Cell Counting Kit-8（簡(jiǎn)稱CCK-8）試劑可用於簡(jiǎn)便(biàn)而準(zhǔn)確的(dí)進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性(xìng)分(fēn)析
。

基本原理(lǐ)：該試劑中含(hán)有(yǒu)WST-8【化學(xué)名：2-(2-甲(jiǎ)氧基(jī)-4-硝(xiāo)基(jī)苯(běn)基)-3-(4-硝基苯(běn)基)-5-(2,4-二(èr)磺酸苯)-2H-四唑(zuò)單(dān)鈉(nà)鹽(yán)】，它在電子(zǐ)載(zǎi)體(tǐ)1-甲(jiǎ)氧基-5-甲(jiǎ)基(jī)吩嗪鎓(wēng)liu酸2甲(jiǎ)酯(zhǐ)（1-Methoxy PMS）的作用下(xià)被細(xì)胞(bāo)中的(dí)脫(tuō)氫酶還(huán)原(yuán)為(wéi)具(jù)有高度水溶性(xìng)的(dí)黃色甲(jiǎ)瓚(zàn)產物（Formazan dye）
。生(shēng)成的(dí)甲瓚物的(dí)數量(liáng)與活(huó)細胞的數(shù)量(liáng)成正(zhèng)比(bǐ)
。因此可利用(yòng)這(zhè)一特性直接(jiē)進行細胞增(zēng)殖和(hé)毒(dú)性分析(xī)
。

用(yòng)途(tú)：藥物(wù)篩選(xuǎn)，細胞(bāo)增殖測定，細(xì)胞毒性(xìng)測定，腫瘤藥(yào)敏(mǐn)試(shì)驗
。

1，當(dāng)使(shǐ)用標準(zhǔn)96孔板時，貼壁細胞的最小接種量至少為1,000 個(gè)/孔 (100 μL 培(péi)養基(jī))
。檢測白細胞時(shí)的靈(líng)敏(mǐn)度相(xiāng)對(duì)較(jiào)低(dī)，因(yīn)此推薦(jiàn)接(jiē)種量不低(dī)於(yú)2,500 個(gè)/孔(kǒng) (100 μL培(péi)養基)
。

2，酚(fēn)紅和血(xiě)清對(duì)CCK8法(fǎ)的檢(jiǎn)測不會(huì)造(zào)成(chéng)幹(gān)擾，可以通(tōng)過(guò)扣除(chú)空(kōng)白孔中本底的(dí)吸光(guāng)度而消去
。

3，CCK8可以(yǐ)檢測(cè)大(dà)腸杆菌，但不(bù)能(néng)檢測酵(jiào)母(mǔ)細胞(bāo)
。在細胞增殖(zhí)實驗每(měi)次測(cè)定的(dí)過程中需要避(bì)免細(xì)菌(jūn)汙染，以免(miǎn)影(yǐng)響(xiǎng)結果
。

4，CCK-8在0~5℃下能夠(gòu)保存(cún)至(zhì)少6個月(yuè)，在-20℃下(xià)避光可以保存(cún)1年
。

5，當在培養(yǎng)箱(xiāng)內培養時，培(péi)養板(bǎn)最(zuì)外一(yī)圈的(dí)孔最(zuì)容(róng)易幹燥揮發，由於體(tǐ)積不準(zhǔn)確(què)而增加誤(wù)差(chà)
。一(yī)般(bān)情況下(xià)，最外(wài)一圈的(dí)孔(kǒng)隻加培養(yǎng)基，不作(zuò)為測定(dìng)孔(kǒng)用(yòng)
。

6，在培養基中(zhōng)加入(rù)CCK8，培(péi)養(yǎng)一定的(dí)時(shí)間，測(cè)定450 nm的(dí)吸(xī)光度即為空白對照
。在(zài)做(zuò)加藥(yào)實驗(yàn)時，還應考(kǎo)慮藥物的(dí)吸收，可在(zài)加(jiā)入(rù)藥物(wù)的培(péi)養基(jī)中加(jiā)入(rù)CCK8，培養一定(dìng)的(dí)時(shí)間(jiān)，測(cè)定450 nm的吸(xī)光度(dù)作為空白對照
。

