一，光學顯(xiǎn)微(wēi)鏡(jìng)觀察
 

　　凋亡細胞的主要(yào)特征(zhēng)為核(hé)染色質致(zhì)密深染(rǎn)，形(xíng)成(chéng)致密質塊(kuài)，有(yǒu)時(shí)可碎裂(liè)。
 

　　檢測方(fāng)法：細(xì)胞(bāo)塗(tú)片或組(zǔ)織(zhī)石蠟(là)切片(piàn)作HE染色(sè)或Giemsa染色，在高倍物鏡(jìng)下觀察(chá)凋(diāo)亡(wáng)細(xì)胞的形態改(gǎi)變，結(jié)合(hé)顯(xiǎn)微(wēi)測(cè)量工具(jù)可作凋亡(wáng)細胞計(jì)數。
 

　　二，視頻(pín)時差顯(xiǎn)微(wēi)技(jì)術
 

　　細胞(bāo)培養(yǎng)中(zhōng)常(cháng)用，通(tōng)過(guò)相差顯微(wēi)鏡可動(dòng)態觀察細胞(bāo)凋亡(wáng)的(dí)變化(huà)過程(chéng)，尤(yóu)其(qí)是觀察(chá)細(xì)胞表和(hé)外(wài)形的變(biàn)化(huà)。
 

　　檢測(cè)方法(fǎ)：收(shōu)集2×10^5細胞(bāo)/ml培(péi)養的細胞(bāo)，置於(yú)多孔培(péi)養(yǎng)板，加(jiā)入(rù)凋亡(wáng)誘導劑(jì)，在帶有自(zì)動(dòng)攝像(xiàng)裝置(zhì)的(dí)相差(chà)顯微(wēi)鏡(jìng)下觀察凋亡細胞(bāo)的動態改變，每(měi)隔(gé)1分鐘(zhōng)作序列(liè)攝(shè)影，連續(xù)24小時。如(rú)同進(jìn)行熒(yíng)光染色，可參(cān)熒光晃微鏡(jìng)下觀察(chá)和攝(shè)影(yǐng)。
 

　　三，電(diàn)子(zǐ)顯微鏡(jìng)觀察
 

　　雖然光(guāng)學顯微(wēi)鏡下可(kě)以看(kàn)見(jiàn)胞(bāo)膜起泡現(xiàn)象和(hé)凋(diāo)亡(wáng)小(xiǎo)體，但凋亡(wáng)細(xì)胞的形態學變化(huà)大(dà)多發生在超微(wēi)結構(gòu)，因(yīn)此用(yòng)光(guāng)鏡觀(guān)察難以令(líng)人滿意，而透射電鏡可清楚(chǔ)地(dì)觀察(chá)到(dào)細胞(bāo)結構在凋亡(wáng)不(bù)同時(shí)期的(dí)變(biàn)化。電鏡形(xíng)態學觀(guān)察是(shì)迄今為(wéi)止判斷凋亡經典(diǎn)，可(kě)靠的(dí)方法(fǎ)，被(bèi)認(rèn)為是(shì)確(què)定(dìng)細(xì)胞凋(diāo)亡(wáng)的金(jīn)標(biāo)準(zhǔn)。
 

　　檢測(cè)方法：透(tòu)射電鏡標本經(jīng)戊二醛和餓(è)酸雙重(zhòng)固(gù)定，丙酮(tóng)脫(tuō)水，環氧(yǎng)樹脂包埋(mái)，超薄切片，醋酸枸(jǔ)椽(chuán)酸電子又重(zhòng)染色(sè)，透射電(diàn)鏡觀察。掃(sǎo)描電(diàn)鏡(jìng)標本經戊二醛(quán)和(hé)二酸雙重固定(dìng)，乙醇(chún)逐(zhú)級(jí)脫水，二(èr)氧化碳(tàn)臨界(jiè)點(diǎn)幹(gān)燥，真空(kōng)噴(pēn)金，掃(sǎo)描電鏡觀察。
 

　　四，流(liú)式(shì)檢測
 

　　流式細(xì)胞(bāo)儀(yí)檢(jiǎn)測凋亡(wáng)細(xì)胞是通過(guò)檢(jiǎn)查(chá)其光射(shè)特(tè)征及(jí)熒(yíng)光(guāng)參數(shù)時行的(dí)。細胞(bāo)穿(chuān)過流式細(xì)胞(bāo)儀的(dí)激光束(shù)集(jí)點時(shí)使(shǐ)激光(guāng)發生散射(shè)，分析(xī)散(sàn)射(shè)光可(kě)以提(tí)供(gōng)細胞大小(xiǎo)及結構的(dí)信息。散射光(guāng)包括(kuò)前(qián)向散射光(guāng)和(hé)左(zuǒ)向(xiàng)角散射(shè)光兩(liǎng)種(zhǒng)，前向散(sàn)射光的強度(dù)與細胞大(dà)小，體積(jī)相產，側向(xiàng)散射光的強度與細(xì)胞結構的析(xī)射性(xìng)，顆(kē)粒(lì)性(xìng)(granu-larity)有關(guān)。
 

　　檢(jiǎn)測(cè)方(fāng)法(fǎ)：獲取(qǔ)密度(dù)1×10^6細胞(bāo)/ml左右的細(xì)胞(bāo)懸液，精洗，固定，熒(yíng)光(guāng)染料染(rǎn)色(sè)，上流式細(xì)胞儀(yí)分析(xī)。
 

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