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簡(jiǎn)石生物瓊脂糖凝膠(jiāo)DNA回(huí)收(shōu)試劑盒(hé)TD407操作步(bù)驟(zhòu)
更新(xīn)時間(jiān):2024-11-08
點(diǎn)擊(jī)次數(shù):1512
代理(lǐ)——天津益(yì)元利康(kāng)生(shēng)物科(kē)技有限公(gōng)司(sī)。
一,產品優點:
1. 從(cóng)瓊脂糖凝膠中快(kuài)速(15分鐘)高(gāo)產量(liáng)地(dì)回收(shōu)超(chāo)純的DNA;
2. 特(tè)製的微(wēi)量柱設計使(shǐ)得(dé)DNA可(kě)以在(zài)高濃度下洗(xǐ)脫到(dào)最(zuì)小體積(≥10 µl);
3. 洗(xǐ)脫的(dí)DNA非(fēi)常適(shì)合用於DNA連(lián)接,測序,標記,PCR等應用。
二(èr),操作(zuò)使用:
(以下離心操(cāo)作步驟的離心力(lì)均(jūn)在10,000 - 16,000 x g之(zhī)間(jiān)進(jìn)行(háng))
簡(jiǎn)石DNA回(huí)收試(shì)劑盒(hé)操(cāo)作步(bù)驟(zhòu)一(yī):
使(shǐ)用(yòng)刀片或手術刀把DNA片段(duàn)從(cóng)瓊(qióng)脂(zhī)糖凝膠上(shàng)切(qiē)除下(xià)來(lái)並(bìng)且(qiě)移(yí)置到 1.5 ml 小型(xíng)離心(xīn)管內。注意(yì): 從(cóng)凝(níng)膠上(shàng)切下(xià)的瓊(qióng)脂糖(táng)盡(jìn)可能的(dí)要少(shǎo)。
簡(jiǎn)石DNA回收試劑(jì)盒操作步驟二(èr):
將3倍體(tǐ)積的ADB溶膠(jiāo)液 添加到每(měi)1體(tǐ)積從凝(níng)膠上切下的(dí)瓊脂糖(táng)切塊中。例(lì)如(rú): 對(duì)於100 µl (mg) 的(dí)瓊脂糖凝(níng)膠切塊,添加300 µl的(dí)ADB緩衝(chōng)液。
簡(jiǎn)石DNA回(huí)收試劑(jì)盒操(cāo)作(zuò)步驟三(sān):
在37-55℃下(xià)溫(wēn)水浴(yù)10分鐘直(zhí)到凝(níng)膠切塊(kuài)完(wán)quan溶(róng)解。注意(yì):確定(dìng)凝膠(jiāo)切塊(kuài)完(wán)quan溶(róng)解是很(hěn)重要(yào)的(dí)步(bù)驟,在溫(wēn)水(shuǐ)浴過(guò)程(chéng)中(zhōng)可輔(fǔ)以溫和的攪(jiǎo)拌有(yǒu)助(zhù)於凝膠(jiāo)的(dí)溶解。如(rú)果(guǒ)DNA大小超過8kb,加熱之後需(xū)要(yào)額(é)外添(tiān)加等量膠塊體(tǐ)積的水(shuǐ)。 例如:100 µl (mg) 的(dí)瓊脂(zhī)糖凝膠(jiāo)切(qiē)塊,添加(jiā)300 µl的ADB緩衝(chōng)液(yè),加熱(rè)之(zhī)後添加100µl的水(shuǐ)。
簡(jiǎn)石DNA回(huí)收試(shì)劑盒(hé)操(cāo)作步(bù)驟(zhòu)四:
溶解的瓊脂(zhī)糖(táng)切(qiē)塊(kuài)溶液放(fàng)到1號C中(zhōng)並把柱套(tào)在收(shōu)集管裏。
簡(jiǎn)石DNA回(huí)收試劑盒(hé)操作步驟五:
離心1分(fēn)鐘(zhōng)後(hòu),倒(dǎo)掉(diào)過濾(lǜ)液(yè)。注意:柱(zhù)所能容(róng)納(nà)的樣品體積為(wéi)800 µl,所以(yǐ),如果樣(yàng)品體積超(chāo)過800 µl時(shí),柱(zhù)就要被多次填(tián)充(chōng)和離心。
簡石DNA回(huí)收試(shì)劑(jì)盒(hé)操作(zuò)步(bù)驟六(liù):
添加200µl的(dí)DNA洗滌(dí)液到(dào)柱中(zhōng)離(lí)心1分鐘(zhōng),去除(chú)濾出(chū)液。
簡石DNA回收試劑(jì)盒操作步驟七:
重復(fù)第6步洗滌(dí)步(bù)驟(zhòu)。
簡石DNA回收(shōu)試劑(jì)盒(hé)操作(zuò)步(bù)驟八(bā):
可選(xuǎn)步驟:將收(shōu)集管中(zhōng)的(dí)廢(fèi)液(yè)倒(dǎo)掉(diào),並將1號(hào)C套(tào)回收(shōu)集管(guǎn)中(zhōng)額外離(lí)心2分鐘,盡量(liáng)除去洗滌液(yè),以(yǐ)免(miǎn)洗(xǐ)滌液中(zhōng)殘留(liú)乙(yǐ)醇抑(yì)製(zhì)下(xià)遊(yóu)反(fǎn)應。
簡石DNA回(huí)收(shōu)試(shì)劑盒操作步驟九(jiǔ):
直接添(tiān)加10 µl DNA洗(xǐ)脫液(yè)到柱基質中(zhōng),將(jiāng)柱套在1.5 ml離(lí)心管(guǎn)中離心1分鐘來洗(xǐ)脫(tuō)DNA。注意(yì):從(cóng)柱(zhù)中洗脫出的(dí)DNA產(chǎn)量與pH和溫度有(yǒu)關(guān)。如(rú)果使用(yòng)水(shuǐ)來(lái)洗脫,確(què)保(bǎo)pH是 >6.0。在向(xiàng)柱中加(jiā)入(rù)水後(hòu)靜(jìng)置1分鐘可增加較(jiào)大 (> 6 kb) DNA 的產量(liáng)。在60-70℃的水中(zhōng)洗脫(tuō)DNA可增(zēng)加較大(dà)DNA (> 10 kb)的產量。
注意(yì):如果試(shì)驗需(xū)要(yào)的(dí)話,TE緩衝(chōng)液(yè) (10mMTris-HCl ,1mM EDTA,pH8.0) 或(huò)改進的TE(10mM Tris-HCl,0.1mMEDTA,pH8.5) 也(yě)可(kě)用來(lái)洗(xǐ)脫(tuō)。
如需(xū)簡(jiǎn)石生(shēng)物試(shì)劑盒(hé)請聯(lián)係(xì)簡石(shí)代理——天津益(yì)元(yuán)利康生(shēng)物(wù)科(kē)技有限(xiàn)公(gōng)司(sī)!
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