(dí)過(guò)程(chéng)。在(zài)這(zhè)種(zhǒng)條件(jiàn)下純化的動物(wù)原(yuán)代細(xì)胞被命(mìng)名(míng)為(wéi)傳代0 (P0)，它們既(jì)可以在(zài)冷(lěng)凍瓶(píng)中作為庫(kù)存(cún)短時(shí)間(jiān)冷(lěng)凍保存，也可(kě)以直(zhí)接(jiē)在培養瓶中交(jiāo)付給(gěi)我們的客戶。

到目前為止，AcceGen提供了900多種(zhǒng)不同的(dí)動物原代(dài)細(xì)胞用(yòng)於研究(jiū)，提(tí)供(gōng)了各種(zhǒng)各(gè)樣的原代細胞，包(bāo)括小鼠原(yuán)代細胞(bāo)，，，猴(hóu)原(yuán)代細胞，兔原代(dài)細胞，豬原(yuán)代細胞(bāo)和其(qí)他(tā)原(yuán)代(dài)細胞(bāo)，包括(kuò)來自(zì)綿羊，鳥(niǎo)類(lèi)，雞(jī)，豚鼠，火(huǒ)雞，馬(mǎ)，山(shān)羊和貓的(dí)原(yuán)代細(xì)胞。此外，我(wǒ)們的動物(wù)原代細胞(bāo)也涵蓋(gài)了(liǎo)許多不同(tóng)的菌株(zhū)。例如(rú)，AcceGen提供的(dí)小(xiǎo)鼠原(yuán)代細(xì)胞包括(kuò)但不限(xiàn)於(yú)CD1，ICR，BALB/c，B129，CF1，C57BL/6，B6129SF2/J，C57BLKS/J和(hé)DBA/2菌株。

二(èr)，貼(tiē)壁vs.懸(xuán)浮

動物原代細(xì)胞既可以(yǐ)作為貼壁(bì)培養物生長，也可(kě)以(yǐ)保持(chí)懸浮(fú)狀態(tài)。貼壁(bì)細胞(bāo)依賴(lài)於錨定(dìng)，並以(yǐ)單層(céng)形式增殖，需要附(fù)著在(zài)固(gù)體(tǐ)或半(bàn)固(gù)體底(dǐ)物(wù)上才(cái)能增殖(zhí)。貼壁動(dòng)物原(yuán)代(dài)細(xì)胞(bāo)在(zài)細(xì)胞外基質(zhì)的(dí)幫助下(xià)粘附在培養容(róng)器(qì)上，這些(xiē)細(xì)胞通常來自於不動的組織，存在(zài)於(yú)結締(dì)組織網絡中，例(lì)如(rú)上(shàng)皮細(xì)胞和成纖維(wéi)細胞(bāo)。由於這(zhè)種培(péi)養血管的底部覆蓋著一層(céng)單(dān)細(xì)胞厚度的連(lián)續細(xì)胞，因此(cǐ)它們(mén)也(yě)被稱(chēng)為單層培(péi)養(yǎng)。大多(duō)數動物(wù)原代細胞以貼(tiē)壁(bì)培養(yǎng)的(dí)方式(shì)生長。由(yóu)於它(tā)們是(shì)單(dān)層生(shēng)長的(dí)，因(yīn)此在(zài)培養維護(hù)時可以(yǐ)方(fāng)便(biàn)地(dì)將(jiāng)其直接轉(zhuǎn)移(yí)到(dào)蓋玻(bō)片上，並在(zài)後(hòu)期的(dí)實(shí)驗中(zhōng)在(zài)顯微(wēi)鏡下(xià)進行檢(jiǎn)查。