7，金屬對CCK-8顯色(sè)有影(yǐng)響(xiǎng)：當(dāng)終(zhōng)濃度為(wéi)1 mM的(dí)氯化亞鉛，氯化鐵(tiě)，硫酸銅會抑製(zhì)5%，15%，90%的(dí)顯色反應，使靈敏度(dù)降(jiàng)級(jí)
。如果(guǒ)終濃度是(shì)10 mM的(dí)話(huà)，將(jiāng)會(huì)100%抑(yì)製(zhì)
。

8，懸浮(fú)細胞由於(yú)染色比(bǐ)較(jiào)困(kùn)難(nán)，一(yī)般(bān)需要增加(jiā)細(xì)胞數量和(hé)延長培養時(shí)間
。

天津(jīn)益元(yuán)利(lì)康(kāng)生物科技有(yǒu)限公司(sī)

一，輻射五(wǔ)大服(fú)務方(fāng)向：

  1.國內(nèi)試(shì)劑耗(hào)材(cái)經(jīng)銷代(dài)理；

  2.國外(wài)試(shì)劑(jì)訂(dìng)購（直訂(dìng)，或境外代理(lǐ)）；

  3.基因組測序(xù)（二代，二(èr)代+三代）；

  4.基因分型(xíng)（SNP檢測(cè)）：低/中(zhōng)/中 高通量項目(mù)；

  5.生(shēng)物樣本運(yùn)輸（國內，）；

二(èr)，多家代(dài)理品牌(pái)，涉(shè)及(jí)30多種較有(yǒu)名品牌，經營(yíng)代理500多(duō)個品(pǐn)牌(pái)：

Qiagen，Sigma，R&D，Epigentek，ThermoFisher，DNA Genotek，USA Scientific，Matreya，Sage Science，List Labs，Macrocyclics，Steraloids，NIBSC，mobio，immunodx，cellsystems，medicago，abcam，CST，Roche，Bethyl，sino Biological，clodrosome，adi BIO-WORLD，TOKU-E，HYPHEN BioMed，moltox，ZeptoMetrix，International Humic，biocytex，Toxin Technology  ，Streck，Elastin，biomax，Orflo Technologies，Accegen，Advbiomart，genlantis，R&D，Cygnus Technologies LLC，Enzyme Research，Bio/Data Corporation，Greer Lab ，Solarbio，bangslabs，bioline，musechem，Novocastra stemrd，hyphen-biomed，polyplus，moltox ，exiqon，pentapharm，verichemlabs，GenStar，ALZET，lucernatechnologies ，meridian，origene，zimmerpeacocktech，horizondiscovery，Reagents，megazyme，elisasystems………

  所有生(shēng)物試劑耗(hào)材(cái)都可(kě)以(yǐ)進口，特別是冷門品(pǐn)牌，均(jūn)能給客戶(hù)購(gòu)買(mǎi)到(dào)
。價格(gé)優，貨期(qī)短(duǎn)，可(kě)加急(jí)，快10天到(dào)貨；保(bǎo)證(zhèng)服務質(zhì)量(liáng)，所有(yǒu)產品均提供售後服(fú)務
。大部分客戶我(wǒ)們提供貨到付款服(fú)務(wù)，

  公司自成(chéng)立(lì)依靠(kào)過硬的(dí)服務和(hé)良好的信(xìn)譽與各大(dà)企事業(yè)單(dān)位，科(kē)研單位建立長(cháng)期合作
。客戶包(bāo)括(kuò)北(běi)大，清(qīng)華(huá)，地大，中科院各(gè)所(suǒ)，各(gè)大(dà)藥企(qǐ)等等
。

  專業(yè)訂(dìng)購(gòu)國(guó)內外(wài)試劑耗材(cái)，常備(bèi)現貨(huò)，一(yī)手貨源，歡(huān)迎合(hé)作(zuò)
。