全式金BL21(DE3)化學(xué)感(gǎn)受態細胞（CD601-03）是(shì)一種(zhǒng)適用於高效(xiào)外源基(jī)因蛋白(bái)表(biǎo)達(dá)的宿主菌(jūn)株。它使用T7 RNA聚合酶作(zuò)為(wéi)表(biǎo)達(dá)係統(tǒng)，該酶的(dí)表達受λ噬(shì)菌(jūn)體DE3區(qū)的(dí)lacUV5啟(qǐ)動子控製(zhì)。這個(gè)啟(qǐ)動子整合到BL21的(dí)染色(sè)體上(shàng)。全式(shì)金BL21(DE3)化學感受(shòu)態(tài)細胞(bāo)特(tè)別適用於非(fēi)毒(dú)性蛋(dàn)白(bái)的表達(dá)需求(qiú)。它被廣(guǎng)泛應(yīng)用於蛋白表達(dá)領域(yù)，可實現快(kuài)速(sù)，高效地產生大量(liáng)外(wài)源蛋(dàn)白。

Tans BL21(DE3)化(huà)學(xué)感(gǎn)受態細胞經(jīng)特(tè)殊(shū)工(gōng)藝(yì)製(zhì)作，可用於(yú)DNA的(dí)化學轉化(huà)。使用(yòng)pUC19質粒DNA檢測，轉化效(xiào)率高(gāo)達107cfu/μg DNA。使(shǐ)用Control PlasmidI(Amp+)用於(yú)檢(jiǎn)測(cè)細(xì)胞是否具(jù)有表(biǎo)達(dá)功(gōng)能(néng)，表達(dá)蛋白大小(xiǎo)為25 kDa. 該(gāi)菌株(zhū)可在-70℃保(bǎo)存(cún)六個月(yuè)，但不適(shì)合在液氮(dàn)中保存。

產品(pǐn)特點：

全(quán)式(shì)金(jīn)BL21(DE3)化學感受態(tài)細胞(bāo)（CD601-03）是一種理(lǐ)想的宿(sù)主(zhǔ)菌株(zhū)，用(yòng)於高效(xiào)表達外源基因的蛋白(bái)。它(tā)采用(yòng)T7 RNA聚(jù)合酶作為(wéi)表達(dá)係統，並由λ噬菌體DE3區(qū)的lacUV5啟(qǐ)動(dòng)子(zǐ)控製(zhì)T7 RNA聚(jù)合酶基因的(dí)表達(dá)。這個啟(qǐ)動子整(zhěng)合(hé)在BL21染色(sè)體(tǐ)上。該菌株非常適(shì)合表(biǎo)達(dá)非毒(dú)性(xìng)蛋(dàn)白(bái)。它(tā)被廣(guǎng)泛應用(yòng)於T7 RNA聚(jù)合酶(méi)為表(biǎo)達係統的(dí)高效外源(yuán)基(jī)因的蛋白表達領域。

操作方(fāng)法(fǎ)：

· 取(qǔ)50 ml冰浴上融(róng)化(huà)的感受(shòu)態細胞(bāo)，加入(rù)目的DNA，輕輕(qīng)混匀，在(zài)冰(bīng)浴中(zhōng)放置(zhì)30分鐘。

· 42℃水浴(yù)熱(rè)激45秒(miǎo)，然(rán)後快速將(jiāng)管(guǎn)轉(zhuǎn)移(yí)到冰(bīng)浴(yù)中2分鐘(zhōng)，該過程(chéng)不要搖(yáo)動離心(xīn)管(guǎn)。

· 向每個離心管(guǎn)中(zhōng)加入(rù)500 μ無菌的(dí)SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素)，混匀後置於(yú)37℃，200rpm培養1小(xiǎo)時使(shǐ)細(xì)菌復(fù)蘇。

· 根據(jù)實驗要求(qiú)(質(zhì)粒，重組(zǔ)連接產(chǎn)物(wù)轉化(huà))，吸取(qǔ)不同體(tǐ)積(jī)已轉(zhuǎn)化的感受態細(xì)胞(bāo)加(jiā)到(dào)含(hán)相應(yīng)抗生素(sù)的(dí)LB瓊脂(zhī)培(péi)養(yǎng)基上，將細胞(bāo)均(jūn)匀(yún)塗開。將(jiāng)平板置(zhì)於37℃至(zhì)液體(tǐ)被吸(xī)收(shōu)，倒(dǎo)置平(píng)板(bǎn)，37℃過夜(yè)培養。

注(zhù)意(yì)事(shì)項(xiàng)：

· 避(bì)免反復(fù)凍融(róng)：盡(jìn)量(liáng)避免頻繁(fán)地凍融(róng)細胞。每次解(jiě)凍後(hòu)，盡(jìn)可(kě)能立(lì)即進行轉化(huà)實(shí)驗，而(ér)不是將其再(zài)次冷凍。

· 避免使(shǐ)用(yòng)移(yí)液槍吹吸：在(zài)操作過(guò)程中(zhōng)，盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)使用移(yí)液槍(qiāng)進(jìn)行強力(lì)吸取(qǔ)和排放細胞。這(zhè)樣可以(yǐ)減(jiǎn)少對(duì)細(xì)胞的(dí)機(jī)械(xiè)壓力和(hé)損傷(shāng)。

· 輕柔(róu)操作：在整個(gè)操(cāo)作過(guò)程(chéng)中(zhōng)要(yào)注意輕(qīng)柔處(chǔ)理細胞(bāo)。避免(miǎn)過(guò)度(dù)搖動或(huò)震蕩(dàng)細胞，以防止細(xì)胞破(pò)裂(liè)或損(sǔn)壞。

產品(pǐn)選(xuǎn)購：