懸浮(fú)細胞(bāo)，也(yě)稱(chēng)為(wéi)非貼(tiē)壁或錨(máo)定獨(dú)立細胞(bāo)，不附(fù)著(zhuó)在培養容器表(biǎo)麵。相反，它們在培養液中(zhōng)漂浮生長(cháng)。懸浮細(xì)胞(bāo)可(kě)以維(wéi)持(chí)在沒有經過組織(zhī)培養處理的培養瓶(píng)中(zhōng)。然而，為(wéi)了保持(chí)足夠(gòu)的(dí)氣體(tǐ)交(jiāo)換，培養基(jī)可能需(xū)要(yào)攪拌，這通常(cháng)是用磁力(lì)攪(jiǎo)拌(bàn)器或旋轉旋轉(zhuǎn)燒瓶來實(shí)現的。此外，與(yǔ)貼壁動物原代(dài)細(xì)胞相比，懸浮(fú)動物(wù)原(yuán)代(dài)細胞更(gēng)容(róng)易傳代(dài)，生長速(sù)度更(gēng)快，它們也不需要與胰蛋白酶(méi)或(huò)膠(jiāo)原(yuán)酶(méi)解離，盡管每(měi)日(rì)細胞計(jì)數(shù)和活力測定(dìng)可(kě)能需要遵循它們(mén)的(dí)生(shēng)長模(mó)式。造(zào)血幹細胞(bāo)(來源(yuán)於血液，骨髓或脾髒)和神(shén)經(jīng)幹(gān)細胞(bāo)是(shì)懸浮(fú)原代細(xì)胞(bāo)的兩個例(lì)子(zǐ)。

三，動(dòng)物(wù)原代細胞(bāo)的(dí)優勢

雖然動(dòng)物原代(dài)細(xì)胞(bāo)的壽(shòu)命有限(xiàn)，但它們為研究(jiū)人員提(tí)供了(liǎo)一些(xiē)du特的好(hǎo)處(chǔ)。首先(xiān)，由於動(dòng)物原(yuán)代(dài)細(xì)胞無(wú)需實驗室(shì)修飾即(jí)可密(mì)切反(fǎn)映體內(nèi)條件，因(yīn)此(cǐ)它們是在體(tǐ)內研究(jiū)細胞生物學功能(néng)的替代(dài)方法(fǎ)。作(zuò)為人類(lèi)係(xì)統的模型，動(dòng)物原代細胞可(kě)用於檢查廣泛的疾病機製(zhì)，並(bìng)在將(jiāng)結(jié)果應(yīng)用(yòng)於人(rén)類(lèi)之(zhī)前(qián)評估新的治(zhì)療(liáo)方(fāng)法。動(dòng)物原代細胞培(péi)養的(dí)理化(huà)和生理條件都(dū)是可調(tiáo)節的，如培養(yǎng)基(jī)的pH，溫(wēn)度，O2/CO2濃(nóng)度(dù)，滲透(tòu)壓等。這樣(yàng)的(dí)研究為了解廣(guǎng)泛的人類疾病提供了(liǎo)關(guān)鍵的見(jiàn)解(jiě)。另一(yī)方麵，對來自(zì)不同動物的(dí)分離細胞(bāo)進(jìn)行(háng)體外(wài)培養也(yě)有助(zhù)於(yú)加(jiā)深對不同細胞(bāo)的(dí)不同功(gōng)能(néng)和運作(zuò)機製的理解。不(bù)同物(wù)種間細(xì)胞代謝的研(yán)究(jiū)和(hé)細胞(bāo)生(shēng)理生化的研(yán)究就是很好的(dí)例(lì)子。此外，動(dòng)物(wù)原(yuán)代(dài)細(xì)胞也可以作為細(xì)胞(bāo)毒(dú)性(xìng)測定的重(zhòng)要(yào)模型。例如，可(kě)以研(yán)究(jiū)各(gè)種藥(yào)物或化(huà)合(hé)物對特定細胞(bāo)類型(如神經元(yuán)細胞(bāo)或(huò)肝(gān)細(xì)胞(bāo))的(dí)作用。來自神經(jīng)，肝(gān)髒，胰腺，肺，心髒，腎髒(zàng)，胃(wèi)，腸，骨(gǔ)骼，脂肪，皮(pí)膚(fū)和(hé)眼(yǎn)部(bù)係統的動(dòng)物原代細胞都是生(shēng)物醫學(xué)研究和藥(yào)物發(fā)現(xiàn)中常(cháng)用的模(mó)型。此外，通過(guò)使用動物(wù)原(yuán)代(dài)細(xì)胞，可以避免在實驗(yàn)中使用動物的倫(lún)理(lǐ)，道德和(hé)法律問題(tí)。 

