一(yī)，細胞核(hé)結構
：

細胞核的(dí)結構有(yǒu)核膜(mó)，核仁(rén)，染色(sè)質(zhì)，核基質
。主要功(gōng)能(néng)是遺傳(chuán)物(wù)質(zhì)DNA儲存和復製的主要場所(suǒ)，是(shì)細(xì)胞(bāo)遺傳(chuán)和代(dài)謝的(dí)控製(zhì)中(zhōng)心
。

①核(hé)膜
：核(hé)膜是(shì)細胞(bāo)核的外部(bù)邊界，由內外兩層單(dān)位膜組成，將細胞(bāo)核(hé)與細(xì)胞質分隔(gé)開來
。

②核(hé)孔(kǒng)復合體
：核孔(kǒng)復合體是核膜(mó)上的特殊結構(gòu)，由多種(zhǒng)蛋白質組(zǔ)成(chéng)，形成環(huán)狀(zhuàng)開口，允許(xǔ)大(dà)分(fēn)子物質如(rú)mRNA，tRNA以及某些蛋白質在核(hé)質(zhì)之間穿(chuān)梭(suō)
。

③染(rǎn)色質
：染色(sè)質(zhì)是細(xì)胞(bāo)核內的重要組成部分，由(yóu)DNA和蛋白質(zhì)組(zǔ)成，是(shì)遺傳信(xìn)息的(dí)載(zǎi)體
。

④核(hé)仁
：核仁是細胞核(hé)內的一個致密結構區(qū)域，與(yǔ)核糖體(tǐ)的形(xíng)成密(mì)切(qiē)相(xiāng)關
。

⑤，核基質或(huò)核(hé)骨架(jià)
：核基質或核(hé)骨架是(shì)細(xì)胞(bāo)核內除染色質(zhì)和核(hé)仁以外的所有成(chéng)分，包括核液和(hé)核(hé)骨架兩部(bù)分(fēn)
。

二(èr)，對死細(xì)胞(bāo)進行染(rǎn)色的(dí)核染(rǎn)料

(1) PI染料

PI，全稱(chēng)為(wéi)碘(diǎn)化丙啶（Propidium Iodide），是一(yī)種(zhǒng)廣泛(fàn)應用於(yú)細胞生物(wù)學和病(bìng)理學研(yán)究中的細胞核(hé)染色(sè)試劑
。

PI染色(sè)原(yuán)理(lǐ)
：

在(zài)正常情(qíng)況(kuàng)下(xià)，活細胞(bāo)的(dí)細胞(bāo)膜(mó)是完整的，具(jù)有選擇透過性，能夠阻止PI等(děng)大分子物質進(jìn)入(rù)細胞內(nèi)部(bù)
。

然而(ér)，在細(xì)胞(bāo)凋(diāo)亡(wáng)中(zhōng)晚期(qī)或(huò)壞死(sǐ)過(guò)程中(zhōng)，細(xì)胞膜的(dí)完(wán)整性(xìng)受(shòu)到破壞，通(tōng)透性增加(jiā)，使得PI能(néng)夠(gòu)穿透(tòu)細(xì)胞膜(mó)進入細(xì)胞內部(bù)
。

進(jìn)入(rù)細胞內部的PI能夠(gòu)特異(yì)性(xìng)地與雙鏈(liàn)DNA結合，形成PI-DNA復(fù)合物，熒光強度增加(jiā)20-30倍(bèi)
。

這種(zhǒng)復合(hé)物(wù)在特定波長的激發光(guāng)照(zhào)射下會發出(chū)紅(hóng)色(sè)熒光，從(cóng)而可以通過(guò)熒光(guāng)顯(xiǎn)微鏡或流式細胞儀觀察到細胞核的染(rǎn)色情(qíng)況(kuàng)
。

(2) EthD-I法

Ethidium Homodimer-I（EthD-I）又(yòu)叫做同二聚乙(yǐ)錠-I，是一種非細胞(bāo)通(tōng)透性活率指示劑(jì)，它自身熒光(guāng)很弱，但一旦(dàn)與(yǔ)DNA結(jié)合後，熒(yíng)光會明顯(xiǎn)增強(qiáng)（通常增強(qiáng)30多倍(bèi)），發(fā)出(chū)紅色熒(yíng)光（最(zuì)大激(jī)發/發射波長(cháng)分別(bié)為(wéi)大(dà)約528/617nm）
。由(yóu)於(yú)EthD-I帶(dài)有較(jiào)強的(dí)正(zhèng)電荷，它不能(néng)穿(chuān)過完整的(dí)活細(xì)胞(bāo)膜，因此通常用於檢(jiǎn)測死細胞或(huò)細(xì)胞(bāo)膜(mó)受損的(dí)細胞(bāo)
。當(dāng)細胞膜完(wán)整(zhěng)性(xìng)受(shòu)損(sǔn)時(shí)，EthD-I能夠(gòu)進(jìn)入細(xì)胞(bāo)內部並與DNA結合，從而(ér)發出(chū)明亮(liàng)的(dí)紅色(sè)熒(yíng)光(guāng)，指示細胞(bāo)的死亡狀(zhuàng)態
。

(3) DAPI

DAPI中(zhōng)文4',6-二脒(mǐ)基-2-苯基吲哚，是(shì)一(yī)種能夠(gòu)對DNA進行(háng)染色(sè)的細胞核染料，與DNA中的A-T鹼基(jī)對進(jìn)行特(tè)異性(xìng)結(jié)合(hé)，形成(chéng)穩(wěn)定(dìng)的(dí)復合物(wù)
。這種(zhǒng)結(jié)合不(bù)會(huì)改(gǎi)變DNA的(dí)二級結構(gòu)，但(dàn)會使DAPI的熒光(guāng)強度顯(xiǎn)著增(zēng)強
。

三，對活細(xì)胞進(jìn)行(háng)染(rǎn)色(sè)的(dí)核染料

(1) Hochest

Hoechst染料(liào)是一類能(néng)夠穿(chuān)透細(xì)胞膜並與(yǔ)DNA結(jié)合(hé)的非嵌(qiàn)入性(xìng)熒(yíng)光(guāng)染(rǎn)料(liào),通(tōng)過(guò)與DNA中的鹼基進行氫(qīng)鍵結(jié)合，形(xíng)成(chéng)染料(liào)-DNA復(fù)合(hé)物(wù)
。該復(fù)合物在紫外光(guāng)激發下會發(fā)射(shè)出藍色熒(yíng)光
。由(yóu)於(yú)DNA分子(zǐ)在(zài)細(xì)胞(bāo)核中富(fù)集，因(yīn)此(cǐ)Hochest染色可用(yòng)於(yú)標記細胞核
。

(2) Draq 5

Draq 5是一種具(jù)有高親和力的遠紅外熒光活細(xì)胞(bāo)DNA染(rǎn)料，是一種對雙(shuāng)鏈 DNA 具有高(gāo)親(qīn)和力(lì)的蒽醌染(rǎn)料
。它(tā)可以(yǐ)透(tòu)過(guò)細胞膜(mó)的(dí)染(rǎn)料(liào)，可標(biāo)記(jì)活(huó)細胞或(huò)固定後(hòu)/死(sǐ)細(xì)胞
。

 四(sì)，核酸(suān)染(rǎn)料推薦(jiàn)

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