PEI聚乙(yǐ)烯亞(yà)胺綫性轉染試(shì)劑作為(wéi)一(yī)種陽(yáng)離子聚(jù)合(hé)物非病毒基因載(zǎi)體,在(zài)綫(xiàn)性(xìng)轉(zhuǎn)染試劑的領域(yù)中扮(bàn)演(yǎn)著比(bǐ)較重要的(dí)角色。其特(tè)殊的化(huà)學結構使其成為科研工(gōng)作(zuò)中不可少的(dí)材料(liào)之一(yī)。
PEI是由(yóu)單體(tǐ)(-CH2-CH2-NH-)構(gòu)成,具(jù)有(yǒu)伯(bó)胺(àn)﹑仲(zhòng)胺和(hé)叔胺(àn)基團(tuán)的(dí)水溶性(xìng)聚(jù)合(hé)物。其結構中,每(měi)3個原子就有(yǒu)1個(gè)氮原子,形(xíng)成(chéng)了(liǎo)豐富的胺基(jī),這(zhè)使(shǐ)得聚合物網絡在任何pH下(xià)都(dū)能充(chōng)當(dāng)有(yǒu)效(xiào)的質子(zǐ)海(hǎi)綿(mián)體(tǐ)。這一特性使(shǐ)得PEI具有較(jiào)強(qiáng)的(dí)結合(hé)DNA的(dí)能力(lì),以及黏(nián)附細(xì)胞並作為基因(yīn)轉(zhuǎn)導(dǎo)載體(tǐ)的(dí)能力(lì)。
PEI能夠將(jiāng)DNA縮合成帶正電荷的微粒(lì),這些微(wēi)粒(lì)可以(yǐ)黏(nián)合到帶(dài)有(yǒu)負電(diàn)荷(hé)的(dí)細(xì)胞(bāo)表(biǎo)麵(miàn)殘(cán)基(jī)上,並通過胞吞作(zuò)用(yòng)進入(rù)細胞。這一過(guò)程(chéng)是PEI進行(háng)基因轉染(rǎn)的(dí)基礎(chǔ),也是(shì)其得以廣(guǎng)泛應(yīng)用的關鍵所(suǒ)在(zài)。在(zài)生(shēng)理(lǐ)pH下,PEI的氨(ān)基(jī)團近半數(shù)被質子化(huà),而(ér)另(lìng)外一半則(zé)處(chǔ)於未質子化(huà)狀態。這(zhè)種(zhǒng)結構特性(xìng)不僅使(shǐ)PEI具有較好(hǎo)的水溶(róng)性(xìng),還意味(wèi)著其(qí)在不同pH條件下都能(néng)有(yǒu)效(xiào)結(jié)合(hé)核(hé)酸,並實現高(gāo)效的轉染(rǎn)效(xiào)率。
PEI25K由(yóu)於含(hán)有4-11%的(dí)殘留(liú)丙(bǐng)酰(xiān)基,這可能(néng)阻礙聚合物主鏈與DNA的有效(xiào)結(jié)合,因此(cǐ)批(pī)間轉染效率可(kě)能(néng)會(huì)有比(bǐ)較(jiào)大(dà)的(dí)差(chà)異(yì)。為了確保實驗(yàn)的(dí)一致性和可重復(fù)性,建(jiàn)議(yì)當采購PEI25K時,一個批次(cì)可(kě)以(yǐ)多(duō)購買(mǎi)一(yī)些(xiē)存儲。值得(dé)注(zhù)意(yì)的是(shì),盡管有(yǒu)效(xiào)期標注隻有18個(gè)月(yuè)左(zuǒ)右,但在室(shì)溫(wēn)幹燥避光的條件下,PEI25K的穩定性實(shí)際(jì)上可以保持10年以上(shàng)。
PEI聚乙烯亞胺(àn)綫性(xìng)轉(zhuǎn)染試(shì)劑(jì)具有細胞毒(dú)性低,轉(zhuǎn)染效率高的(dí)特點。特別(bié)是(shì)在HEK293和(hé)CHO等細(xì)胞中(zhōng),基(jī)因(yīn)表(biǎo)達效率較(jiào)高。綫(xiàn)性(xìng)PEI轉染(rǎn)試劑廣泛適(shì)用於多(duō)種細胞(bāo)係,包括(kuò)但(dàn)不限於HEK-293,HEK293T,CHO-K1,COS-1,COS-7,NIH/3T3,Sf9,HepG2和(hé)Hela細胞(bāo)等(děng)。