為了進一(yī)步闡述動(dòng)物(wù)原代(dài)細(xì)胞的du特優勢(shì)，表1特地(dì)總結了原代(dài)細(xì)胞培(péi)養(yǎng)和連續細胞(bāo)係(xì)之(zhī)間的不(bù)同(tóng)特(tè)征。

與原(yuán)代細胞培養相(xiāng)比，連續細(xì)胞(bāo)係具(jù)有無(wú)限(xiàn)數量(liáng)的細胞代。它們(mén)在培養物中生(shēng)長得更(gēng)快，細(xì)胞密(mì)度更(gēng)高。此外，由於連續(xù)細胞培養具有(yǒu)不朽性(xìng)和致瘤性，它(tā)們沒有接觸抑(yì)製，失去了增殖(zhí)的限製(zhì)。它(tā)們(mén)通(tōng)常以多層或懸浮(fú)的方(fāng)式(shì)生長(cháng)，具(jù)有在大規模(mó)生(shēng)物反應器(qì)中培養的(dí)潛(qián)力(lì)。然而，與(yǔ)動物原(yuán)代細胞相比，連(lián)續細(xì)胞係的主要(yào)缺(quē)點是(shì)染(rǎn)色(sè)體不(bù)穩(wěn)定，表(biǎo)型(xíng)變(biàn)異以及(jí)與供體組(zǔ)織相關的特異性和特征(zhēng)性標記物(wù)的(dí)變(biàn)化[4]。因(yīn)此，連(lián)續細胞係(xì)不能代(dài)表動(dòng)物原代細(xì)胞(bāo)的體內狀(zhuàng)態。

四，結(jié)論

直(zhí)接從動物組(zǔ)織中分離的(dí)動物原代(dài)細(xì)胞保(bǎo)持(chí)了(liǎo)許(xǔ)多重要的標誌物和(hé)體內(nèi)功能。然而，它(tā)們中的大多(duō)數(shù)具有有(yǒu)限的(dí)壽命和有(yǒu)限的擴增能(néng)力(lì)。因此(cǐ)，始(shǐ)終(zhōng)使用(yòng)低傳代的動(dòng)物原(yuán)代細(xì)胞至關重(zhòng)要(yào)。盡管(guǎn)一些動(dòng)物原代細胞類型(xíng)，比(bǐ)如神經元(yuán)，甚(shèn)至不(bù)具備(bèi)分裂能力。

值(zhí)得一提的是，動(dòng)物原代(dài)細胞(bāo)從來都不是100%純(chún)的(dí)，所(suǒ)以使(shǐ)用的(dí)細(xì)胞(bāo)傳代(dài)越高，被(bèi)汙(wū)染的細胞生(shēng)長(cháng)超(chāo)過目(mù)標細胞(bāo)的風(fēng)險就越大(dà)。同(tóng)時(shí)，即使對於一(yī)些可(kě)以(yǐ)比其他細胞(bāo)傳代次數(shù)更多的(dí)原代細胞(bāo)類型，每次傳代(dài)總是會(huì)發(fā)生表型(xíng)和遺(yí)傳變化(huà)。這(zhè)些遺傳(chuán)變(biàn)化隨後會導(dǎo)致(zhì)。因此，我(wǒ)們強(qiáng)烈建議(yì)客戶盡(jìn)可能(néng)早地(dì)使用動物(wù)原代細(xì)胞傳代，以(yǐ)防止遺(yí)傳(chuán)漂變。

AcceGen始終冷凍並提供最(zuì)di傳代P0的(dí)動物(wù)原代(dài)細(xì)胞產品，以確(què)保客戶能夠獲(huò)得(dé)zui ju生(shēng)物學(xué)相關性的動物(wù)原(yuán)代細胞。AcceGen以最(zuì)可kao的程序(xù)和(hé)最高的製(zhì)造(zào)標準為全球客(kè)戶提供經(jīng)過(guò)認證(zhèng)的動(dòng)物(wù)原(yuán)代細胞(bāo)產(chǎn)品(pǐn)。

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